To investigate the production and characteristics of thermostable levan sucrase from Rahnella aquatilis ATCC 33071, the levan sucrase gene from R. aquatilis was cloned and expressed in Escherichia coli without induction system. Expression of levansucrase gene in E. coli had no notable or detrimental effect on the growth of host strain, and the recombinant levan sucrase exhibited levan synthesis activity. Levansucrase was secreted to the periplasm in E. coli, and addition of $0.5\%$ glycine yielded further secretion of levansucrase to the growth medium and resulted in an increase of total levansucrase activity. Furthermore, the cellular levansucrase was evaluated for the production of levan by using toluenepermeabilized whole-cells. The levansucrase was thermostable at $37^{\circ}C$. The molecular size oflevan was $1{\times}\;10^{6}$ Da, as determined by HPLC, and the degree of polymerization of levan varied with incubation temperatures: Low incubation temperature was preferable for the production of high-molecular size levan. The present study demonstrated that the mass production of levan and levan oligosaccharides can be achieved by glycine supplementation to the growth medium or by toluenepermeabilized whole-cells.
In the search for a novel cytotoxic substance from medicinal plants, HY53 ($C_{17}H_{32}O_2N_2$; molecular weight 296) was isolated from the leaves of Pata de Vaca (Bauhinia forficata). The growth of the HepG2 cells was inhibited in a dose-dependent manner when treated with 0.07 to 0.40 mM HY53 for 24 h (IC$_{50}$: 0.13 mM). Furthermore, nuclear DAPI staining revealed the typical nuclear features of apoptosis in the HepG2 cells exposed to 0.27 mM HY53, whereas a flow cytometric analysis of the HepG2 cells using propidium iodide showed that the apoptotic cell population increased gradually from 8% at 0 mM to 23% at 0.14 mM and 45% at 0.40 mM after being exposed to each concentration of HY53 for 24 h. Moreover, a TUNEL assay also exhibited the apoptotic induction of the HepG2 cells treated with HY53. To obtain further information on the HY53-induced apoptosis, the expression level of certain apoptosis-associated proteins was examined using a Western blot analysis. Treatment of the HepG2 cells with HY53 resulted in the activation of caspase-3, and subsequent proteolytic cleavage of poly(ADP-ribose) polymerase (PARP). Consequently, the results confirmed that the apoptosis in the HepG2 cells was induced by HY53 and the involvement of caspase-3-mediated PARP cleavage in the apoptotic process.
The effectiveness of a proteinaceous fibrous material formed during commercial fermentation of soy protein (PFSP) and cysteine addition were evaluated in order to improve on the properties of soy protein-based films. Nine types of films were prepared at pH 7, 9, and 11, with heat treatments at $70^{\circ}C\;and\;90^{\circ}C$ for 30 min, by casting 5% (w/w) PFSP aqueous solution, containing 2.25% (w/w) glycerol, on to polystyrene plates. The tensile strength (TS) of films ranged from 3.88 to 6.87 MPa. The highest puncture strength (PS) was observed with pH 7.0 films prepared from PFSP solution heated at $70^{\circ}C$ (P<0.05). Alkaline pH and temperature caused a decrease in both the TS and PS of the films. The thickness of films ranged from $58\;to\;74{\mu}m$. Water vapor permeabilities of the films decreased with increasing pH and temperature. To produce films from PFSP, pH value of 7.0 to 9.0 and heat treatment of $70^{\circ}C\;to\;90^{\circ}C$ were needed. A soluble nature of PFSP films in water might be useful for preparation of hot water-soluble pouches. Cysteine addition could be necessary to produce films with increased TS and enhanced barrier properties. The combination treatment that provided the best combination of barrier and mechanical properties was the PFSP film prepared at pH 7.0 with addition of 1% cysteine. The films were good oxygen barriers.
