Staphylococcus aureus is one of the major pathogens causing bovine mastitis and foodborne diseases associated with dairy products. To determine the genetic relationships between human and bovine or bovine isolates of S. aureus, various molecular methods have been used. Previously we developed an rpoB sequence typing (RSTing) method for molecular differentiation of S. aureus isolates and identification of RpoB-related antibiotic resistance. In this study, we performed spa typing and RSTing with 84 isolates from mastitic cows (22 farms, 72 cows, and 84 udders) and developed a molecular prophage typing (mPPTing) method for molecular epidemiological analysis of bovine mastitis. To compare the results, human isolates from patients (n = 14) and GenBank (n = 166) were used for real and in silico RSTing and mPPTing, respectively. Based on the results, RST10-2 and RST4-1 were the most common rpoB sequence types (RSTs) in cows and humans, respectively, and most isolates from cows and humans clearly differed. Antibiotic resistance-related RSTs were not detected in the cow isolates. A single dominant prophage type and gradual evolution through prophage acquisition were apparent in most of the tested farms. Thus, RSTing and mPPTing are informative, simple, and economic methods for molecular epidemiological analysis of S. aureus infections.
Journal of the korean veterinary medical association
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v.16
no.1
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pp.1-24
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1980
Today 100 thousand dairy cows will be milked in Korea. A reasonable estimate of the prevelence of mastitis today in Korea is approximately $60\%$ of the cows infected-in an average of two quarters per cow. The greater part of the mastitis infec
A total of 2,065 quarter milk samples of 534 dair cows from 35 herds were examined for mastis and the results obtained were as follows: 1. 654 quarters (31.6%) of 301 dairy cows (56.3%) from 34 herds (97.1%) were infected with mastitis. It was found that 8 cows (1.5%) showed clinical mastitis and other cows were subclinical. 2. Low infection rate of mastis was shown in first delivery cattle and higher infection rate in more deliverable of cattle. 3. The main causative organisms of the matitis were Staphylococcus aureus (19.4%), Streptococcus agalactiae (11.3%) and Streptococcus dysgalatiae (5%). 4. The majority of causative organisms were very resistant to colistin and highly sensitive to tetracycline. Especially Streptococcus strains were highly sensitive to leukomycin, and Staphylococcus aureus were highly sensitive to tetracycline and the other bacteria were highly sensitive to tetracycline and kanamycin.
The diagnostic effects of the Modified Whiteside Test(M.W.T.) and the California Mastitis Test(C.M.T.) for detection of bovine mastitis were studied using 372 quarter milk samples collected from six dairy herds in suburbs of Suwon city in order to compare the effectiveness of the two methods. The leucocyte count and bacteriological observation were also performed to support analysing the results. The results obtained were as follows; 1. The CMT showed more specificity than MWT for leucocytes in the abnormal milk. 2. When comparison was based on Identical ratings, agreement was obtained in 56.4% of the samples. The stronger reaction had the higher agreement and the CMT was found to be more specific than MWT in detection of the sub-clinical mastitis. 3. The CMT reaction was instantaneous and sufficiently clear-cut. 4. The results of the CMT leucocyte count and bacteriological observation were completely agreed in 69.9% of the samples. When degrees of reaction and the leucocyte count were considered, the CMT showed agreement in 93.5% of the samples.
