Cytochrome P4501B1(CYP1B1) is known to be inducible by xenobiotic compounds such as policyclic aromatic hydrocarbon(PAH) and dioxins such as 2,3,7,8-tetrachloro-dibenzo-p-dioxin(TCDD). And these induction of CYP1B1 is also regulated by many categories of chemicals. In order to investigate the effects of several chemicals on CYP1B1 gene expression in Hepa-I and MCF-7 cells, 5' flanking DNA of human CYP1B1 was cloned into pGL3 basic vector containing luciferase gene, and then transfected into these cells. After treatment of chemicals, the luciferase activity was measured. CYP1B1 enzyme metabolize PAHs and estradiol. CYP1B1 metabolize estradiol to 4-hydrozyestradiol that is considered as carcinogenic metabolite. Luciferase activity was induced about 20 folds over that control by 1 nM TCDD (2,3,7,8-tetrachloto-p-dioxin). Recent industrialized society, human has been widely been exposed to widespread environmental contaminants such as PAHs(polycyclic aromatic hydrocarbon) that are originated from the imcomplete combustion of hydrocarbons. PAHs are known to be ligands of the AhR(aryl hydrocarbon receptor). Induction of cytochrome P4501B1(CYP1B1) in cell culture is widely used as a biomarker for PAHs. Therefore we have studied the effect of PAHs in the human breast cancer cells MCF-7 to evaluate bioactivity of PAHs. We have used the United State of America EPA selected 13 different PAHs, PAHs mixtures and extracts from environmental samples to evaluate the bioassay system. We examined effects of PAHs on the CYP1B1-luciferase reporter gene and CYP1B1 mRNA level. Benzo(k)fluoranthene and dibenzo(a, h)anthracene showed strong response to CYP1B1 promoter activity stimulation, and also CYP1B1 mRNAs increase in MCF-7 cells in a concentration-dependent manner. Acenaphthene, anthracene, benzo(b)fluoranthene, fluorene, fluoranthene, anphthanlene, pyrene, phenanthrene and carbazole were weak responders in MCF-7 cells. RT-PCR analysis indicated that PAHs significantly up-regulate the level of CYP1B1 mRNA.
This study was performed to determine the effects of antimutagenicity of Porturaca oleracea L. in Korea. In Ames test, the ethanol extract of Poturaca oleracea L. inhibited mutagenic activity of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG), , 4-nitroquinoline-1-oxide(4NQO), benzo($\alpha$)pyrene (B($\alpha$)P) and 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido-(4,3-b)indole (Trp-P-1) in Salmonella typhimurium TA98 and TA100. But hot-water extract Poturaca oleracea L. only Inhibited mutagenic activity of MNNG in Salmonella typhimurium TA100, On 4NQO, the ethanol extract 100-1,600$\mu\textrm{g}$/plate of Porturaca oleracea L. showed a slight inhibitory effect of 13-48%, 4-47% in TA98 and TA100, respectively, but on MNNG, it showed higher inhibitory effect of 6-86% in TA100, And the treatment of 1,600$\mu\textrm{g}$/plate of ethanol extract of Porturacea L. had strong antimutagenicity with 74-87% inhibition against TA98 and TA100 induced by B(a)P and with 85-93% inhibition against TA98 and TA100 induced by Trp-P-1. The ethanol extract was fractionated with ether. chloroform, ethylacetate, butanol and water. Among them, most of the fraction except water fraction showed strong antimutagenicity effects against mutation induced by 4-NQO, MNNG, B(a)P and Trp-P-1. Chloroform fraction had strong antimutagenicity with 91% inhibition against TA100 induced by MNNG, diethyl etherfraction had strong antimutagenicity with 92%, 98% inhibition against TA98 and TA100 induced by 4NQO, Chloroform fraction had strong antimutagenicity with 97% inhibition against TA100 induced by B (a)P and diethyl etherfraction had strong antimutagenicity with 98% inhibition against both strain Induced by Trp-P-1, respectively.
