In vitro를 통한 혼합시료의 물 추출물과 에탄올 추출물을 시료로 사용하였고, 마우스 비장세포 증식능 및 활성 복강 대식세포에서 분비하는 사이토카인(IL-1 ${\beta}$, IL-6, TNF-${\alpha}$)의 분비능을 측정하였다. 그 결과 혼합시료의 물 추출물과 에탄올 추출물 모두 5${\sim}$250 ${\mu}$g/ml의 농도로 첨가했을 때 세포증식을 촉진하는 효과가 있는 것으로 나타났고, 물 추출물인 경우 고농도인 1,000 ${\mu}$g/ml에서, 에탄올 추출물인 경우는 500${\sim}$1,000 ${\mu}$g/ml 이상의 고농도 첨가시 세포증식이 억제되는 효과를 보였다. 복강 대식세포의 사이토카인 분비량을 측정한 결과, 혼합 물 추출물과 에탄올 추출물 모두에서 대조군보다 높은 분비량을 보였다. IL-1${\beta}$ 생성량 검색 결과, 물 추출물 투여군 10 ${\mu}$g/ml 농도 첨가에서 유의적(p<0.05)으로 높은 분비능을 보여주었고, 에탄올 추출물을 10 ${\mu}$g/ml와 100 ${\mu}$g/ml 첨가시에도 대조군보다 높은 분비량을 보였다. IL-6의 결과에서도, 물 추출물 10 ${\mu}$g/ml을 첨가했을 때 유의적(p<0.05)으로 높은 분비량을 보였고, TNF-${\alpha}$의 경우, 물 추출물의 10 ${\mu}$g/ml와 100 ${\mu}$g/ml의 농도에서 대조군에 비해 높은 TNF-${\alpha}$ 분비능을 보였다. 이상의 결과에 따르면, 혼합 물 추출물이 비장세포 증식능과 복강 대식세포에 의한 사이토카인 분비능을 상승시킴으로서 면역 기관의 주요 기능을 증진시키는 것으로 사료된다.
완도납석과 carbon black 의 혼합물을 135$0^{\circ}C$에서 질소분위기를 사용하여 탄소환원질화법으로 $\beta$-Sialon 분물에 $\beta$-SiC를 제2상으로 넣어서 $Y_2O_3$와 $ZrO_2$를 각 소결조제로 사용하여 175$0^{\circ}C$에서 2시간 동안 상압소결하였다. 10wt %의 $Y_2O_3$를 소결조제로 사용하였을 때에 파괴인성은 3.8MN/m^{3/2}$, 3점꺽임 강도는 470MN/$m^2$ 그리고 경도는 13.7MN/$m^2$로서 좋은 값을 나타내었다. 이와 같은 파괴인성과 꺽임강도의 증가는 균열편향과 균열나눠짐에 의한 것으로 생각된다.
${\beta}-carotene$을 동결건조 당근분말로부터 초임계이산화탄소와 보조용매로서 에탄올, 메탄올을 사용하여 $40{\sim}60^{\circ}C$와 $138{\sim}276\;bar$에서 추출하였다. 초임계이산화탄소에 대한 ${\alpha},{\beta}-carotene$의 용해도는 동일온도에서 압력이 높을수록, 동일압력에서 온도가 낮을수록 증가하였다. 최고용해도는 $40^{\circ}C/276\;bar$에서 ${\alpha}-carotene$은 $0.604\;{\mu}g/g,\;{\beta}-carotene$은 $4.9\;{\mu}g/g$이었다. 보조용매로서 $CO_2$에 17.4%의 에탄올을 첨가함으로써 ${\beta}-carotene$의 용해도를 82% 이상 증가시킬 수 있었다. 위 결과는 초임계이산화탄소를 이용하여 천연물로부터 식품이나 의약산업에 중요한 특정한 카로테노이드를 추출할 수 있는 가능성을 보여주고 있다. 이와 같이 얻은 천연색소는 추출물에 잔존하는 유기용매가 없기 때문에 직접 식품가공에 이용할 수 있다.
