• 자연과학논문집
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• 제5권2호
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• pp.13-17
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• 1992

자연계에서 분리, 동정한 호알칼리성, 고온성 Bacillus sp. TA-11의 $\beta$-galactosidase 생합성 조절 기작을 조사 하였다. 시험균주의 $\beta$-galactosidase 생합성은 isoprophyl-$\beta$-Dthiogalactopyranoside (IPTG) 보다 lactose에 의해 더욱 효과적으로 유도 되었고 glucose는 lactose의 세포내 유입을 방해하면서 $\beta$-galactosidase의 생합성을 억제 하였다. 또한 이러한 glucose의 효소합성 억제효과는 cAMP에 의해 완하되지 못했다.

• 자연과학논문집
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• 제4권
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• pp.59-68
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• 1991

p-Aminopheny1-$\beta$-D-thiogalactopyranoside agarose 친화성 크로마토그라피를 이용하여 Neisseria lactamica 2118이 생성하는 $\beta$-galactosidase를 정제한 후 몇가지 효소학적 성질을 조사 하였다. Neisseria lactamica 2118이 생성하는 $\beta$-galactosidase는 구성효소로서 lactose와 IPTG에 의하여 유도되지 않았다. 정제효소의 작용최적온도는 $35^{\circ}C$, pH는 7.5이었고 $50^{\circ}C$로 15~60분 처리시 약 80%의 활성이 유지되었으며 pH 6.0~9.0에서 안정 하였다. 또한 $Hg^(2+)$와 $Co^(2+)$에 의하여 그 활성이 저해 되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권6호
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• pp.587-592
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• 1989

토양으로부터 분리한 호알카리성 Bacillus sp. YS-309의 조효소액을 조제하고 제핵산, ammonium sulfate 침전, DEAE-cellulose column chromatography, Sephacryl S-200 gel-filtration, DEAE-Sephadex A-50 chromatography 등을 단계적으로 수행하여 6.9배 정제된 순도 98%의 정제효소를 얻었으며, 활성염색을 실시하여 정제한 효소단백질이 $\beta$-galactosidase임을 확인하였다. 정제효소의 분자량은 205,000으로 monomer의 분자량이 56,000인 동일크기의 tetramer로 구성되어 있다고 판단되었다.

• 미생물학회지
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• 제27권3호
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• pp.188-193
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• 1989

Gene for lactose catabolism in Lactobacillus casei SW-M1 was encoded by a 60Kb metabolic plasmid. A derivative of only 10kb, pPlac 15 of recombinant plasmid, was constructed by introducing into pBR322 and was cloned into E. coli using restriction endonuclease Pst I. A 10kb insery DNA in plasmid pBR322 was identified as a gene encoded phospho-$\beta$-galactosidase by the determination of enzyme activity. Phospho-$\beta$-galactosidase was apparently expressed in E. coli. The enzyme activities of cell-free extract from transformant E. coli HB101 carrying pPLac 15 DNA were not different from that of L. casei as a donor strain on the basis of enzyme properites. However, specific activity of phospho-$\beta$-galactosidase in the cloned strain with Lac $Y^{-}$ phenotype of E. coli HB101 was lower than that in L. casei strain.

• Food Science and Biotechnology
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• 제18권6호
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• pp.1342-1350
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• 2009

This paper investigates the production and optimization of $\beta$-galactosidase enzyme using synthetic medium by Kluyveromyces lactis NRRL Y-8279 in stirred tank bioreactor. Response surface methodology was used to investigate the effects of fermentation parameters on $\beta$-galactosidase enzyme production. Maximum specific enzyme activity of 4,622.7 U/g was obtained at the optimum levels of process variables (aeration rate 2.21 vvm, agitation speed 173.4 rpm, initial sugar concentration 33.8 g/L, incubation time 24.0 hr). The optimum temperature and pH of the $\beta$-galactosidase enzyme produced under optimized conditions were $37^{\circ}C$ and pH 7.0, respectively. The enzyme was stable over a pH range of 6.0-7.5 and a temperature range of $25-37^{\circ}C$. The $K_m$ and $V_{max}$ values for O-nitrophenol-$\beta$-D-galactopyranoside (ONPG) were 1.20 mM and $1,000\;{\mu}mol/min{\cdot}mg$ protein, respectively. The response surface methodology was found to be useful in optimizing and determining the interactions among process variables in $\beta$-galactosidase enzyme production. Hence, this study fulfills the lack of using mathematical and statistical techniques in optimizing the $\beta$-galactosidase enzyme production in stirred tank bioreactor.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제9권4호
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• pp.207-212
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• 1981

토양에서 분리된 여러가지 곰팡이류 가운데 $\beta$-galactosidase 분비력이 강하고 중성부근에서 효소안정성이 높은 Penicillium sp. 균주를 $\beta$-galactosidase 생산균주로 선정하였다. 이 균주는 밀기울고체배지에서 3$0^{\circ}C$ 72시간 배양에서 galactosidase 분비력이 가장 높았으며 질소원 첨가배지에서 질소원의 종류에 따라 14%~85%까지 증가되었다. 고체배지에서 얻은 효소추출액을 ammonium sulfate fractionation, SP-Sephadex C-50 chromatography, ultrogel AcA44 filtration, hrdroxrapatite chromatography등에 의하여 비활성도는 101 units/mg protein으로 5050배 정제되었다. 최종적으로 정제된 galactosidase는 analytical ultracentrifuge에서 단일단백으로 Schlieren pattern을 나타냈고 Disc electrophoresis에서는 단일 band로서 전기영동되었으며 영동된 $\beta$-galactosidase 활성 band와 일치하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제9권2호
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• pp.201-205
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• 1999

