A virus causing chlorotic ringspot, yellow mosaic and vein clearing symptoms was prevalent on mungbean plants around Taean, Korea. The isolate caused mosaic on Chenopodium quinoa, Nicotiana benthamiana, Phaseolus vulgaris and Vida laba but no symptoms on peanut plants. Inclusion bodies such as scroll, pinwheel and laminated aggregates induced by the virus in the host cells were similar to those produced by members of the Potyvirus subdivision III. Multiple alignment as well as cluster dendrograms of the 709 nucleotide region comprising part of the coat protein gene and 3'untranslated region (UTR) showed that the isolate belongs to the BCMV-PSt subgroup. Altogether, these results support the identification of the causal virus as peanut stripe strain of Bean common mosaic virus (BCMV-PSt).
강낭콩에서 종자전염된 바이러스병을 동정하기 위하여 각지역 농가 및 시장에서 종자를 수집파종하여 종자전염을 조사한 결과 수원, 장수, 진주에서 채집한 종자가 $2.0\~3.5\%$ 이병되어 있었으며 종자전염된 바이러스를 지표식물에 접종한 결과 강낭콩에 상엽에 모자익, Chenopodium quinoa의 접종엽에 대형의 국부병반이 형성되었다. Dip법에 의하여 시료를 제작하여 입자를 관찰한 결과 약 750nm의 계상입자가 관찰되었다. 이병 강낭콩의 조직에서 Cylinder와 Pinwheel형 및 bundle형의 봉입체(Inclusion hody)가 관찰되었다. 복숭아진딧물에 의하여 충매전염 되었으며 즙액전염된 이병주로부터 채집한 종자의 전염율은 $18.2\%$였다. 물리적성질은 내희석성이 $1,000\~5,000$배 였으며 내보존성은 실온에서 $2\~3$일, 내열성은 $55\~60^{\circ}C$였다. 항혈청검정 결과 혼합침강반응에서 양성의 반응을 나타냈으며 SDS처리에 의한 한천내이중확산법에서 BCMV 항혈청과 band를 형성하였으며 AzMV와는 spur가 형성되지 않았으며 CAMV와는 spur를 형성하였다. 이상의 결과로 강낭콩에서 종자전염된 바이러스는 Bean common mosaic virus로 동정되었다.
한국산 땅콩에 감염되어 있는 바이러스를 동정하기 위하여 땅콩 재배지 에서 모자이크, 괴저를 동반한 얼룩무늬, 황화, 줄무늬, 엽맥녹대, 위축 등의 바이러스 감염 증상을 나타내는 땅콩잎 및 땅콩을 채집하였다. 이들 시료로부터 기주범위, 면역전자현미경(ISEM), 감염 세포내의 바이러스의 존재양식, direct immune staining assay(DISA), RT-PCR 등에 의하여 Bean common mosaic virus(BCMV-PSt)와 Peanut mottle virus(PeMoV)를 분리하였다. 이들 시료를 DN법에 의거하여 전자현미경으로 관찰한 바 길이가 약 780 nm의 사상형 입자와 세포질 봉입체를 관찰하였다. 초박절편의 시료 관찰에서도 길이 약 700 nm의 사상 입자가 엽육세포 등의 세포질과 액포에 산재 혹은 병행 배열로 존재해 있는 영상 및 세포질 봉입체가 반드시 확인되었다. 또한, 이들 시료를 BCMV-PSt와 PeMoV의 항혈청으로 ISEM을 실시한 결과, 두 항체에 모두 decoration 되었음을 확인하였다. 두 바이러스가 종자전염이 되는 지를 확인하기 위하여 땅콩을 직접 BCMV-PSt와 PeMoV의 항혈청으로 DISA를 실시하였다. 그 결과, BCMV-PSt 및 PeMoV 항혈청에 발색이 되었으며, 이들을 발아시켜 유식물체를 획득하였다. 이들 유식물체에서도 바이러스 감염 증상인 얼룩무늬 증상이 관찰되었고, 이들을 BCMV-PSt와 PeMoV의 항혈청으로 ISEM방법으로 검경한 결과, 두 항체에 모두 decoration 되었다. 또한, 자연감염 식물체 및 DISA에 의해 바이러스 감염이 확인된 종자를 발아시킨 2년생 식물체로부터 생물검정 법 및 ISEM에 의해 두 종의 바이러스가 검출되었다. Rl-PCR을 실시한 결과, 약 1.2Kb크기의 BCMV-PSt coat protein유전자가 증폭 되었다. 이 연구결과, 한국산 땅콩에 BCMV-PSt가 가장 많이 감염되어 있음을 확인하였다.