Kim, Tae-jong;Kim, Jong-bae;Lee, Seong-bae;Jeon, Young-soo
Korean Journal of Veterinary Research
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v.29
no.3
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pp.393-405
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1989
This study was carried out to treatment test for bovine mastitis by the determination of adenosine triphosphate (ATP) based on firefly bioluminescence. The results obtained are followed; 1. In the susceptibility test, cephalothin which looks the most effective were sensitive to Staphylococcus sp. (72.3%), Micrococcus sp. (84.2%), Streptococcus sp. (72.7%) and Gram positive bacilli (72.7%), Gram negative bacilli were sensitive to gentamicin (92.3%) and Yeast-like-fungi was the most sensitive to clotrimazole, and nystatin in order. 2. When the number of bacteria, such as Staphylococcus aureus, Candida tropicalis isolated from the mastitis milk were counted by conventional agar plating technique, and compared with the concentration of bacterial ATP, it gave a good linear relationship. The content of ATP per Staphylococcus aureus, cell was 3.1fM and Candida tropicalis showed the high level of A TP (90fM). 3. The ATP assay was applied to the determination of minimal inhibitory concentration (MIC) of various antibiotics. When Staphylococcus aureus was incubated in the presence of different concentration of tetracycline, erythromycin, kanamycin and streptomycin sulfate and the growth was monitored by the conventional agar plating technique and ATP assay, both methods shown the same results that they were 1mcg/ml, 2mcg/ml, 6.25mcg/ml and 8mcg/ml, respectively. 4. For the determination of susceptibility of sensitive and resistant Staphylococcus au reus isolated for the milk with mastitis to tetracycline, erythromycin kanamycin and streptomycin sulfate, the minimum time required for the test was determined by the assay of ATP every 30 minutes during incubation of 3 hours at $37^{\circ}C$. ATP concentration time curve calculated on both resistant and sensitive strains incubated 3 hours as the optimum time for the determination of susceptibilities of various antibiotics exemed. The ATP concentration of each test broth (antibiotic containing), expressed as a percentage of its own control brith (antibioticfree) indicated values of 30% to be indicative of each antibiotic sensitivity. Single time point ATP assay carried out on the various sensitive and resistant of Staphylococcus aureus to antibiotics examined after 3 hours at $37^{\circ}C$ correlated exactly with disc diffusion and MIC. 5. In the cure of intramammary treatment of bovine mastitis in lactating quarters, the cure rate of Staphylococcal mastitis showed to cephalexin (80%), cloxacillin and gentamicin (70%), ampicillin and oxytetracycline (60%), and Streptococcal mastitis showed to cephalexin (85%), penicillin (80%), cloxacillin and oxytetracycline (75%), and ampicillin (70%), but intramammary antimycotic drug (clotrimazol) were only a little effect about fungal mastitis.
Kim, Tae-jong;Kim, Jong-bae;Lee, Seoung-bae;Jeon, Young-soo
Korean Journal of Veterinary Research
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v.29
no.3
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pp.383-391
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1989
This study was carried out to diagnostic test for bovine mastitis by the determination of adenosine triphosphate (ATP) based on firefly bioluminescence. The results obtained are follow; 1. The infection rate of bovine mastitis investigated with 521 cows in 47 dairy farms were found to be 3.6% of clinical form and 44.1% of subclinical form according to the degree of infection. 2. The light yield produced in firefly bioluminescence system was proportional to the concentration of ATP giving stright line within the range of 100PM~1uM. 3. When the number of somatic cell in milk was determined by the ATP assay and compared with three conventional methods such Fossomatic, California mastatic test (CMT), and rolling ball viscometer (RBV), it was shown that r=0.92 for Fossomatic, 0.63 for CMT and 0.7 for RBV. 4. The microorganisms causing mastitis were isolated Staphylococcus sp. (53.3%), Streptococcus sp. (17.9%), Micrococcus sp. (13.5%), Gram negative bacilli (6.3%), Gram positive bacilli (5.5%) and Yeast-like fungi (5.4%). 5. The endogeneous ATP levels of bacteria in a raw milk determined by the firefly bioluminescence system and compared with the results of the conventional methods. The correlation was 0.88 for raw milk.
Oregano (Origanum vulgare) is an aromatic herb belonging to the Lamiaceae family. This study evaluated the therapeutic effect of oregano essential oil (OEO) on clinical bovine mastitis caused by Staphylococcus (S.) aureus and/or Escherichia (E.) coli. Thirty-two quarters from 18 lactating cows with subclinical mastitis were selected from a dairy farm and were divided into 4 groups (8 quarters/group): negative control (CON), positive control (GEN) and two OEO-treated groups (OEO-1 and OEO-2). Each group was intramammarily treated with saline, 10 g/tube of gentamicin ointment, and single and double doses of 0.9 mL OEO ointment twice a day for three days, respectively. After the treatments, physical udder conditions were greatly improved in GEN and OEO groups. In CON group, somatic cell counts (SCCs), number of white blood cells (WBC) and bacteria were increased. However, in OEO groups, SCCs and number of WBC were significantly decreased and S. aureus and E. coli were not detected in milk as compared with those before the treatments as well as GEN group. These results suggest that OEO may be a useful alternative to antibiotics for the control of subclinical bovine mastitis caused by S. aureus and/or E. coli.