한국에 널리 분포하고 있는 곰솔, 리기다, 잣나무, 적송의 에탄올추출물과 각 용매 분획물을 이용하여, in vitro assay로서 spore rec-assay와 Salmonella typhimurium reversion assay법으로 시료자체 변이원성 유무와 4가지 양성변이원 물질(MNNG, 4NQO, Trp-P-1 및 B(a)p)에 대한 돌연변이 억제효과를 고찰하였다. 곰솔, 리기다, 잣나무, 적송의 에탄올 추출물은 spore rec-assay와 S. typhimurium를 이용한 mutagenicity assay에서 변이원성을 나타내지 않았다. 돌연변이 억제 시험에서는 4가지 시료 모두 농도 증가에 따른 억제율을 나타내었고 또 각각의 시료들의 분획물 중 잣나무와 소나무의 에테르 분획물들이 간접변이원인 Trp-P-1의 변이원성에 대하여 다른 분획물에 비하여 높은 억제율을 보여주었다.
Park, Kun-Young;Suk-Hee;Cheigh, Hong-sik;Baik, Hyung-Suk
Preventive Nutrition and Food Science
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제1권2호
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pp.151-158
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1996
Antimutagenic effect of Doenjang (Korean soy paste) on various carcinogens in Salmonella typhimurium strains of TA98 and TA100 were studied. By the addition of methanol extract of Doenjang to aflatoxin B₁(AFB₁)in the experimental system, the mutagenicity of AFB₁ on the strains of TA98 and TA100 was com-pletely inhibited. The methenol extract of the Doenjang also inhibited the mutagencities induced by direct mutagens such as N-methy1-N'-nitro-N-nitroguanidine(MNNG)and 4-nitroquinoline-1-oxide(4-NQO), and another indirect mutagens of benzo(a) pyrene(BaP) and dimethylnitrosamine(DMN). From the solvents and thin layer chromatographic(TLC) fractionations, free fatty acid(s), especially linoleic acid in Doenjang seemed to be one of the active antimutagenic compounds.
Tea is one of the most frequently consumed drinks due to its favourite taste and the health benefit. Tea is produced by several processes and drying is very important step to develop the flavour and destroys the enzymes in tea. However, during drying tea, polycyclic aromatic hydrocarbons some of which are carcinogen and genotoxin are naturally produced. The risk of PAHs by drinking tea was characterized by determining contents of 4 PAHs in tea. 4 PAHs including Benz(a)anthracene (BaA), Chrysene (CHR), Benzo(b)fluoranthene (BbF) and Benzo(a)pyrene (BaP) were investigated by GC-MS in total 468 tea products, which were contaminated up to $4.63ng\;g^{-1}$. Mate tea was the most highly contaminated by BaA, CHR, BbF and BaP and followed by Solomon's seal and Chrysanthemum. The Margin of Exposures calculated by the concentration of BaA, CHR, BbF and BaP and consumption amount of tea were higher than 10,000, and the risk of PAHs in tea were low concern to public health.
생체에 투입되는 이물질(xenobiotics)들이 돌연변이를 일으키고 나아가서는 암을 유발시키게 되는 것은 이물질들이 생체내에서 어떤 양상으로 대사되느냐, 즉 이물질이 독성화되는 과정과 해독되는 과정에 있어서의 활성도의 차이에 따라 좌우되는 것으로 알려져 있다. 따라서 인삼이 이물질 대사 및 해독작용에 어떤영향을 미치는가를 밝혀보기 위하여 동물 실험을 통하여 발암물질로 알려진 Benzopyrene과 그 외 다른 유독한 화학약물들의 대사과정에 미치는 영향을 조사하여 보았다. 인삼투여군에 있어서 cyt. P-450와 관련된 Monooxy-genase system이 선택적으로 유도되었고 또 해독작용에 필수적인 Conjugation도 현저히 상승되었다. 이와 같은 이물질 해독작용의 선택적 유도는 인삼이 이물질 대사과정에 영향을 미쳐 독성물질 해독 항진효능이 있음을 제시해 주는 것으로 해석되어진다.
가공조건 차이에 따른 한방차의 성분변화를 분석한 결과, 팽화공정 처리한 것은 볶음공정을 한 것보다 조회분, 수분, 조단백질, 고형분 용출율이 증가하였으며 조지방은 소폭 감소하였다. 벤조피렌[$B({\alpha})P$]함량은 0.35 ppb에서 0.18 ppb로 크게 감소하였다. 전체적으로 심한 열처리 과정이 없는데도 불구하고 $B({\alpha})P$이 검출된 이유는 식품 중 $B({\alpha})P$는 주로 음식을 조리, 가공할 때 식품의 주성분인 탄수화물, 단백질, 지방 등이 열분해 되어 생성되기 때문이다. 한방차에서 맛, 향, 색상 모두 큰 차이를 보이지 않으나 다소 텁텁한 느낌이 강하고, 시큼한 맛이 강하여 선호도를 떨어뜨리는 것으로 나타났다.