The present study investigated an ethanol extract (HS0608) of a mixture of three medicinal plants of Curcuma longae radix, Phellinus linteus, and Scutellariae radix for possible neuroprotective effects on neurotoxicity induced by amyloid $\beta$ protein ($A{\beta}$) (25-35) in cultured rat cortical neurons and antidementia activity in mice. Exposure of cultured cortical neurons to $10\;{\mu}M$$A{\beta}$ (25-35) for 36 h induced neuronal apoptotic death. At $1-50\;{\mu}g/m{\ell}$, HS0608 inhibited neuronal death, elevation of intracellular calcium concentration ($[Ca^{2+}]_i$), and generation of reactive oxygen species (ROS) induced by $A{\beta}$ (25-35) in primary cultures of rat cortical neurons. Memory loss induced by intracerebroventricular injection of ICR mice with 15 nmol $A{\beta}$ (25-35) was inhibited by chronic treatment with HS0608 (25, 50 and 100 mg/kg, p.o. for 7 days) as measured by a passive avoidance test. From these results, we suggest that the antidementia effect of HS0608 is due to its neuroprotective effect against $A{\beta}$ (25-35)-induced neurotoxicity and that HS0608 may have a therapeutic role in preventing the progression of Alzheimer's disease.
BAAG의 첨가배지상에서 미생물세포의 생육이 크게 억제된다는 실험결과를 토대로, 미생물에 대한 항균작용의 방식을 알아 보고자, Botrytis cinerea를 배양하여 분리한 여러 가지 효소 활성에 미치는 영향을 조사하였다. 특히 에너지 대사와 관련된 효소들에 대한 영향을 살펴보기 위하여 여러가지 대사경로에서 주요한 역할을 하는 효소인, hexokinase,glucose 6-phosphate dehydrogenase, malate dehydrogenase와succinate dehydrogenase에 대한 영향을 살펴 본 결과, BAAG가 외ucose-6-phosphate dehydrogenase 및 malate dehydrogenase의활성에는 별다른 효과를 나타내지 않았으나 succinate dehydrogenase 및 hexokinase 효소활성에서는 약간의 효소활성 억제작용을 관찰할 수 있었다. 또한, 세포막에 미치는 영향을 알아 보기 위하여 $\beta$-galactosidase의 인위적 기질인 ONPG의 분해 여부를 조사한 결과, BAAG는 세포막의 기능에 영향을 끼침을 관찰하였다. BAAG의 항균 성분을 분리확인 하기 위해서 silica gel column chromatography를 하여 ethyl ether분획물에서 3개, ethyl acetate분회물에서 4개의peak를 얻었으며, 각 용매분획물에서 1개씩의 분획에서 강한항균 활성을 검출하였다. 이 분획을 NMR 및 fast atomicbombardment측정기에 의해서 분석한 결과, 화학구조를limonin과 naringin으로 동정할 수 있었다. 이상의 연구결과로 미루어, 본 연구에서 그 기능과 작용을 구명한 천연항균소재 BAAG는 수확한 과채류의 직접 처리제재 및 항균 포장 소재로 과채류의 선도유지를 목적으로 활용하여 그 효과를 기대할 수 있어, 과채류의 생산기반 보호와 농가소득에큰 도움이 될 것으로 생각된다.
