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이온쌍 역상 HPLC를 이용한 인체 말초혈액단핵구에서 이노신 5'-일인산 탈수소효소 활성의 정량적 측정 (Quantitative determination of inosine 5'-monophosphate dehydrogenase activity in human peripheral blood mononuclear cells by ion-pair reversed-phase high-performance liquid chromatography)

  • 신혜진;권순호;박지명;권순효;이경률;김영진;이상후
    • 분석과학
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    • 제23권6호
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    • pp.531-536
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    • 2010
  • 본 연구에서는 이온쌍 역상 HPLC/UV를 이용하여 건강한 한국인에서 분리된 말초혈액단핵구(PBMCs)에서 이노신 5'-일인산 탈수소효소(IMPDH)의 활성을 측정하였다. IMPDH는 이노신 5'-일인산(IMP)을 잔토신 5'-일인산(XMP)로 전환시키는 베타-니코틴아마이드 아데닌 디뉴클로티드 수화물(${\beta}-NAD^+$) 의존성 탈수소효소이며, 이것의 활성은 기질인 IMP와 조효소인 $NAD^+$의 존재 하에서 분해한 PBMCs로 부터 생성된 XMP에 해당하는 HPLC 크로마토그램을 정량적으로 분석함으로써 측정하였다. 생성된 XMP는 260 nm에서 검출하였다. 이동상으로는 7 mM tetra-n-butylammonium hydrogen sulfate가 포함된 37 mM potassium dihydrogen phosphate (pH 5.5)와 methanol의 혼합용액(85:15, v/v)을 사용하였으며, 유속은1 mL/min이었다. 정량 범위는 $0.2-50.0\;{\mu}M$이었으며, 이 때 정량 한계(LOQ)는 $0.2\;{\mu}M$이었다. 또한, 본 연구에서 확립된 시험법은 일내 정밀성(0.88-1.47%), 정확성(98.74-99.99%)과 일간 정밀성(0.85-5.24%), 정확성(99.95-101.65%)을 측정하여 검증하였다. 11명의 건강한 한국인에 대한 IMPDH 활성 측정 결과, 18.29-36.60 nmol/h/mg protein(평균값 $27.70{\pm}6.28\;nmol/h/mg$ protein)이었다.

기체크로마토그래피-전자포획검출기를 이용한 혈장 중의 Homocysteine, Cysteine 및 Methionine의 동시 분석법 (Determination of the Homocysteine, Cysteine and Methionine in Human Plasma by Gas Chromatography with Electron Capture Detector)

  • 명승운;장윤정;유은아;박준호;민혜기;김명수
    • 분석과학
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    • 제12권5호
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    • pp.408-414
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    • 1999
  • 기체 크로마토그래피-전자포획검출기 (gas chromatograph-electron capture detector : GC-ECD)를 이용하여 사람의 혈액 내에 존재하는 homocysteine (Hcy), 관련 화합물인 cysteine (Cys)과 methionine (Met)에 대해 선택적이고 감도 좋은 분석방법에 대하여 연구하였다. 시료는 혈장 내에서 환원과정을 거친 후 ethyl chloroformate (ECF)와 pentafluoropropyl alcohol (PEP-OH) 유도체화 시약을 사용하여 N(O,S)-ethylearhonyl pentafluoropropyl (PEP) ester 유도체를 만들어 추출의 효율을 높이면서 동시에 GC-ECD에 대한 크로마토그래피 성질을 향상시켰다. 생성된 유도체들은 chloroform으로 추출한 후 잔류물을 완전히 건조시키고 hexane으로 추출하여 GC-ECD로 분석하였다. Hcy와 Met는 $5-50{\mu}mol/L$, Cys는 $40-400{\mu}mol/L$ 범위에서 $R^2=0.990$ 이상의 직선상의 상관관계를 나타내었다. 이 작성한 질량곡선을 통해서 5명의 자원자들의 혈액 중에 존재하는 Hcy, Cys, met의 함량을 분석하였다.