The effects of growth temperature and a carbon source on the expression of $\beta$-galactosidase gene of Lactococcus lactis ssp. lactis ATCC 7962 (L. lactis 7962) were investigated. At $25^{\circ}C$, L. lactis 7962 had a higher $\beta$-galactosidase activity than cells grown at $30^{\circ}C$ or $37^{\circ}C$, although cells grew most quickly at $37^{\circ}C$ The highest $\beta$-galactosidase activity was observed in cells grown in M17 with lactose (l %) followed by cells grown in a galactose (1 %) medium. L. lactis 7962 exhibited the minimum $\beta$-galactosidase activity in glucose media, indicating catabolite repression. When the cellular levels of $\beta$-galactosidase mRNA were examined using slot blot hybridization, no significant differences were observed between cells grown at $25^{\circ}C$ and cells at $30^{\circ}C$ or $37^{\circ}C$ in the same media. This suggests that the quantity of $\beta$-galactosidase mRNA may not be the reason for the higher $\beta$-galactosidase activities of L. lactis 7962 at $25^{\circ}C$ The level of ccpA (Catabolite Control Protein) transcript remained almost constant during the exponential growth phase irrespective of a carbon sourse.

• KSBB Journal
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• 제11권4호
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• pp.398-404
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• 1996

전세포 효소 고정화 캡슐을 제조하기 위하여 Eschericia coli를 calcium alginate 캡슐내부에 접종하고 배양하였다. E. coli의 캡슐내부 건조중량이 1OOg/L에 달하였다. 생산배지에서 배양하는 동안 캡슐내부에 축적되는 미생물의 양이 많을수록 캡슐 내부에 축적되는 $\beta$galactosidase의 활성도 높았다. 생산배지에 금속이온 $Zn^{+2}를 2{\times}10^{-4} M $ 첨가함으로써 캡슐내부에 축척되는 ${\beta}$-galactosidase의 활성 을 25% 증가시킬 수 있었다. 캡슐제조시 해바라기유를 부피비로 2% 첨가함으로써 캡슐내부에 축적되 는 ${\beta}$-galactosidase의 활성을 10% 증가시킬 수 었었다. 부피산소전달계수, $k_La가 2.55h^- $ 안 플라스크 대신 $k_La가 82h^- $인 concentric air lift reactor 내에서 고정화 E. coli를 배양호농로써 캡슐내부의 전세포${\beta}$-galactosidase의 활성을 86% 증가시킬 수 있었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제5권1호
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• pp.6-13
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• 1995

A gene coding for the $\beta$-galactosidase (lactase) of Kluyveromyces tragilis UCD 55-55 was isolated by complementation in Escherichia coli YMC9. From the plasmid library made from Sau3A-digested chromosomal DNA, one positive clone was selected. The cloned gene for $\beta$-galactosidase was on 7.3 kilobase pair DNA fragment, and a slightly low level of $\beta$-galactosidase enzyme activity was detecied in E. coli. It was also confirmed that the cloned gene comes from K. tragilis by DNA-DNA hybridization and immunochemical blotting experiments. In order to construct a new yeast strain having the metabolic ability for lactose, the cloned gene for K. tragilis $\beta$-galactosidase was inserted in yeast vector YEp24 and YRp17, and transformed into Saccharomyces cerevisiae YNN27 and Ml-2B. The yeast transformants showed the nearly the same $\beta$-galactosidase productivity as level of K. tragilis when uninduced, but these could not utilize lactose as a sole carbon source, presumably due to the lack of lactose transport system. Nevertheless, a slightly higher ethanol productivity was achieved by these transformants than S. cerevisiae or K. tragilis, in the medium containing glucose and lactose.

• 한국균학회지
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• 제11권3호
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• pp.109-114
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• 1983

Aspergillus phoenicis의 ${\beta}-galactosidase$ 활성을 ONPG와 lactose를 기질로서 사용하여 조사하였다. 이 효소 활성은 성장의 대수기 동안은 서서히 증가하였으나 정지기가 시작되면서 급격하게 감소하였다. 또한 이 효소는 높은 온도에서도 좋은 효소 활성을 유지하였으며, 산성 pH에서 최고의 효소활성을 나타내었다. ${\beta}-galactosidase$는 lactose보다 ONPG에 대한 기질의 친화력이 더 좋았으며, 효소 활성도 ONPG의 경우가 더 높았다. Lactose의 가수분해율은 반응액중의 lactose의 농도가 낮을 수록 높았으며, 사용균의 무게에 따라 초기에는 증가하다가 어느 수준 이상에서 부터는 점근값을 나타내었다. 효소의 활성은 효소의 고정 방법 및 조건에 영향을 받았으며, matrix의 가교가 pH 7.2 및 0.35 vol. %의 glutaraldehyde 농도에서 행하여졌을 때, 가장 높은 효소 활성을 보였다.