염색체 이상유발물질인 benzo($\alpha$)yrene(B($\alpha$)P) 을 마우스에 50, 100, 그리고 150 mg/kg으로 투여한 경우의 소핵생성은 각각 6.6$\pm$0.6, 9.2$\pm$0.6 그리고 10.4$\pm$0.9로서 농도증가에 비례적으로 증가하였으며, 대조군에서는 1.4$\pm$0.4의 소핵생성을 나타내었다. B($\alpha$ )P을 150 mg/kg과 참취뿌리 에탄올 추출물을 각각 50. 100, 150 그리고 200 mg/kg으로 동시에 투여한 경우 각각 24.50, 22.55, 59.80 그리고 79.41%의 소핵생성 억제효과를 나타내었다. 참취뿌리 용매분획물 실험에서는 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물분획물이 시료농도인 10 mg/kg의 투여군에서 양성대조군에 비해 각각 3.9, 35.3, 40.2, 11.8 및 49.0%의 소핵생성 억제율을 나타내었다. 시료농도 80 mg/kg의 투여군에서는 양성대조군에 비해 각각 78.4. 65.7. 75.5, 68.6 그리고 77.5%의 소핵생성 억제율을 나타내었다. 참취뿌리 에탄올추출물의 용매분획물은 80 mg/kg의 투여농도에서 비교적 높게 소핵생성 억제율이 나타났다.
The mutagenicities and antimutagenicities of butanol (PL I) and water (PL II) extracts from the filtrate of the cultured broth of Phellinus linteus were examined using the Ames/Salmonella test. No mutagenic activity of PL I and PL II was found in Salmonella typhimurium strains TA98 and TA100, either with or without S9 activation. In contrast, PL I and PL II showed inhibitory effects on the mutagenic activities induced by the directly-acting mutagens, 4-nitro-o-phenylenediamine (NPD) using the tester strain TA98 and sodium azide (NaN3) using the tester strain TA 100 in the absence of S9 mix. PLI and PL II also showed inhibitory effects on the mutagenicities of the indirectly-acting mutagens, 2-aminofluorene (2-AF) using the tester strain TA98 and benzo[a]pyrene (B[a]P) using the tester strain TA 100 in the presence of S9. These results suggest that P. linteus has an antimutagenic activity and may play a role in the prevention of cancer.
본 연구는 옛부터 식용 및 약용으로 이용되고 있는 노루궁뎅이 버섯의 항돌연변이 및 암 예방 효과를 검색하기 위하여, 노루궁뎅이 버섯의 항돌연변이원성 및 quinone reductase (QR) 유도활성 효과를 살펴보았다. 노루궁뎅이 버섯의 돌연 변이 억제 효과를 Ames test로 검색한 결과, 노루궁뎅이 버섯의 메탄을 추출물과 분획물 그 자체의 돌연변이 원성은 없었으며, 노루궁뎅이 버섯의 메탄을 추출물은 직접변이원인 N- methyl- N'-nitro-guanidine(MNNG)와 간접변 이원인 B(a)P의 돌연변이 유발성을 크게 저해하였다. 또한 메탄올 추출물에서 분리한 분획물들도 유의성 있는 돌연변이 억제효과를 나타내었으며 특히 헥산, 클로르포름 및 에틸아세테이트 분획물의 경우는 부탄올과 물 분획 물보다 MNNG 와 13(a)P에 대해서 더 큰 항돌연변이 효과를 나타내었다. 그리고 노루궁뎅이 버섯에서 암 예방 효소계인 QR의 유도활성을 hepalclc7 세포주를 사용하여 검토한 결과에서는 노루 궁뎅이 버섯의 메탄을 추출묵과 헥산, 클로르포름 그리고 에틸아세테이트 분획물이 QR 효소활성을 유의적으로 증가시키는 것으로 나타났으며 나머시 분획물은 거의 효소활성에 영향을 미치지 않았다. 이상의 실험 결과로 노루궁뎅이 버섯은 발암물질로부터 생계를 보호하는 불질을 함유하고 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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