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증발법과 GC/MS를 이용한 수질 시료 중의 Amitrole의 분석법 연구 (Determination of Amitrole in Water Samples by Evaporation and GC/MS)

  • 윤소희;홍지은;표희수;박송자
    • 분석과학
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    • 제16권6호
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    • pp.483-487
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    • 2003
  • Triazole 계의 대표적인 농약 중 하나인 amitrole (3-amino-1,2,4-triazole)은 널리 사용되고 있는 제초제로, 환경 중에 유입될 경우 지하수 및 지표수를 오염시킴으로써 궁극적으로 음용수의 오염까지 일으킬 수 있다. 이 물질은 물에 대한 용해도가 높은 반면, 유기 용매에 대한 용해도가 낮고 극성이 강하기 때문에 수질 시료로부터 추출하기 매우 어렵다. 본 연구에서는 수질 시료중의 amitrole을 GC/MS를 이용하여 ppb 수준 이하의 극미량까지 분석하기 위한 방법을 조사하였다. 10 mL의 수질 시료를 진공회전증발기로 완전히 증발시킨 후, isobutyl chloroformate (iso-BCF)를 사용하여 실온에서 15~20분간 반응시켜 유도체화 하였다. 그 결과, N-isobutoxycarbonyl amitrole derivative를 생성함으로써 GC/MS에서의 감도가 향상됨을 확인할 수 있었다. $1.0{\mu}g/L$, $10.0{\mu}g/L$$100.0{\mu}g/L$ 농도의 수질에서 본 분석방법의 회수율은 각각 98.0%, 94.9% 및 105.3%였고, RSD는 2.4%, 2.8% 및 1.5%였다. 10 mL의 수질 시료로부터 얻어진 검량선의 상관계수는 $0.1{\sim}100.0{\mu}g/L$의 농도 범위에서 0.997로 나타나 직선성이 우수하였으며, 검출한계는 $0.1{\mu}g/L$로 나타났다.

대기중 다환 방향족 탄화수소류의 분석에 관한 연구 (A Study on the Analysis of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Air)

  • 표희수;홍지은;이강진;박송자;이원
    • 분석과학
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    • 제13권4호
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    • pp.453-465
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    • 2000
  • 환경중 다환 방향족 탄화수소류(PAHs)는 유기물의 연소중의 열합성에 의해서 주로 발생하며 강한 발암성물질로 알려져 있다. 또한 도시 대기중의 PAHs는 주로 자동차 배기가스 및 주택연료의 불완전연소에 의해서 발생하는 것으로 알려져 있으며, 국내에서도 자동차의 수요 급중과 도시난방의 서구화에 따라 도시 대기중 PAHs의 증가가 우려되며 이에따라 대기중 PAHs의 인체 위해성 평가가 시급한 실정이다. 본 연구에서는 위해성 평가를 위한 기초 조사로서 1996년 4월부터 1997년 1월가지 1년에 4차례에 걸쳐 서울을 비롯한 6대 도시 14개 지역에서의 대기중의 23종의 PAHs농도를 측정하였다. 분석 결과 총 263종의 거의 모든 시료에서 14종의 PAHs가 검출되었으며 1년간 총 PAHs의 평균 농도는 $28.72ng/m^3$이었고, 겨울철(평균 $47.76ng/m^3$)에 가장 높은 농도로 검출되었다. 각 시료에서 추출된 총 유기물질(EOM ; Exoacted Organic Material)과 총 PAHs 농도는 대체로 비례하였으며 EOM에 함유된 총 PAHs는 평균 0.28%로 조사되었다. 본 실험 결과 PAH의 위해성 평가가 수행되어야 할 것으로 기대되며 계절별 시료 분석을 지속적으로 수행하여 보다 신뢰성 있는 데이타 구축이 필요하다.