The combined effects of EDTA-Tris and eighteen antimicrobial agents have been evaluated in eight clinically isolated methicillin-resistant bacteria (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Streptococcus uberis and Streptococcus agalactiae) from bovine mastitis. The antimicrobial activity was evaluated by measuring the minimal bactericidal concentration (MBC) for the antibiotics alone or in combination with EDTA-Tris in Mueller-Hilton broth and milk. Combined use of EDTA-Tris and antibiotics potentiated or antagonized activity of antibiotics against mastitic pathogens. Milk increased the antibiotic potency of erythromycin and spiramycin on S. aureus. Culture in milk changed patterns of EDTA-Tris combinational effects compared with that in standard Mueller-Hilton broth. Combined with EDTA-Tris in milk, synergic effects were observed in colistin, dihydrostreptomycin, kanamycin, erythromycin, gentamycin, oxytetracycline, streptomycin to E. coli, Str. uberis, and Str. agalactiae. However, significant antagonistic effects of milk on antibiotic susceptibility in combination with EDTA-Tris were noted in neomycin, streptomycin, penicillin, roxithromycin, and amoxicillin. This study indicates that combination therapy of EDTA-Tris with antibiotics in bovine mastitis should be used with caution because of the possible antagonistic effects of antibiotic combination with EDTA-Tris on mastitic pathogens. In addition, antibiotic susceptibility test in combination with EDTA-Tris in milk culture condition can be benefit in search of effective treatment regimen for some antibiotic-resistant bacteria of mastitis.
Shem, M.N.;Mosha, F.A.;Machangu, R.;Kambarage, D.;Fujihara, T.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.15
no.5
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pp.751-756
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2002
A study was carried out to evaluate the incidences and causes of bovine mastitis in Tanzanian shorthorn zebu (Bos indicus) in the traditional sector and crossbred cows (Bos taurus${\times}$Bos indicus) in the dairy ranching sector, both found under the extensive range management system. Management practices were evaluated through a survey study using structured questionnaires. A total of 120 lactating cows (60 cows from each sector) were screened for the disease using the California Mastitis Test (CMT). Confirmatory tests used for infected cows included; the Direct Microscopic Somatic Cell Count (DMSCC), culture, bacteriological and biochemical laboratory assays. Survey results showed that management practices were generally very poor in both sectors with 84% of the surveyed herds being kept and milked under very unhygienic environmental conditions. The level of infection was higher in the crossbred cows (5% clinical and 38.3% sub-clinical mastitis) and lower in the zebu cows with only sub-clinical mastitis (23.3%). Crossbred cows had (p<0.05) higher somatic cell counts than zebu cows. The four highest-ranking bacterial isolates in order of importance were Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Streptococcus agalactiae and Bacillus spp. It was concluded that bovine mastitis under the extensive management system in Tanzania was a result of poor management practices and that zebu cows were more resistant to the diseases than crossbred cows.
Microorganisms were isolated and identified from bovine 296 quarters which showed positive reaction by California Mastitis Test (CMT) in 40 farms of Jeju from September 1999 to June 2000. The organisms associated with the mastitis of bovine were 11 different bacterial species in this study. Which of them, Staphylococcus aureus was the most predominant species as 152 (51.4%) isolates. Other identified species included 49 (16.5%) coliform, 47 (15.8%) Streptococcus dysgalactiae, 15 (5.1%) Bacillus spp., 8 (2.7%) Staphylococcus epidermidis, 6 (2.1%) Streptococcus agalactiae, 5 (1.7%) Enterococcus faecalis, 5 (1.7%) Corynebacterium spp., 3 (1.0%) Streptococcus uberis, 1 (0.3%) Pseudomonas aeruginosa and 1 (0.3%) Pasteurella haemolytica. Almost of all the islolated beacterial species showed high sensitivity against kanamycin (98.6%), cephalothin (98.0%), streptomycin (94.9%), gentamicin (94.6%), ampicillin (92.2%) and polymyxin B (90.2%). On the contrary, they showed resistance against penicillin (47.0%), tetracycline (37.2%), cefazolin (26.0%), bacitracin (22.6%) and erythromycin (19.9%). Eighty-one isolates were not resistant to any antibiotics and 215 drug resistant isolates showed 89 different drug resistance patterns from single to nine multiple antibiotics resistance patterns.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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