버섯의 품종개발(品種開發)과 유전연구(遺傳硏究)를 위해서 느타리 균(菌)의 일종(一種)인 P.cornucopiae 노랑 느타리의 원형질체(原形質體) 분리(分離)에 적합한 제조건(諸條件)을 조사하였다. 원형질체(原形質體) 분리(分離)의 최적(最適) 조건(條件)으로 Novozym 234농도(濃度)는 $5\;mg{\cdot}ml^{-1}$이었고 Novozym $234+{\beta}-D-glucanase\;+{\beta}-glucuronidase\;mixture$에서 원형질체수(原形質體數)는 $10.55{\times}10^6\;ml^{-1}$으로 가장 높았으며, 삼투압(渗透壓) 조절제(調節劑)와 농도(濃度)는 0.6 M sucrose에서 효과적(效果的)이었고 혼합효소액(混合酵素液)과의 반응(反應) 90분일때 원형질체(原形質體) 분리량(分離量)은 $2.2{\times}10^7\;ml^{-1}$으로 높았다. 완충용액(緩衝溶液)과 pH는 0.6 M sucrose+Na-maleate buffer (pH 5.0), 0.6 M sucrose+phosphate buffer(pH 6.2)에서 원형질체(原形質體) 분리량(分離量)이 좋았으며 대체로 phosphate buffer가 효과적인 것으로 나타났고 pH를 조절하지 않은 0.6M sucrose 삼투압 조절제(調節劑)가 원형질체(原形質體) 분리(分離)에 가장 알맞았다. 그리고 배양(培養) 일수(日數) 및 균사체량(菌絲體量)을 보면 cellophane MCM에서 4일 배양(培養)한 균사체(菌絲體) 6colonies와 혼합효소(混合酵素) 4 ml과 혼합하여 $28^{\circ}C$에서 90 분간 흔들었을 때 원형질체(原形質體)가 가장 많이 분리되었다.
Paeonia Suffruticosa and Prunus Persica have been used as oriental medicine for removal of fever, alleviation of pain, an anti-phlogistic effect and removal of extravasated blood. However, it has been never shown the effects of these herbal medicines on anti-inflammatory processes. This experiment was performed to show how these herbs could act as anti-inflammatory medicines at cellular level. Anti-inflammation effects of water extracts from Paeonia Suffruticosa and Prunus Persica as well as their mixture have been investigated, and the results were follows; 1) each extract slightly suppressed the expression and production of inflammatory mediators and enzymes such as NO, iNOS, IL-$1{\beta}$, and TNF-$\alpha$ in lipopolysaccharid(LPS)-stimulated RAW264.7 cells and mouse primary peritoneal macrophages in a dose-dependent manner. These suppressive effects, however, were synergistically increased by their mixture. 2) Each extract of Paeonia Suffruticosa and Prunus Persica insignificantly suppressed the activation and activity of NF-${\kappa}B$ in LPS-stimulated RAW264.7 cells, which controls the expression of inflammatory mediators such as NO, iNOS, IL-$1{\beta}$, and TNF-$\alpha$. However, extract mixture of Paeonia Suffruticosa and Prunus Persica suppressed effectively the activation and activity of NF-${\kappa}B$. 3) Each of Paeonia Suffruticosa and Prunus Persica induced translocation of NF-${\kappa}B$ to the nucleus from the cytosol and DNA-binding activity of nuclear NF-${\kappa}B$ in LPS-activated RAW264.7 cells. The extract mixture of Paeonia Suffruticosa and Prunus Persica showed more significant suppression of the NF-${\kappa}B$ translocation and its DNA-binding activity, as compared to those of the each extract. These results suggest that the extract mixture of Paeonia Suffruticosa and Prunus Persica may affect different control mechanisms for NF-${\kappa}B$ activation and the expression and production of NF-${\kappa}B$-dependent inflammatory mediators, indicating that this extract mixture may be useful for treatment of inflammatory diseases.
