Hye Sook Jeon;Min Seock Do;Jung A Kim;Yoonjee Hong;Chae Eun Lim;Jae-Hwa Suh;Junghwa An
Journal of Species Research
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제13권2호
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pp.127-130
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2024
The first complete mitogenome sequence of the Red-tongue Pit Viper (Gloydius ussuriensis) from Korea was characterized using next-generation sequencing. The mitogenome is a circular molecule (17,209 bp) with a typical vertebrate mitogenome arrangement, which consists of 2 ribosomal RNA genes (rRNA), 22 transfer RNA genes (tRNA), two non-coding regions (D-loop), and 13 protein-coding genes (PCGs). The base composition of the mitogenome is 32.7% of A, 27.5% of C, 13.9% of G, and 25.9% of T, with a slight AT bias(58.6%). This phylogenetic analysis infers that G. ussuriensis is in the same group as the Chinese G. ussuriensis (Accession No. KP262412) and is closely related to G. blomhoffi and other species of the genus Gloydius. In our study, the complete mitogenome sequence of Korean G. ussuriensis was characterized and we provided basic genetic information on this species.
4'-Bromoacetophenone analogs, which are able to generate monophenyl radicals capable of hydrogen atom abstraction, were investigated as possible photoinducible DNA cleaving agents. The potential of 4'-Bromoacetophenone as a possible new DNA cleaver is explored. Pyrrolecarboxatmid conjugated 4'-Bromoacetophenone, in particular, DNA cleaving activity and sequence-selectivity on the contiguous AT base pair sites.
Dynamic vibration absorbers are widely used in machinery, buildings, and structures, including bridges. Two cases of their usage are considered in this paper. One is a simply supported beam subjected to either a moving force or a sequence of moving forces, which simulates a train-bridge interaction problem. The other is a case where a primary system is mounted on a base that is not grounded and is excited by an external force. The conditions that the dynamic vibration absorbers must meet in these cases are found and compared to those for usual cases where bases of primary systems are grounded.
Nitropyrene, the predominant nitropolycyclic hydrocarbon found in diesel exhaust, is a mutagenic and tumorigenic environmental pollutant that requires metabolic activation via nitroreduction and ring oxidation. In order to determine the role of ring oxidation in the mutagenicity of 1-nitropyrene, its oxidative metabolites, 1-nitropyrene 4,5-oxide and 1-nitropyrene 9,10-oxide, were synthesized and their mutation spectra were determined in the coding region of hprt gene of CHO cells by a PCR amplification of reverse-transcribed hprt mRNA, followed by a DNA sequence analysis. A comparison of the two metabolites for mutation frequencies showed that 1-nitropyrene 9,10-oxide was 2-times higher than 1-nitropyrene 4,5-oxide. The mutation spectrum for 1-nitropyrene 4,5-oxide was base substitutions (33/49), one base deletions (11/49) and exon deletions (5/49). In the case of 1-nitropyrene 9,10-oxide, base substitutions (27/50), one base deletions (15/50), and exon deletions (8/50) were observed. Base substitutions were distributed randomly throughout the hprt gene. The majority of the base substitutions in mutant from 1-nitropyrene 4,5-oxide treated cells were $A{\rightarrow}G$ transition (15/33) and $G{\rightarrow}A$ transition (8/33). The predominant base substitution, $A{\rightarrow}G$ transition (11/27) and $G{\rightarrow}A$ transition (8/27), were also observed in mutant from 1-nitropyrene 9,10-oxide treated cells. The mutation at the site of adenine and guanine was consistent with the previous results, where the sites of DNA adduct formed by these compounds were predominant at the sites of purines. A comparison of the mutational patterns between 1-nitropyrene 4,5-oxide and 1-nitropyrene 9,10-oxide showed that there were no significant differences in the overall mutational spectrum. These results indicate that each oxidative metabolite exhibits an equal contribution to the mutagenicity of 1-nitropyrene, and ring oxidation of 1-nitropyrene is an important metabolic pathway to the formation of significant lethal DNA lesions.
