COVID-19 (Corona Virus Disease 2019) 감염증에 의한 주요 사망원인은 급성폐렴과 신체 전체에 나타나는 혈전증이며, 증가된 면역반응에 의한 사이토카인 폭풍(cytokine storm)은 고염증 상태와 함께 비정상적인 혈전생성을 더욱 활성화시키는 것으로 알려져 있다. 최근 혈전 생성을 억제하는 low molecular weight heparins의 사용이 사망률을 감소시키며, 대마 추출물이 COVID-19 증상의 완화 및 치료에 효과적임이 보고되었다. 본 연구에서는 대마 성분이 항혈전 활성에 기여하는지를 확인하고자, 대마 잎, 줄기, 뿌리, 미성숙 꽃 및 종실 추출물을 각각 조제하고 이를 대상으로 혈전 생성 억제활성을 평가한 결과, 모든 부위 추출물에서 우수한 항혈전 활성을 확인하였으며, 특히 대마 꽃 추출물에서 강력한 혈액응고인자 저해에 의한 혈전 생성 억제활성을 확인하였다. 그러나 대마꽃 추출물은 적혈구 용혈활성도 강력하여 향후 항혈전 활성물질의 분리가 필요하였다. 본 연구는 대마 부위별 추출물의 항응고 활성에 대한 최초 보고이며, 향후 국내에서 연구 및 사용이 제한된 대마를 이용한 고부가가치 생물소재 개발이 필요함을 제시하고 있다.
The acetone precipitates of the hot water extract of Torilis ftuctus showed strong hemostatic activity which was not inhibited by aspirin. This activity was not through platelet activation but possibly through activating some coagulation factors in plasma. The hemostatic action of the precipitates was not active by oral adminitration and no behavioral toxicity was appeared in treated mice. However, mice treated with the acetone precipitates through tail vein showed serious tremor and then were killed probably by the thrombus produced in the body. The hemostatic activity was still remained after treatment with $\beta$-glucosidase, $\beta$-alactosidase, $\alpha$-amylase, subtilisin BPN', or trypsin but completely lost by acid hydrolysis. The active components seemed to be a complex of unidentified macromolecules to which some phenolic compounds were strongly bound.
마가목의 열매인 마가자는 생식하거나 다류, 발효주로 제조되어 음용되며, 한방에서는 고혈압 및 관절염 치료 등에 사용되고 있다. 본 연구에서는 현재까지 보고되지 않은 마가자의 항혈전 활성을 평가하기 위해 울릉도 마가자의 ethanol 추출물 및 이의 순차적 유기용매 분획물을 조제하고 이의 혈액응고 저해 및 혈소판 응집저해 활성을 평가하였다. 그 결과, 마가자의 ethanol 추출물의 ethylacetate 분획에서 강력한 트롬빈, 프로트롬빈, 혈액응고인자 저해와 함께, 혈소판 응집저해 활성을, hexane 분획에서는 아스피린보다 강력한 혈소판 응집저해 활성을 확인하였다. 또한 마가자의 추출물 및 분획물들은 0.5 mg/ml 농도까지 인간 적혈구 용혈활성이 없음을 확인하여, 마가자의 활성분획물이 신규의 항혈전제로 사용 가능함을 제시하였다.
배경: 채혈 후 제제 경과시간에 따른 동결혈장의 혈액응고인자의 활성도와 이에 영향을 미치는 요인을 분석하여, 혈액응고인자제제의 원료혈장의 사용범위를 확장 가능한지 확인하고자 동결혈장의 채혈시간과 응고인자 특성을 측정하였다. 방법: ALT 부적격 혈장을 채혈 후 동결시간의 특성에 따라 4단계로 구분하였고, 6종류의 혈액 응고인자 활성도와 혈액형을 검사하였고, SAS 9.2 프로그램을 사용하여 통계처리 하였다. 결과: 혈액제제간 FVIII 활성도를 분석한 결과 PL-A>FFP>FP(8-24)${\approx}$FP(24-72) 순으로 유의하게 낮아졌고 혈액형에 따라서는 AB형이 제일 높고, O형이 제일 낮았다. 대한적십자사의 원료혈장에 대한 FVIII 활성 품질기준을 적용할 경우 PL-A, FFP와 FP24는 각각 85.0%와 82.5%로 적합하였다. 캐나다 퀘백 주처럼 FP24의 FVIII 활성이 0.52 IU/mL 이상을 적용할 경우 PL-A, FFP와 FP24는 각각 95.0%, 96.3%, 82.6%로 적합하였다. 또한 FP(8-24)의 A형과 AB형, FP(24-72)의 경우 AB형이 각각 82.1%, 83.3%, 100%로 적합하였다. 결론: 혈액응고인자제제용 원료혈장의 범위는 외국의 기준에 비추어 채혈 후 24시간 내에 동결된 혈장(FP24)으로 확대 사용이 가능하다. 이를 위해서는 채혈 후 동결시간과 혈액응고인자에 대한 품질기준을 유럽약전 또는 WHO 가이드라인과 비교하여 완화하는 것이 필요하다.