In the course of screening for a novel cell cycle inhibitor, a potent Cdk 1 inhibitor, HY558, was found from the culture broth of Penicillium minioluteum F558 isolated from a soil sample. The molecular ion of HY558 was identified at m/z 329 (MH+) with a molecular formula of $C_20H_44ON_2$. HY558 exhibited selective antiproliferative effects on various human cancer cell lines. Its $IC_50$ values were estimated to be 0.29 mM on HepG2, 0.30 mM on HeLa, 0.30 mM on HL6O, 0.33 mM on HT-29, and 0.25 mM on AGS cells. Interestingly, Hy558 demonstrated no antiproliferative effect with normal lymphocytes used as the control, and a low level of inhibition on the proliferation of A549 cancer cells. A flow cytometric analysis of HepG2 cells revealed an appreciable arrest of cells at the G1 and G2/M phases of the cell cycle following treatment with Hy558. furthermore, DNA fragmentation due to apoptosis was observed in HeLa cells treated with 0.46 mM of HY558.
Kim, Min-Kyoung;Cho, Youl-Hee;Kim, Jung-Mogg;Chun, Moon-Woo;Lee, Seung-Ki;Lim, Yoong-Ho;Lee, Chul-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제13권4호
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pp.607-612
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2003
To elucidate the action mechanism of MCS-C2, a novel analogue of toyocamycin and sangivamycin, its effect on the expression of cell cycle-related proteins in the human myelocytic leukemia cell line HL-60 was examined using Western blotting and a flow cytometric analysis. MCS-C2, a selective inhibitor of cyclin-dependent kinases, was found to inhibit cell growth in a time- and dose-dependent manner, and inhibits cell cycle progression by inducing the arrest at G1 and G2/M phases, in HL-60 cells. The flow cytometric analysis revealed an appreciable arrest of cells in the G2/M phase of the cell cycle after treatment with MCS-C2. The HL-60 cell population increased gradually from 13% at 0 h, to 28% at 12 h in the G2/M phase, after exposure to $2{\;}\mu\textrm{M}$ MCS-C2. Furthermore, Western blot analysis demonstrated that MCS-C2 induced the cell cycle arrest at G1 phase through the inhibition of pRb phosphorylation. Hypophosphorylated pRb accumulated after treatment with $5{\;}\mu\textrm{M}$ MCS-C2 for 12 h, whereas, the level of hyperphosphorylated pRb was reduced. Thus, treatment of the cell with MCS-C2 suppressed the hyperphosphorylated form of pRb with a commensurate increase in the hypophosphorylated form.
최근 소셜 네트워크, 시맨틱 웹, 바이오 인포매틱스 등 여러 응용 분야에서 그래프 구조를 갖는 대용량 데이터들에 활용됨에 따라 이런 데이터들에 대한 키워드 기반 검색 방법이 많은 관심을 받고 있다. 본 논문에서는 그래프 구조 데이터에 대한 키워드 질의에 대해 질의와 연관성이 높으면서 구조적인 중복성을 갖지 않는 top-k 결과 집합을 효율적으로 검색하는 방법을 제안한다. 키워드 질의에 대한 비-중복적인 결과 트리 구조와 그것의 연관도 척도를 정의하고, 그래프 내에 포함된 유용한 경로 정보들에 대한 효과적인 인덱싱 방법을 제안한다. 그리고 기 생성된 인덱스를 활용하여 주어진 키워드 질의에 대해 비-중복적이면서 연관도가 큰 top-k 결과 집합을 생성하는 효율적인 질의 처리 알고리즘을 제시한다. 실 데이터를 이용한 실험을 통해 제안한 방법의 효과와 성능을 기존 방법과 비교 분석한다.
Kim, Yun-Young;Jang, Ki-Hyo;Lee, Eun-Young;Yunhi Cho;Kang, Soon-Ah;Ha, Woel-Kyu;Ryowon Choue
Nutritional Sciences
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제7권3호
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pp.151-157
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2004
The aim of this study was to investigate the effects of chicory fructan fiber supplementation on bone mineral density, apparent absorption of minerals and serum parameters related to bone turnover in postmenopausal women. Twenty-six healthy Korean postmenopausal women participated in the study. 1be participants were randomly divided into two groups in a double-blind parallel design and took one of the supplements for 3 months; either a placebo of 8g maltodextrins/sucrose mixture (control group) or 8g chicory fructan fiber (fructan group). During the 3-month experimental period no differences were found in bone mineral density (BMD) between the two groups. Apparent calcium absorption significantly increased by 42% in the fructan group, while that of the control group decreased by 29% as compared to the values at baseline. Urinary calcium excretion was not significantly different between the group;;. After 3 months, the level of serum alkaline phosphatase (ALP) was significantly lower in the fructan group than in the control group and deoxypyridinolin showed a trend toward a slight reduction. In conclusion, intake of chicory fructan fiber with a regular increases apparent calcium absorption in postmenopausal women.
