We report here the generation of transgenic chickens that produce human Thrombopoietin (hTPO) using replication-defective Moloney murine leukemia virus (MoMLV)-based vectors packaged with vesicular stomatitis virus G glycoprotein (VSV-G). For the retrovirus vectors, we used hCMV (human Cytomegalovirus) internal promoter to drive the hTPO gene. After confirming the expression of the hTPO gene in various target cells, the concentrated solution of recombinant retrovirus was injected beneath the blastoderm of non-incubated chicken embryos (stage X). The biological activity of the recombinant hTPO in target cell was significantly higher than its commercially available counterpart. Out of 132 injected eggs, 11 chicks hatched after 21 days of incubation and 4 hatched chicks were found to express vector-encoded hTPO gene. However, 3 out of the 4 transgenics died within one month of hatching. The major significance of this study is that it is one of the very few successful reports on the production of transgenic chickens as bioreactors aiming mass production of commercially valuable and biological active human cytokine proteins.
This study was conducted to investigate the productivity of biomass and antioxidant compounds in Polygonum multiflorum by culturing explants in air-lift bioreactor containing Murashige and Skoog (MS) medium, by adding different concentrations of auxins [indole-3-butyric acid (IBA) and naphthalene acetic acid (NAA)], sucrose, methyl jasmonate (MeJA), and salicylic acid (SA). Results of this study revealed that the explants culturing on the medium supplemented with $9.84{\mu}M$ IBA and 50 g/L sucrose were observed to have higher productivity of biomass and bioactive compound than other treatments used. Thus, we expect that these results will be helpful for large-scale production of biomass and antioxidant compounds from Polygonum multiflorum.
Biological treatment is a promising alternative to conventional air pollution control methods. Bioreactors for air pollution control have found most of their success in the treatment of dilute and high flow waste air streams containing volatile organic compounds and odor compounds. They offer several advantages over traditional technologies such as incineration or adsorption. These include lower treatment costs, absence of formation of secondary pollutants, no spent chemicals, low energy demand and low temperature treatment. The most widely used bioreactor for air pollution control is biofilter, but it has several limitations. In the past years major progress has been accomplished in the development of vapor phase bioreactor, in particular biotrickling filters. Biotrickling filters are more complex than biofilters, but are usually more effective, especially for the treatment of compounds which are difficult to degrade or compounds that generate acidic by-products. While the level of understanding of biotrickling filtration process for VOCs still remains limited, the evident success of biotreatment of VOC in air stimulated the pursue of acitve research. This paper presents fundamental and theoretical/practical aspect of air pollution control in biotrickling filter. Special emphasis is given to the operating parameters and the factors influencing performance for air pollution control in biotrickling filter.
Biological treatment is a relatively recent air pollution control technology in which off-gases containing biodegradable odors and volatile organic compounds(VOCs) are vented through microbes. It is a promising alternative to conventional air pollution control methods. Bioreactors for air pollution control have found most of their success in the treatment of dilute and high flow waste air streams containing VOCs and odor compounds. They offer several advantages over traditional technologies such as incineration or adsorption. These include lower treatment costs, absence of formation of secondary pollutants, no spent chemicals, low energy demand and low temperature treatment. The three most widely used technologies are described, namely biofiltration, biotrickling filtration, bioscrubbing. The most widely used bioreactor for air pollution control is biofilter, but it has several limitations. In the past years major progress has been accomplished in the development of vapor phase bioreaction systems, for solving problems of biofilter. Biotrickling filters are more complex than biofilters, but are usually more effective, especially for the treatment of compounds which are difficult to degrade or compounds that generate acidic by-products. This, paper reviews fundamental and theoretical/practical aspect of air pollution control in biofilter, biotrickling filter and bioscrubber, focusing more extensively on biotrickling filtration. Special emphasis is given to the operating parameters and the factors influencing performance for air pollution control, and cost estimation in biotreatment technologies.