복분자는 당도가 낮고 신맛이 강해 과실주로 주로 제조되고 있으며, 복분자주 제조 후 부생되는 주박은 대부분 폐기되고 있다. 본 연구에서는 현재까지 생리활성이 보고된 바 없는 복분자주 주박을 대상으로 열수 추출물, ethanol 추출물 및 이들의 다양한 분획물을 조제하여 항균, 항산화 및 항혈전 활성을 평가하였다. 그 결과, 복분자주 주박의 ethylacetate (EA) 분획은 413~459 mg/g의 높은 polyphenol을 함유하고 있으며, 그람양성세균에 대한 강력한 성장억제 활성과, DPPH 음이온, ABTS 양이온에 대한 우수한 radical 소거능, nitrite 소거능 및 환원력을 나타내었다. 또한 혈액내의 thrombin, prothrombin, coagulation factor 에 대한 저해를 통한 혈액응고저해 활성이 우수하였다. 복분자주 주박의 butanol 분획은 우수한 항산화력과 함께 내인성 혈전 생성에 관련된 aPTT 연장활성을 나타내었으며, aspirin에 필적하는 강력한 혈소판 응집저해 활성을 나타내었다. 한편 복분자주 주박의 열수 추출물의 순차적 유기용매 분획 후의 물 잔류물은 aspirin보다 강력한 혈소판 응집저해를 나타내어 새로운 항혈소판제 개발 소재로 이용 가능함을 확인하였다. 본 연구결과는 폐기되고 있는 복분자주 주박을 이용한 고부가가치 식품 및 향장소재 개발이 가능함을 제시하고 있다.
청각에서 분리된 항응고 다당류의 혈액응고 저해기작을 검토하였다. 항응고성 다당 획분(CF-30 IV-ii, CF-30-IV)은 내인성 경로와 공통 경로에서 농도 의존적으로 작용한다. 항응고획분(CF -30-IV-ii)은 내인성 경로의 factor asaay시 lupus an ticoagulant 항체의 활성 에 영 향을 주지 않았으나 응고과정 중 factor Ⅷ, Ⅸ, \ulcorner, \ulcorner의 활성을 저해하였다. CF-30-IV-4-ii는 농도의 존적으로 fibrine을 생성시키지 않음으로써 thrombin에 직접 작용하지 않는 antithrombin m의존적 항응고 활성 기작을 보였다. 청각의 항응고 활성은factor assay와thrum bin의 저해 양식을 고려해볼 때 antithrombin III의 활성을 증대시켜 혈액응고 인자 중 serine proteinase의 활성을 저해함으로써 항응고 활성을 나타내는 물질로 판명되었다. CF-30-IV획분의 in vivo 활성을 측정한 결과 꼬리정 맥주사에 의해 150 mg/kg의 농도로 마우스에 투여시 thrombin에 대한 100%의 항치사성 효과를 나타내었다 또한 CF-30-IV를 마우스의 꼬리 정맥에 주입하고 혈액을 채취 ex vivo상에서 항응고 활성을 측정한 결과, 생체내에서 100mg1kg의 농도까지도 시료량에 의존하는 항응고 활성을 보였다
Objective : The purpose of this study was to evaluate the risk factors of hematoma enlargement in patients with spontaneous intracerebral hemorrhage(ICH). Methods : A series of 214 ICH patients diagnosed by brain CT scan in our neurosurgery department from June 1995 to July 1998 were reviewed with clinical status, past medical histories, laboratory findings, CT findings and prognosis. Results : In 27 patients(12.6%), the second CT scan showed an enlarged hematoma. Age, sex, and site of hematoma were not related to hematoma enlargement. A long interval(>6 hours) between the onset and the 1st CT scan strongly reduced the incidence of hematoma enlargement. The incidence of hematoma enlargement significantly increased in patients with previous history of hypertension, cerebral infarction and ICH. This analysis also demonstrated the following independent factors predisposed to hematoma enlargement : initial high systolic blood pressure, high serum total protein, low serum albumin, low serum sodium, prolonged prothrombin time(>14 sec) and activated partial thromboplastin time(>29.5 sec), irregular hematoma shape, and combined intraventricular hemorrhage. Prognosis in the group of hematoma enlargement showed high mortality(48.1%) and poor outcome. Conclusion : Patients with previous history of hypertension, cerebral infarction and ICH, and with high systolic blood pressure, prolonged coagulation time, irregular hematoma shape and intraventricular hemorrhage in CT scan should be observed carefully. And, early surgical therapy of large hematoma and meticulous control of blood pressure may decrease the mortality and morbidity in patients with spontaneous ICH.
