The effect of bovine growth hormone digested with trypsin on whole-body protein synthesis in vitro of chicken embryos was investigated by using a whole-embryo culture system. Bovine growth hormone at 5.3 and 530 ng/ml was digested partially and completely with trypsin for 4 min and 18 h, respectively. After culturing chicken embryos with a synthetic medium containing $L-[4-^3H]$ pheylalanine, whole-embryo protein synthesis was determined from the ratio of specific radioactivities of free and protein-bound pheylalanine. Whole-embryo protein synthesis of the control group cultured with no bovine growth hormone was $49.5{\pm}2.2%/d$. There was no significant interaction between digestion time and the concentration of trypsin-digested bovine growth hormone. Tryptic digestion of bovine growth hormone increased fractional synthesis rates of whole-body protein compared to the 0-min groups, and there was no significant difference between the 4-min and 18-h groups. The higher concentration (530 ng/ml) of trypsin-digested bovine growth hormone was more effective in enhancing whole-embryo protein synthesis than the lower concentration (5.3 ng/ml).
Anti-antibodies against three mouse monoclonal antibodies viz. IIB5D6, VIA6E8 and VIC1F9 (specific to bovine growth hormone) in rabbits have been generated and characterized. Ammonium sulfate fractionated and affinity-purified monoclonal antibodies were used for producing anti-antibodies. The generated anti-antibodies were against common as well as uncommon antigenic determinants present in mouse monoclonal antibodies. The raised anti-antibodies replaced [$I^125$ ]bGH bound to goat liver microsomes indicating production of anti-idiotypic antibodies against bovine growth hormone. These antibodies can have profound implications in vivo in lactating bovines for enhancing milk yield.
To investigate the fidelity of transgene transmission and expression, we produced transgenic mice carrying bovine $\beta$-casein/bovine grwoth hormone(bGH) fusion gene and examined transmission efficiency and expression level of the transgene in the founders and their progeny. The transgene was composed of 1.8 kb bovine $\beta$-casein promoter and 2.1 kb bGH gene. Ten transgenic mice were produced. Milk and mammary gland were collected from eight transgenic lines at 10-day lactation and a, pp.ied to Western and Northern blot analyses. The bGH expression was detected in four of them. The concentrations of bGH in milk were highly variable from 4$\mu\textrm{g}$/ml to 600$\mu\textrm{g}$/ml depending on the lines. The bGH mRNA level in mammary gland was closely correlated with the bGH concentration in milk in each transgenic line. These results indicated that bGH transgene expression was a, pp.opriately regulated in the mammary gland and secreted into milk in transgenic mice. By using two transgenic lines(#2, #7) secreting a considerable amoung of bGH into their milk, the inferitance and maintenance of transgenic phenotype were assessed in successive four generations. The mean transmission frequencies of transgene in lines #2 and #7 were 34% and 40%, respectively. The bGH concentration in milk were 80, 240, 120, 60$\mu\textrm{g}$/ml in each G0(generation 0), G2, G3, G4 generation of line #2 and 600, 1600, 860, 900$\mu\textrm{g}$/ml in each G1. G2, G3, G4 generation of line #7. These results demonstrated that bovine $\beta$-casein/bGH gene was stably transmitted from generation to generation in a Menelian fashion in trasgenic mice and consistenly expressed in their milk throughout the generations, although there was a little variation in the transmission frequency and expression level of the transgene between generations.