A virus causing vein banding, sometimes yellow mosaic and rugose symptoms on peanut was prevalent around Suwon, Korea. A survey conducted in the area found disease incidence, depending on cultivar, to range from 79 to $100\%$. The virus was found to be seed-transmissible in all the five peanut cultivars tested with transmission rates ranging from 2 to $16\%$. Host range analysis failed to differentiate 9 field isolates collected from different peanuts cultivars showing various symptoms. Inclusion bodies such as scroll, pinwheel and long laminated aggregates induced by the virus in host plant cells were similar to those induced by members of the Potyvirus subdivision III. The virus showed < $95\%$ homology with Bean common mosaic virus (BCMV), BCMV-BICMV/AzMV strains and only < $91\%$ with Desmodium mosaic virus. Based on biological characterization, electron microscopy and molecular analyses of a Korean isolate (Daewon 1), the virus was identified as peanut stripe strain of BCMV.
Park, H.S.;T.S.Jin;Park, J.W.;Lee, S.H.;J.U.Cheon;Park, J.K.;Y.Takanami
한국식물병리학회:학술대회논문집
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한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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pp.141.1-141
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2003
Forty six isolates of bean common mosaic virus (BCMV) collected from azuki bean, mungbean, kidney bean, cowpea, broad bean and peanut were classified into three groups based on biological, serological, cytopathological, and molecular characteristics. Group I induced vein-banding symptoms in cowpea which was similar to those produced by the BCMV-cowpea strain. Group II caused mosaic symptoms in azuki bean but not in peanut and tobacco. Since this character was different from that of previously described BCMV strain, group II may not belong to BCMV GroupIII induced vein-clearing symptoms in azuki bean, kidney bean and peanut, which are typical symptoms for BCMV-peanut stripe virus strain. Virus inclusion patterns of BCMV groups were similar to those of Potyvirus subdivision III with the scroll, pinwheel and long laminated inclusions. However, the inclusions of laminated aggregates were never observed in mungbean isolates. Multiple alignment as well as cluster dendrograms of 3'noncoding region (3'-NCR) and a part of coat protein gene (CP) suggested that group I belongs to the BCMV-cowpea strain, group II to the BCMV-azuki bean strain, and group III to the BCMV-peanut stripe virus strain. Since molecular phylogenesis of BCMV based on nucleotides of 3'-NCR and coat protein differed from the grouping based on virulence differentiation, and BCMV groups are more closely related to each other with the same host origin, other characteristics of those strains are under investigation.