The aceB gene, encoding for malate synthase, one of the key enzymes of glyoxylate bypass, was isolated from a pMT1-based Corynebacterium glutamicum gene library via complementation of an Escherichia coli aceB mutant on an acetate minimal medium. The aceB gene was closely linked to aceA, separated by 598 base pairs, and transcribed in divergent direction. The aceB expressed a protein product of Mr 83, 000 in Corynebacterium glutamicum which was unusually large compared with those of other malate synthases. A DNA-sequence analysis of the cloned DNA identified an open-reading frame of 2, 217 base pairs which encodes a protein with the molecular weight of 82, 311 comprising 739 aminoo acids. The putative protein product showed only limited amino acid-sequence homology to its counteliparts in other organisms. The N-terminal region of the protein, which shows no apparent homology with the known sequences of other malate synthases, appeared to be responsible for the protein s unusually large size. A potential calciumbinding domain of EF-hand structure found among eukaryotes was detected in the N-terminal region of the deduced protein.
The binding interaction of ethidium to a series of synthetic deoxyoligonucleotides containing a B-Z junction between left-handed Z-DNA and right-handed B-DNA, was studied. The series of deoxyoligonucleotides was designed so as to vary a dinucleotide step immediately adjacent to a B-Z junction region. Ethidium binds to the right-handed DNA forms and hybrid B-Z forms which contain a B-Z junction, in a highly cooperative manner. In a series of deoxyoligonucleotides, the binding affinity of ethidium with DNA forms which were initially hybrid B-Z forms shows over an order of magnitude higher than that with any other DNA forms, which were entirely in B-form DNA The cooperativity of binding isotherms were described by an allosteric binding model and by a neighbor exclusion model. The binding data were statistically compared for two models. The conformation of allosterically converted DNA forms under binding with ethidium is found to be different from that of the initial B-form DNA as examined by CD spectra. The ratio of the binding constant was interestingly correlated to the free energy of base unstacking and the conformational conversion of the dinucleotide. The more the base stacking of the dinucleotide is unstable, or the harder the conversion of B to A conformation, the higher the ratio of the binding constant of ethidium with the allosterically converted DNA forms and with the initial B-Z hybrid forms. DNA sequence around a B-Z junction region affects the binding affinity of ethidium. The results in this study demonstrate that ethidium could preferentially interact with unusual DNA structures.
Bizelesin is a promising novel anticancer agent which is known to alkylate N3 of adenine to induce DNA interstrand cross-links (ISC) with in $5^I-TAATTA\; and\; 5^I-TAAAAAA$. We have investigated the base specificity for DNA ISC induced by bizelesin using oligomers containing the cross-linkable sequence $5^I-TAATTA\; and\; 5^I-TAAAAAA$. in which "N" was either A, C, G, or T. An analysis of denaturing polyacrylamide gel showed that bizelesin is able to induce DNA ISC in the duplex oligomer containing sequences $5^I-TAATTA\; and\; 5^I-TAAAAAA$. The formation of interstrand crosslinking did not occur in the sequences $5^I-TAATTA\; and\; 5^I-TAAAAAA$. DNA strand cleavage assay to determine the cross-linking site within $5^I-TAATTA$sequence showed that bizelesin alkylates guanine. These results demonstrate that bizelesin is able to induce DNA ISC at guanine but not at cytosine or thymine. In addition, guanine adducts have been found to be susceptible to DNA strand cleavage by exposure to hot piperidine. The extent of DNA strand cleavage, however, was not 100% efficient in either neutral pH buffer or hot piperidine.
The deposition behavior and structural and magnetic properties of electroless Co-B and Co-Fe-B deposits, as well as the amorphous ribbon substrates, were investigated. These Co-based alloy deposits exhibited characteristic polycrystalline structures and surface morphology and magnetic properties that were dependent on the type of amorphous substrates. The catalytic activity sequence of the amorphous ribbon electrodes for anodic oxidation of DMAB was estimated from the current density-potential curve in the anodic partial electrolytic bath that did not contain the metal ions. Both the deposition rate and potential in the initial region were obtained in order of the catalytic activity, depending on the alloy compositions of the substrates. The deposition rate linearly varied against the deposition time. The initial deposition potential may have also determined the structural and magnetic properties of the deposit based on the thickness of ${\mu}m$ order. Furthermore, a basic study of the electroless deposition processes on an amorphous ribbon substrate has been carried out in connection with the structural and magnetic properties of the deposits.