In order to achieve high-level expression of interferon-${\alpha}1$ (IFN-${\alpha}1$) during fed-batch fermentation of recombinant E. coli, effects of oxygen supply and induction temperature on the expression of recombinant proteins were evaluated. Supplementation of oxygen and its transfer into cells is one of the most important parameters involved in the design and operation of mixing-sparging equipment for bioreactors. Generally, higher oxygen supply stimulates cell growth of aerobic microorganism and consequently the amount of products is increased. In this study, the optimum aeration strategy for the higher production of IFN-${\alpha}1$ during fed-batch fermentation of recombinant E. coli was surveyed. The growth of the cells was also monitored with four different concentrations of dissolved oxygen (DO; limiting, 20%, 35%, 50%) conditions. The DO was controlled by varying aeration rates of air and pure oxygen. Oxygen uptake rate (OUR) and specific oxygen uptake rate (SOUR) were evaluated and compared for the enhanced growth and induction of the cells and IFN-${\alpha}1$, respectively. We confirmed that increased DO by additional oxygen supply, up to 35%, can improve the production of IFN-${\alpha}1$ during the fermentation.
Kim, Eun-Ha;Kwon, Hyeok-Il;Park, Su-Jin;Kim, Young-Il;Si, Young-Jae;Lee, In-Won;Kim, Se mi;Kim, Soo-In;Ahn, Dong-Ho;Choi, Young-Ki
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.28
no.6
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pp.997-1006
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2018
As shown during the 2009 pandemic H1N1 (A(H1N1)pdm09) outbreak, egg-based influenza vaccine production technology is insufficient to meet global demands during an influenza pandemic. Therefore, there is a need to adapt cell culture-derived vaccine technology using suspended cell lines for more rapid and larger-scale vaccine production. In this study, we attempted to generate a high-growth influenza vaccine strain in MDCK cells using an A/Puerto/8/1934 (H1N1) vaccine seed strain. Following 48 serial passages with four rounds of virus plaque purification in MDCK cells, we were able to select several MDCK-adapted plaques that could grow over $10^8PFU/ml$. Genetic characterization revealed that these viruses mainly had amino acid substitutions in internal genes and exhibited higher polymerase activities. By using a series of Rg viruses, we demonstrated the essential residues of each gene and identified a set of high-growth strains in MDCK cells ($PB1_{D153N}$, $M1_{A137T}$, and $NS1_{N176S}$). In addition, we confirmed that in the context of the high-growth A/PR/8/34 backbone, A/California/7/2009 (H1N1), A/Perth/16/2009 (H3N2), and A/environment/Korea/deltaW150/2006 (H5N1) also showed significantly enhanced growth properties (more than $10^7PFU/ml$) in both attached- and suspended-MDCK cells compared with each representative virus and the original PR8 vaccine strain. Taken together, this study demonstrates the feasibility of a cell culture-derived approach to produce seed viruses for influenza vaccines that are cheap and can be grown promptly and vigorously as a substitute for egg-based vaccines. Thus, our results suggest that MDCK cell-based vaccine production is a feasible option for producing large-scale vaccines in case of pandemic outbreaks.
Park, Chang-Min;Joung, Min-Seok;Choi, Jong-Wan;Paek, Kee-Yoeup
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.34
no.2
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pp.137-142
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2008
Echinacea purpurea, an indian traditional plant medicine has been widely used as herbal remedy for the treatment of disease such as colds or other infections. However, Echinacea purpurea extracts recently have been applied as a cosmetic ingredient for skin care. We artificially cultured Echinacea purpurea by using the bioreactor culture system for this study. We induced callus from Echinacea purpurea and separated adventitious roots, harvested and extracted after cultured in bioreactors. Previously, several studies have been reported on anti-oxidant and immuno-enhancing effects of Echinacea purpurea extract but other efficacies were not well known. In this study, we investigated the whitening, anti-wrinkle and anti-oxidant effects to know applicable value of tissue-cultured Echinacea purpurea adventitious roots extract(TCEPARE) as a cosmetic ingredient. TCEPARE did not show cytotoxicity until a concentration of 2% and showed the anti-oxidative effect in DPPH and NBT tests. Also, the extract decreased tyrosinase expression in a dose-dependent manner and inhibited melanin synthesis in B16 melanoma cells. TCEPARE reduced protein levels of MMP-1, 2 secreted in culture medium or in cell lysates. From these results we suggest that TCEPARE has potential benefits applicable as to cosmetic ingredient for skin care products.