Oh, Ji Hee;Kim, Yun Kyoung;Moon, Sanghoon;Kim, Young Jin;Kim, Bong-Jo
Genomics & Informatics
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제12권4호
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pp.225-230
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2014
Platelets are derived from the fragments that are formed from the cytoplasm of bone marrow megakaryocytes-small irregularly shaped anuclear cells. Platelets respond to vascular damage, contracts blood vessels, and attaches to the damaged region, thereby stopping bleeding, together with the action of blood coagulation factors. Platelet activation is known to affect genes associated with vascular risk factors, as well as with arteriosclerosis and myocardial infarction. Here, we performed a genome-wide association study with 352,228 single-nucleotide polymorphisms typed in 8,842 subjects of the Korea Association Resource (KARE) project and replicated the results in 7,861 subjects from an independent population. We identified genetic associations between platelet count and common variants nearby chromosome 4p16.1 ($p=1.46{\times}10^{10}$, in the KIAA0232 gene), 6p21 ($p=1.36{\times}10^{-7}$, in the BAK1 gene), and 12q24.12 ($p=1.11{\times}10^{-15}$, in the SH2B3 gene). Our results illustrate the value of large-scale discovery and a focus for several novel research avenues.
An edible marine red alga, Grateloupia filicina, collected from Jeju Island of Korea was hydrolyzed by cheap food-grade carbohydrases (Viscozyme, Celuclast, AMC, Termamyl, and Ultraflo) to investigate its anticoagulant activity. Among the tested enzymatic extracts of G. filicina, a Termamyl extract showed the highest anticoagulant activity. Anion-exchange chromatography on DEAE-cellulose and gel-permeation chromatography on Sepharose-4B were used to purify the active polysaccharide from the crude polysaccharide fraction of G. filicina. The purified sulfated polysaccharide (0.42 sulfate/total sugar) showed ${\sim}1,357kDa$ molecular mass and was comprised mainly of galactose(98%) and 1-2% of glucose. The sample showed potential anticoagulant activity on activated partial thromboplastin time (APTT) thrombin time (TT) assays. The purified G. filicina anticoagulant (GFA) inhibited the coagulation factor X (92%), factor II (82%), and factor VII (68%) of the coagulation cascade, and the molecular interaction (protein-polysaccharide) was highly enhanced in the presence of ATIII (antithrombin III). The dissociation constant of polysaccharide towards serine proteins decreased in the order of FXa (58.9 nM) >FIIa (74.6 nM) >FVII (109.3 nM). The low/less cytotoxicity of the polysaccharide benefits its use in the pharmaceutical industry; however, further studies that would help us to elucidate the mechanism of its activity are needed.
함초를 이용한 고부가가치 기능성 음료 개발 연구의 일환으로, 성숙한 함초의 잎, 줄기, 씨를 대상으로 ethanol 추출물을 조제하고 이들의 항산화 및 항혈전 활성을 평가하였다. 추출물의 총 폴리페놀 함량은 잎 > 줄기 > 씨의 순으로, 총 플라보노이드 함량은 잎 > 씨 = 줄기 순으로 나타났다. 총당 및 환원당 함량은 잎과 줄기에서 유사하게 나타났으며, 씨 추출물은 잎 추출물의 1/10 정도의 낮은 총당 및 환원당 함량을 나타내었다. 추출물의 항산화 활성을 RC50로 계산한 결과, DPPH 음이온 소거능, 환원력과 nitrite 소거능은 잎 > 씨 > 줄기, ABTS 양이온 소거능은 잎 = 씨 > 줄기 순으로 나타났다. 항응고 활성 평가결과, 씨 추출물에서 우수한 트롬빈 저해, 혈액응고인자 저해가 나타났으며, 모든 추출물에서 혈소판 응집저해활성 및 인간 적혈구 용혈활성은 나타나지 않았다. 본 연구는 함초 잎과 씨를 이용한 항혈전제 개발이 가능함을 제시하고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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