Valouzi, Hajar;Hashemi, Seyedeh-Shahrzad;Wylie, Stephen J.;Ahadiyat, Ali;Golnaraghi, Alireza
The Plant Pathology Journal
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제36권1호
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pp.87-97
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2020
The development of reverse transcription-polymerase chain reaction using degenerate primers against conserved regions of most potyviral genomes enabled sampling of the potyvirome. However, these assays usually involve sampling potential host plants, but identifying infected plants when they are asymptomatic is challenging, and many plants, especially wild ones, contain inhibitors to DNA amplification. We used an alternative approach which utilized aphid vectors and indicator plants to identify potyviruses capable of infecting common bean (Phaseolus vulgaris). Aphids were collected from a range of asymptomatic leguminous weeds and trees in Iran, and transferred to bean seedlings under controlled conditions. Bean plants were tested serologically for potyvirus infections four-weeks postinoculation. The serological assay and symptomatology together indicated the presence of one potyvirus, and symptomology alone implied the presence of an unidentified virus. The partial genome of the potyvirus, encompassing the complete coat protein gene, was amplified using generic potyvirus primers. Sequence analysis of the amplicon confirmed the presence of an isolate of Wisteria vein mosaic virus (WVMV), a virus species not previously identified from Western Asia. Phylogenetic analyses of available WVMV sequences categorized them into five groups: East Asian-1 to 3, North American and World. The Iranian isolate clustered with those in the World group. Multiple sequence alignment indicated the presence of some genogroup-specific amino acid substitutions among the isolates studied. Chinese isolates were sister groups of other isolates and showed higher nucleotide distances as compared with the others, suggesting a possible Eastern-Asian origin of WVMV, the main region where Wisteria might have originated.
Zhong-Tian Xu;Hai-Tao Weng;Jian-Ping Chen;Chuan-Xi Zhang;Jun-Min Li;Yi-Yuan Li
The Plant Pathology Journal
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제40권1호
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pp.73-82
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2024
Gardenia (Gardenia jasminoides) is a popular and economically vital plant known for its ornamental and medicinal properties. Despite its widespread cultivation, there has been no documentation of plant viruses on gardenia yet. In the present study, gardenia leaves exhibiting symptoms of plant viral diseases were sampled and sequenced by both metatranscriptome and small RNA sequencing. As a consequence, bean common mosaic virus (BCMV) was identified in gardenia for the first time and named BCMV-gardenia. The full genome sequence of BCMV-gardenia is 10,054 nucleotides (nt) in length (excluding the poly (A) at the 3' termini), encoding a large polyprotein of 3,222 amino acids. Sequence analysis showed that the N-termini of the polyprotein encoded by BCMV-gardenia is less conserved when compared to other BCMV isolates, whereas the C-termini is the most conserved. Maximum likelihood phylogenetic analysis showed that BCMVgardenia was clustered closely with other BCMV isolates identified outside the leguminous plants. Our results indicated that the majority of BCMV-gardenia virus-derived small interfering RNAs (vsiRNAs) were 21 nt and 22 nt, with 21 nt being more abundant. The first nucleotide at the 5' termini of vsiRNAs derived from BCMV-gardenia preferred U and A. The ratio of vsiRNAs derived from sense (51.1%) and antisense (48.9%) strands is approaching, and the distribution of vsiRNAs along the viral genome is generally even, with some hot spots forming in local regions. Our findings could provide new insights into the diversity, evolution, and host expansion of BCMV and contribute to the prevention and treatment of this virus.
Jo, Yeonhwa;Choi, Hoseong;Kim, Sang-Min;Lee, Bong Choon;Cho, Won Kyong
Journal of Applied Biological Chemistry
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제63권3호
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pp.189-195
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2020
The soybean (Glycine max L.), also known as the soya bean, is an economically important legume species. Pathogens are always major threats for soybean cultivation. Several pathogens negatively affect soybean production. The soybean is also known as a susceptible host to many viruses. Recently, we carried out systematic analyses to identify viruses infecting soybeans using soybean transcriptome data. Our screening results showed that only few soybean transcriptomes contained virus-associated sequences. In this study, we further carried out bioinformatics analyses using a soybean flower bud transcriptome for virus identification, genome assembly, and single nucleotide variations (SNVs). We assembled the genome of Soybean yellow common mosaic virus (SYCMV) isolate China and revealed two SNVs. Phylogenetic analyses using three viral proteins suggested that SYCMV isolate China is closely related to SYCMV isolates from South Korea. Furthermore, we found that replication and mutation of SYCMV is relatively low, which might be associated with flower bud tissue. The most interesting finding was that SYCMV was not detected in the cytoplasmic male sterility (CMS) line derived from the non-CMS line that was severely infected by SYCMV. In summary, in silico analyses identified SYCMV from the soybean flower bud transcriptome, and a nearly complete genome of SYCMV was successfully assembled. Our results suggest that the low level of virus replication and mutation for SYCMV might be associated with plant tissues. Moreover, we provide the first evidence that male sterility might be used to eliminate viruses in crop plants.