Xylanase를 생산하는 내열성 Bacillus pumilus TX703의 chromosomal DNA로부터 xylanase 유전자를 cloning하여 그 염기배열 순서를 결정한 다음 이로부터 유전자 발현에 관련된 구조를 분석하였다. Xylanase 유전자의 cloning을 위해 제한효소 HindIII로 절단한 B. pumilus TX703의 chromosomal DNA와 pUC19을 ligation시켜 E. coli DH5 $\alpha$에 형질전환시킨 후 형질전환체 중에서 xylanase 활성을 나타내는 재조합 plasmid pXES106을 분리하였다. 재조합 plasmid pXES106은 pUC19의 HindIII 부위 내에 2.24 kb의 외래 DNA가 삽입되었고, 이 plasmid DNA를 분리하여 E. coli DH5 $\alpha$에 재형질전환시킨 결과 vector 내에 xylanase 유전자가 cloning되었음을 확인하였다. Cloning된 유전자의 염기배열을 분석한 결과 이 유전자의 총 크기는 2,187 bp였고 이는 409개기 아미노산을 coding 하는 open reading frame 1,227 bp를 포함하고 있었다. 이 염기배열은 ATG개시 codon으로부터 각각 193과 216 base 상류에 TTTAAT의 -10 box와 TCGAAA인 -35 box로 추정되는 염기배열이 존재하였고 -10 box로부터 7 bp하류에 전사개시점인 A가 위치하고 있었다. 또한, 개시 codon으로부터 432 bp 상류에 공통염기배열과 14개의 염기 중 11개의 염기가 일치하는 TGATGGCGTCGGCA의 catabolite responsive element (CRE)가 존재하였다. B. pumilus TX703의 xylanase와 아미노산배열의 유사성이 가장 높은 xylanase는 Hordeum vulgare의 isozyme X-I이었고 본 xylanase는 208번째와 322번째에 glutamic acid 잔기를 가지고 있어 Clostridium thermocellum, Dictyoglomus thermophilum, Thermotoga neapolitana 등에서 밝혀진 바와 같이 glutamic acid 부위가 xylanase의 활성부위라 여겨진다.
최근 한우의 유전체 연구의 핵심 소재인 박테리아인공염색체(BAC; Bacterial Artificial Chromosome) 클론이 제작되었고 이에 대한 염기서열의 해독과 이를 NCBI (National Center for Biotechnology Information)의 소 유전체 데이터(B_tau 2.1)와 비교 분석하여 한우의 유전체지도 초안(제2 세대 한우유전체지도)이 제작되었다. 본 연구에서는 기존에 확보한 한우의 박테리아인공염색체 클론의 염기서열을 최근에 공개된 소유전체 데이터(B-tau 3.1)와 비교 분석하여 한우 유전체 지도를 최신화하기 위해 실시하였다. 제2 세대 한우유전체지도에서 총 5,105개의 클론에 대한 염색체상 위치가 결정된 반면에 제3세대 한우유전체지도에서는 총 9,595개의 클론에 대한 염색체 위치가 결정되어 약 2배 정도로 향상되었다. 또한 겹치는 부분을 제외했을 때 제3세대 한우유전체지도에 사용된 클론은 소 전체 염색체의 약 37.27%에 해당되는 부분을 커버하는 것으로 나타났다. 앞으로 추가적인 한우 클론의 염기서열 해독을 통해 얻어진 데이터를 확보한다면 한우염색체 정밀 지도의 완성과 이를 이용한 한우 개량에 유용한 유전자 발굴에 활용될 수 있을 것으로 판단되다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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