Proceedings of the Korean Society of Food Hygiene and Safety Conference
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1994.12a
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pp.15-26
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1994
Bovine somatotropin(bST) or bovine growth hormone (bGH) is a protein of 191 amino acids produced by the anterior pituitary gland of cattle. Recombinant bovine somatotropin(rbST) is biosynthetic versions of the naturally occurring pituitary hormone in cows. The use of rbST in dairy cows promises to improve the efficiency of milk production around the world. Using recombinant DNA technology, bST can now be produced in commercial quantities. The recombinant bST(rbST) is biologically identical to the found in the bovine pituitary. Milk from rbST-treated cows has been found to have the same nutritional value and composition as milk from untreated cows. In November of 1993, rbST finally was approved by the FDA, nearly 10 years after filing a licence applica-tion. rbST has been one of the most extensively studied animal drug products to be reviewed by the agency. Three scientific facts will help to reassure the public about the safety of the milk suppy.: 1. rbST has no biological activity in humans when indigested orally or when given by intramuscular injection. 2. Insulin-like growth factor 1(IGF-1) is not orally active. Any changes in IGF-1 levels in milk are well within normal variation and are lower than those reported in human milk. 3. All cow's milk contains bST, and no significant change in bST levels in milk occurs as a result of giving cows supplemental bST. Based on the scientific evidence, the public can be confident that milk and meat from rbST-treated cows is safe to consumers.
The recombinant bovine somatotropin (rBST) was administered to the oliver flounder, Paralichthys olivaceus, to know the effects and optimal administration frequency and dosage of the hormone. The experiment was conducted with three different treatment groups (A, B and C) designated based on the duration and administration frequency of rBST and one control (D) from April 14, 1996 to March 16, 1997. The fish of hormone treated groups grew 7.86 to 10.07% (47.45 to 60.75 g in weight) better than the control at the end of the experiment (P<0.05). No significant differences in their growth were detected among treatment groups. The distinct growth improvement was recognized four weeks after completion of the first four hormone administration. When considering water temperatures measured from the experimental tanks, the effect of rBST on the flounder was greater during the period showing relatively lower temperature. The survival rates were higher in treatment groups than in the control, revealing 98.3% (A), 98.4% (B), 97.7% (C) and 93.1% (D) during the first stage of culture; 92.7% (A), 91.3% (B), 86.7% (C) and 80.0% (D) during the second stage of culture.
Results on localization of growth hormone receptor (GHR), interaction of growth hormone (GH) with receptor in buffalo adipose tissue and identification of activated signaling molecules in the action of GH are presented. Bovine GH (bGH) was labeled with fluorescein or biotin. Fluorescein-labelled bGH was used for localization of GHRs in buffalo adipocytes. The receptors were present on the cell surface. The affinity of binding of GH to its receptor was determined by designing an experiment in which buffalo adipose tissue explants, biotinylated GH and streptavidin-peroxidase conjugate were employed. The affinity constant was calculated to be $2{\times}10^8M^{-1}$. The receptor density on adipose tissue was found to be 1 femto mole per mg of tissue. Signalling molecules generated in the action of GH were tentatively identified by employing Western blot and enhanced chemiluminescence techniques using anti-phosphotyrosine antibody. Based on molecular weights of proteins reactive to anti-phosphotyrosine antibody, three signaling molecules viz. insulin receptor substrate, Janus activated kinase (Jak) and mitogen activated protein were tentatively identified. These signaling molecules appeared in a time (incubation time of explants with growth hormone) dependent way. The activation of Jak2 was confirmed by employing anti-Jak2 antibody in a Western blot. The activation of Jak2 occurred during 5 min incubation of buffalo adipose tissue explants with GH and incubation for an additional period, viz. 30 min. or 60 min., resulted in a drastic reduction in activation. The results suggest that Jak2 activation is an early event in the action of GH in buffalo adipose tissue.