Alfalfa mosaic alfamoviruses(AIMV) were isolated from infected potato (Solanum tuberosum) and azuki bean (Paseolus angularis) in Korea. Two AIMV isolated from potatoes were named as strain KR (AIMV-KR1 and KR2) and AIMV isolated from azuki bean was named as strain Az (AIMV-Az). Each isolated AIMV strain was characterized by using their host ranges, symptom developments, serological relations and nucleotide sequence analysis of coat protein (CP) gene. Strains KR1, KR2, and Az were readily transmitted to 20 of 22 inoculated plant species including bean, cowpea, tomato, tobacco, and potato. AIMV-KR1 and KR2 produced the typical symptoms like chlorotic or necrotic spots in Chenopodium quinoa and Solanum tuberosum cv. Superior. AIMV-Az caused bright yellow mosaic symptom and leaf malformation in Nicotiana glauca, which were different from the common mosaic symptom caused by AIMV-KR1 and KR2. Electron microscope observation of purified virus showed bacilliform virions containing a single-stranded plus-strand RNAs of 3.6, 2.6, 2.0 and 0.9 kbp in length, respectively, similar in size and appearance to those of Alfamovirus. In SDS-PAGE, the coat protein of the two viruses formed a consistent band that estimated to be about 24kDa. The CP genes of the AIMV strains, KR1, KR2, and Az have been amplified by RT-PCR using the specific primers designed to amplify CP gene from viral RNA-3, cloned and sequenced. Computer aided analysis of the amplified cDNA fragment sequence revealed the presence of a single open reading frame capable of encoding 221 amino acids. The nucleotide and peptide sequence of viral CP gene showed that strain KR1, KR2, and Az shared highest nucleotide sequence identities with AIMV strain 425-M at 97.7%, 98.2%, and 97.2%, respectively. CP gene sequences of two strains were almost identical compared with each other. Altogether, physical, serological, biological and molecular properties of the purified virus.
Weeds are widely grown in the field and are infected by many viruses. A survey was conducted to identify viruses infecting weeds in Korea. Virus-infected weed samples including Rorippa indica (L.) Hiern, R. islandica (Oed.) Bord, Crepidiastrum denticulatum (Houtt.) Pak & Kawanno, Achyranthes japonica (Miq.) Nakai, and Chrysanthemum boreale (Makino) Makino were collected in Kyonggi Province. These weeds were grown in the greenhouse and were isolated on 10 test plants. Several virus isolates were isolated fron infected tissues and were further studied by host range assay, serological test, electron microscopy (EM), reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and sequencing. Each isolated virus strain was mechanically transmitted to weeds and various hosts including Nicotiana spp., Brassica spp., Vigna unguiculata, Capsicum annuum, and Cucumis sativus and showed systemic mosaic, vein clearing, necrosis, mottle, malformation, chlorosis, and/or death of host plants in some cases. Each virus was then purified using infected leaves and observed by EM. From these results three viruses were isolated and identified as Turnip mosaic virus (TuMV), Broad bean wilt virus (BBWV), and Cucumber mosaic virus (CMV). RT-PCR using virus-specific oligonucleotide primers and the cloning were conducted to determine the nucleotide sequences of coat proteins of the three viruses their amino acid sequence were deduced. The amino acid sequence homologies were about 92.7 to 99.7%, 96.2 to 97.7%, and 93.9 to 98.6% to other reported TuMV, BBWV, and CMV strains, respectively. These results suggest that many weeds may serve as primary inoculum source of diseases caused by TuMV, BBWV, CMV and that the management of these viral diseases can be achieved through weed control.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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