In order to select a suitable bioreactor type for the submerged cultivation of Ganoderma applanatum, both growth characteristics and polysaccharides production were compared among four different types of bioreactor. These include an external-loop type air-lift bioreactor (ETAB), a balloon type air bubble bioreactor (BTBB), a column type air bubble bioreactor (CTBB) and a stirrer type bioreactor (STB). The mycelial biomass produced from the reactors were in decreasing order: ETAB ($7\;g/{\ell}$) > BTBB ($6.2\;g/{\ell}$) > STB ($6\;g/{\ell}$) > CTBB ($5\;g/{\ell}$). Maximal soluble exopolysaccharides ($1\;g/{\ell}$) and endopolysaccharides (2.7%) were also obtained from ETAB. Thus, the ETAB was most suitable for submerged culture of G applanatum mycelium. Based on the results, ETAB was chosen for further detailed study. The most effective aeration rate for the mycelial growth in ETAB ranged from 0.05 to 0.1 vvm. For the maximal production, the mycelium at the initial growth stage needed low aeration rate to reduce cell damages by fluid flow. However, as the mycelia grew, the culture became viscous and thus needed higher aeration. The molecular weight of exopolysaccharides obtained from the culture grown in ETAB was higher than that from the culture grown in other bioreactors.
To find out the optimum conditions for indigo cell culture in air-lift bioreactor, effects of media composition including nutrients and precursors of the indigo colorants on the cell growth and characteristics of the cell growth under various cultural conditions were analyzed. Optimum cultural conditions were tested and the growth characteristics were analyzed in external and internal loop type air-lift bioreactors during 14-day culture. Better cell growth was obtained when the inoculum size was higher in the range of 0.5∼2.5% packed cell volume tested. In the sucrose concentration of 2 to 4%, the cell growth was better when the sucrose concentration was 4% (w/w) in both types of reactors. Sucrose was used up in the early stage of exponential phase of growth At the optimum concentration of a Precursor tryptophan at 1 U UW was 3.8 g/l in internal loop bioreactor, and 3.5 g/l in external one after 14 days of cultivation. Addition of indole showed negative effect on cell growth of suspension culture in air-lift biorector culture and cell mass of 2.5 g/l and 2.2 g/l were obtained in external and internal loop bioreactor, respectively. Selected inorganic nitrogen source potassium nitrate showed about 110% increase in cell growth than that of control. DCW was 16.34 g/l under optimum conditions during 14-day cultivation in internal loop bioreactor.
Wastewater treatment using membrane bioreactors has been extensively used to alleviate water shortage and pollution by improving the quality of the treated water discharged into the environment. However, membrane biofouling persistently holds back an MBR process by reducing the process efficiency. Herein, we synthesized carbon nanospheres (CNSs) with many hydrophilic oxygen groups and utilized them as an additive to prepare high-performance ultrafiltration (UF) membranes with hydrophilicity and porous pore structure. CNSs were found to form crescent-shaped pores on the membrane surface, increasing the mean surface pore size by about 40% without causing significant defects larger than bubble points, as the CNS content increased by 4.6 wt%. In addition, the porous pore structure of CNS composite membranes was also attributable to the CNS's isotropic morphologies and relatively low particle number density because the aforementioned properties contributed to preventing the polymer solution viscosity from soaring with the loading of CNS. However, too porous structure compromised the mechanical properties, such that CNS2.3 was the best from a comprehensive consideration including the pore structure and mechanical properties. As a result, CNS2.3 showed not only 2 times higher water permeability than CNS0 but also 5 times longer operation duration until membrane cleaning was required.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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