The purpose of this study was to find any association of the bovine growth hormone (bGH) gene with growth and carcass quality traits in Korean native cattle, Hanwoo. Genomic DNA was extracted from 21 Hanwoo individuals, and the 47 to 2,528 bp region of the bGH 2,856 bp (GenBank accession number M57764) including the promoter and the five exons was sequenced. A total of ten bGH SNPs were confirmed, including four (253 C>T, 303 C>T, 502 C>T, and 559 G>A) in the promoter, one (679 C>T) in exon 1, one (1,692 T>C) in intron 3, and four (2141 C>G, 2258 C>T, 2277 C>T, and 2291 A>C) in exon 5. The ten bGH SNPs were genotyped for a sample of 242 Hanwoo steers and association tests were performed to find any significant SNP that was correlated with growth and carcass quality. Of the SNPs, the 303 C>T SNP in the promoter region was significantly associated with 6-month-old weight, the 559 G>A SNP with longissimus dorsi muscle area, the 2141 C>G SNP in exon 5 with daily weight gain, and the 2258 C>T SNP with daily weight gain and carcass weight (p<0.05). The significant SNPs need to be verified in other Hanwoo populations before considering implementation of marker-assisted selection for genetic improvement of growth and carcass quality in Hanwoo.
A number of developments have occurred over recent years that are being used commercially or have the potential to increase the milk yield and consequently the efficiency of dairy cows. Bovine growth hormone is the most widely known of several attempts that have been made to alter the metabolic endocrinology of dairy cows to increase the rate of milk secretion. The factors affecting the milk yield response to growth hormone, growth hormone-releasing factor, thyroxine and placental lactogen as well as to the immuno-neutralization of somatostatin are briefly considered. Secondly, the recent greater understanding of the mechanism by which the milk yield is increased following more frequent milking, which has resulted from the identification and characterization of the feedback inhibitor of lactation (FIL) protein, is reviewed. The identification of this protein provides new avenues of research which may lead to a reduction in the rate of decline in milk yield with advancing lactation or to undiminished milk yields despite a reduction in frequency with which the animals are milked.
Bovine theileriosis caused by Theileria sergenti is the tick-borne intraery- throcytic piroplasmosis, that occurs in most regions of Korea. It results in severe economic losses on a farm caused by anemia, milk production loss, abortion and death. This study was undertaken to confirm the effects of the growth hormone and the insulin-like growth factor-I which are associated in the growth of cattle infected by T sergenti. The blood of one hundred and twenty ten-month Holstein was collected and the prepared blood smear was stained with acridine orange to investigate their parasitemia. And the hematological profiles were observed. According to the value of the hematocrit, they were categorized into four groups : Group 1 was under 20 percent, groups 2 and 3 were from over 21 to under 30 percent and from over 31 to under 35 percent and group 4 was over 36 percent. As the value of the hematocrit decreased, parasitemia(%) in erythrocytes was observed to increase(Y=-1.064X + 30.537, r=0.660). The amounts of the growth hormone and the insulin-like growth factor-I in the serum were measured by the radioimmunoassay. The growth hormone in serum of the group 1, group 2, group 3 and group 4 were observed as $0.238{\pm}0.043nmol/l$, $0.21{\pm}0.024nmol/l$, $0.366{\pm}0.035nmol/l$ and $0.646{\pm}0.223nmol/l$, respectively. The quantitative of the insulin-like growth factor-I in the same groups were observed also as $209.686{\pm}18.94ng/ml$, $250.9{\pm}12.609ng/ml$, $279.3{\pm}8.883ng/ml$ and $365.9{\pm}22.45ng/ml$, respectively. It can be concluded that the growth hormone and the insulin-like growth factor-I were observed to decrease in severe anemia due to theileriosis.
This experiment was carried out to develop the model system for mass production of biomedical and nutritional proteins (human proteins) through mamraary gland of the transgenic cattle produced by gene manipulation and embryological technologies. Human growth hormone gene fused with rat $\beta$-casein gene promoter was microinjected into pronuclei of one cell bovine embryos produced by in vitro fertilization. After microinjection, embryos were cultured in vitro for 6 or 7 days. Twenty embryos reaching to blastocysts were transferred to 10 beef recipients, each receiving two embryos. Recipients were diagnosed for pregnancy by rectal palpation at 76 days after embryo transfer. One of them was pregnant to term and produced a female calf weighing 21 kg at 280 days following embryo transfer. DNA was extracted from umbilical cord tissue and blood of calf born for confirming gene insertion. As determined by Southern hybridization, the transgene was not found.
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