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Developmental and Neurobehavioral Effects of Mycotoxin Fumonisin B1 in Rats

  • Kwon, Oh-Seung;Ryu, Jae-Chun
    • Toxicological Research
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    • 제16권2호
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    • pp.117-124
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    • 2000
  • The objective of this experiment is to investigate neurobehavioral and developmental effects of fumonisin B1 (FB1) after prenatal FB1 administration in rats. FB1 (0.8 or 1.6 mg/kg) was orally exposed to pregnant rats during gestational days 13 to 20, whereas the vehicle alone was administered to control group. Maternal and offspring body weights, physical landmarks of incisor eruption, eye opening, testes descending and vaginal opening, open field activity, running wheel activity, and complex maze performance were included as endpoints for developmental and neurobehavioral measurement. Maternal body weights were not signfficantly altered after FB1 exposure. Percentage of maternal weight gain difference between control and 1.6 mg/kg FBI groups was about 4%. Pre- and post-weanling weight of offsprings after prenatal exposure to FB1 was not signfficantly changed, suggesting that FB1 at 0.8 or 1.6 kg/kg doses may not cross the placenta. Significant gender difference in running wheel activity on postnatal days 57 to 63 and complex maze performance on postnatal days 75 to 78 was observed.

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Metabolism and Disposition of Myristicin in the Isolated Perfused Rat Liver

  • Jeong, Chang Kyun;Kim, Kyun;Lee, Hye Suk
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제44권4호
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    • pp.180-184
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    • 2001
  • To investigate the hepatic metabolism of myristicin isolated rat livers were perfused under single-pass conditions with perfusate containing myristicin. In outflow perfusate and bile, 5-allyl-1-methoxy-2,3-dihydroxybenzene (M1), M1-sulfate, and M1-glucuronide conjugates were identified as the metabolites of myristicin. HPLC method with UV detection was applied to investigate the hepatic disposition of the compounds. The concentration of myristicin, M1, and M1-conjugates in the outflow perfusate reached steady-state levels within 20 min after commencing the perfusion of $4.5{\mu}M$ myristicin. At steady-state, the mean (${\pm}S.D.$) extraction ratio of myristicin was $0.49({\pm}0.16)$ and clearance was $13.7({\pm}4.5)ml/min$. M1 accounted for $44.0{\pm}5.3%$ of eliminated myristicin and was recovered as unchanged M1, M1-sulfate, and M1-glucuronide in the bile and outflow perfusate.

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자궁근종 성장에 있어서 내인성 성호르몬의 역할 (Urinary Profiles of the Endogenous Steroids in Pre-Menopausal Women with Uterine Leiomyoma)

  • 정병화;배상욱;정봉철;김세광;박기현
    • Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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    • 제30권1호
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    • pp.23-29
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    • 2003
  • 목 적: 본 연구의 목적은 내인성 성호르몬이 자궁근종의 성장에 미치는 영향을 알아보고자 연구를 시행하였다. 연구대상 및 방법: 폐경전 자궁근종 환자 27명과 같은 연령대의 정상여성 25명을 대상으로 하였다. 모든 대상군의 여성에서 24시간 소변을 모아서 소변내 estrogen, androgen의 대사체들을 GC-MS를 이용하여 측정하였으며 두 군에서의 차이를 비교분석 하였다. 결 과: 소변내 $17{\beta}$-estradiol, 5-androstene-$3{\beta}$, $16{\beta}$, $17{\beta}$-triol, 11-keto-ethiocholanolone, $11{\beta}$-hydroxy-androsterone, THS, THA, THE, a-cortolone, a-cortol 및 $\beta$-cortol가 환자군에서 의의있게 증가하였으며 $17{\beta}$estradiol/estrone 및 $11{\beta}$-hydroxy-ethiocholanolone/$11{\beta}$-hydroxy-androsterone도 환자군에서 의의있게 증가하였다. 결 론: 자궁근종의 성장은 요중 estrogen과 androgen의 농도와 밀접한 관련이 있으며 이는 환자의 스테로이드 호르몬 대사 감소에 기인한 것으로 사료된다.