알코올 발효에 이용되는 타피오카와 겉보리 혼합원료의 효소당화액을 제조하여 알코올 발효 특성을 조사하였다. 타피오카와 겉보리 혼합원료를 내열성 액화효소인 Spezyme Fred를 0.04% 사용하여 액화하고 글루코아밀레이스(G), 단백질가수분해효소(P), 베타글루칸 가수분해효소(B)를 혼합한 당화효소제(GPB)를 사용하여 당화하였다. 타피오카와 겉보리 혼합원료(7:3, w/w)를 $50^{\circ}C$에서 150분간 당화하였을 때 당화액의 포도당 함량은 11.9%였고 점도는 26 cp로 나타났다. 베타글루칸 가수분해효소(B)의 첨가는 당화액의 포도당 수율의 증가와 점성의 저하에 도움을 주었다. 타피오카와 겉보리의 혼합비율을 7:3(w/w)으로 하였을 때 다른 비율의 당화액에 비하여 점도가 낮으며 포도당 함량이 높게 나타났다. 타피오카와 겉보리 혼합원료에 300%의 가수량으로 확립된 조건에서 당화하고 $30^{\circ}C$에서 72시간 알코올 발효를 수행한 결과 타피오카와 겉보리 혼합원료를 이용한 알코올 발효에 적합한 발효액의 알코올 및 포도당 함량은 각각 9.0과 0.02%였고, pH와 산도는 각각 pH 4.3과 0.3%이었다.
In order to investigate whether phospholipase C (PLC) activity in oat celIs is regulated by Gprotein, we have characterized PLC in plasma membranes of oat tissues. To identify the purified plasma membrane, $K^+$-stimulated, $Mg^{2+}$-dependent ATPase activity was measured. The activity of ATPase was shown to be proportional to the concentration of membrane protein. To examine the PLC activity regulated by G-protein, we used the inside-out and outside-out plasma membrane mixture isolated from the oat cells. The plasma membrane mixture showed higher PLC activity than the one of the outside-out plasma membrane. This suggests that PLC activity is located at the cytoplasmic surface of plasma membrane. PLC activity in plasma membrane mixture was dependent on $Ca^{2+}$ with maximum activity at 100 ${\mu}m$$Ca^{2+}$ and it was inhibited by 1 mM EGTA. Using Sep-pak $Accell^{TM}$ Plus QMA chromatography, we found that inositol 1,4,5-trisphosphate ($IP_3$) was produced in the presence of 10 ${\mu}m$$Ca^{2+}$. The PLC activity in the membrane was enhanced by an activator of G-protein ($GTP{\gamma}S$) and not by an inhibitor ($GDP{\beta}S$). This indicates that a G-protein is involved in the activation of PLC in the plasma membrane of oat cells.
To maintain activity in a coenzyme/enzyme mixture system, such as ${\beta}$-nicotinamide adenine dinucleotide (NADH)/dehydrogenase, the water-soluble 2-methacryloyloxyethyl phosphorylcholine (MPC) polymers as an additive were synthesized and investigated for their stabilizing function. The inhibitor for the NADH/dehydrogenase reaction was spontaneously formed when the NADH was stored in the dehydrogenase solution. Therefore, we hypothesized that if the additive polymer could interact with an inhibitor without any adverse effect on the dehydrogenase, the activity in the NADH/dehydrogenase mixture could be maintained. We selected lactose dehydrogenase (LDH) as the enzyme, and the NADH was dissolved and incubated at $37^{\circ}C$ in the LDH solution containing the polymers. The phospholipid polymers used in this study were poly(MPC) (PMPC), poly(MPC-co-3-trimethylammonium-2-hydroxypropyl methacrylate chloride) (PMQ) and poly[MPC-co-potassium 3-methacryloyloxypropyl sulfonate ($MSO_3$)] ($PMMSO_3$). The poly($MSO_3$) was used as a reference. For the PMQ and $PMSO_3$ aqueous solutions, the activity of the NADH/LDH mixture system decreased with incubation time as the same level or lower than that in the Tris buffered solution in the absence of the polymers. However, for the poly($MPC-co-MSO_3$) ($PMMSO_3$) aqueous solution, the activity of the NADH/LDH mixed system was six times higher than that in the buffered solution even after a 3-days incubation. The LDH activity was 1.5-1.8 times higher in the presence of the $PMMSO_3$ compared with that in the $PMSO_3$ solution. The mixture of two polymers, poly(MPC) and poly($MSO_3$), did not produce any stabilization. Thus, both the MPC and $MSO_3$ units in the polymer chain had important and cooperative effects for stabilizing the NADH/LDH mixture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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