변산반도국립공원에 위치한 내소사 주변 능선부의 식생구조를 파악하고자 세봉관음봉 구간에 방형구($400m^2$) 23개를 설정하여 식생을 조사하였다. 식물 군집분석을 통하여 분류한 결과 소나무군집과 소나무-굴참나무-졸참나무군집으로 분류되었다. 변산반도 내소사지역의 세봉관음봉지역은 대부분이 소나무, 굴참나무, 졸참나무, 서어나무, 신갈나무 등이 우점하고 있었다. 이 지역에서 굴참나무, 소나무가 부분적으로 우점종으로 분포하고 있으나 소나무의 상대우점치는 점점 작아지고 상대적으로 굴참나무, 졸참나무, 서어나무, 신갈나무의 우점치가 점차 커질 것으로 예상된다. 수종간의 상관관계에서는 굴참나무와 쇠물푸레, 단풍나무와 대팻집나무, 사람주나무와 산딸나무, 산딸나무와 굴피나무, 팥배나무와 서어나무 등의 수종들 간에는 높은 정의상관이 인정되었고, 소나무와 서어나무, 쇠물푸레와 서어나무, 신갈나무와 팥배나무, 대팻집나무와 팥배나무간에는 약한 부의상관이 인정되었다. 조사지의 군락별 종다양성지수는 $0.665{\sim}1.169$범위로 나타났다.
The role of peroxiredoxin (Prx) I as an erythrocyte antioxidant defense in red blood cells (RBCs) is controversial. Here we investigated the function of Prx I by using Prx $I^{-/-}$ and Prx I/$II^{-/-}$ mice. Prx $I^{-/-}$ mice exhibited a normal blood profile. However, Prx I/$II^{-/-}$ mice showed more significantly increased Heinz body formation as compared with Prx $II^{-/-}$ mice. The clearance rate of Heinz body-containing RBCs in Prx $I^{-/-}$ mice decreased significantly through the treatment of aniline hydrochloride (AH) compared with wild-type mice. Prx I deficiency decreased the phagocytic capacity of macrophage in clearing Heinz body-containing RBCs. Our data demonstrate that Prx I deficiency did not cause hemolytic anemia, but showed that further increased hemolytic anemia symptoms in Prx $II^{-/-}$ mice by attenuating phagocytic capacity of macrophage in oxidative stress damaged RBCs, suggesting a novel role of Prx I in phagocytosis of macrophage.
Park, Jun-Seok;Kim, Kee-Tae;Kim, Hyun-Sook;Paik, Hyun-Dong;Park, Eun-Ju
Food Science and Biotechnology
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제15권6호
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pp.980-985
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2006
The goal of this study was to investigate the effects of a newly developed functional food containing Bacillus polyfermenticus (BP) and other physiologically active materials on the antioxidant system and the process of colon carcinogenesis in male F344 rats. Following a one-week adaptation period, the rats were divided into 3 groups and fed either a high-fat, low-fiber diet (control and DMH groups), or a high-fat, low-fiber diet supplemented with B. polyfermenticus ($3.1{\times}10^8\;CFU/day$) and other physiologically active materials (chitosan, chicory, ${\alpha}$-tocopherol, and flavonoids) (DMH+BP group). One week after the initiation of the diets, 2 groups of rats were subjected to six weeks of treatment with 1,2-dimethylhydrazine (DMH, 180 mg/kg BW, s.c.). The dietary treatments remained consistent throughout the entire experimental period. Nine weeks after the initial DMH injection, the rats supplemented with B. polyfermenticus had significantly lower numbers of aberrant crypt foci than those in the DMH group. Injections with DMH resulted in significantly higher leukocytic DNA damage and plasma lipid peroxidation levels, as well as in a lower plasma total antioxidant potential. These effects were reversed following supplementation with B. polyfermenticus and other physiological materials. Our results indicate that a functional food containing B. polyfermenticus exerts a protective effect on the antioxidant system and on the process of colon carcinogenesis, thereby suppressing the development of preneoplastic lesions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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