• 미생물학회지
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• 제41권3호
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• pp.168-176
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• 2005

갯벌 퇴적물에 존재하는 병원성 해양미생물인 Vibrio vulnificus를 신속하고 정확하게 검출하기 위해 PCR, Southern hybridization 방법과 real-time PCR을 수행하여 검출 민감도를 비교하였다. 갯벌 퇴적물로부터 bead beater를 이용한 물리적 방법으로 DNA 조추출액을 얻고 상용화된 키트 (Geneclean turbo Kit)를 이용하여 부식물질(humic substances)을 제거하였다. 병원성에 관련된 3 종의 유전자(hemolysin, vvhA; phosphomannomutase, pmm; metalloprotease, vvpE)를 대상으로 설계한 프라이머 셋을 동시에 사용하는 multiplex PCR 방법과 Southern hybridization과 병행한 방법(PCR/Southern hybridization)을 수행하였다. Real-time PCR은 hemolysin 유전자(vvhA)에 특이한 프라이머와 TaqMan 탐침을 사용하였다. 전처리하지 않은 갯벌 퇴적물의 경우, PCR/Sourthern hybridization과 real-time PCR 방법의 검출 민감도는 퇴적물 1 g 당 약 $10^2$ 개의 세포 수준이었다. 농후처리액(APW; alkaline peptone water)으로 $35^{\circ}C$에서 $2{\~}3$시간, 8시간 중균 배양할 경우 갯벌 퇴적물 1 g 당 $2{\~}10$개 세포가 존재할 때 PCR/Southern hybridization 방법과 real-time PCR 방법으로 각각 검출할 수 있었다. 전처리 과정을 포함하여 real-time PCR은 $6{\~}7$시간, PCR/Sourthern hybridization은 약 36시간이 소요되었다.

• 대한수의학회지
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• 제40권1호
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• pp.173-186
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• 2000

This experiment was carried out to investigate the tendency of incident diseases in pre- and post- weaning piglets which ages were 1 to 7 weeks old by laboratory diagnosis and in order to minimize death in preweaning piglets and of stunted growth in postweaning piglets. The result of this experiment used as the basic data for the preventive programs in pre- and post- weaning piglets and were as follows: 23 different diseases diagnosed in 331 cases were studied in relation to age, season, and etiology. The most prevelent diseases of pre- and post- weaning piglet were Colibacillosis(79 case, 23.9%) and the major diseases were Salmonellosis(44 cases, 13.3%), Anemia(37 cases, 11.2%). Unknown viral disease(20 case, 6.1%), Rota viral infection(19 case, 5.8%), Porcine reproductive & respiratory syndrome(PRRS; 15 case 4.5%), Transmissible gastroenteritis(TGE; 12 case, 3.6%). The gastrointestinal disease, such as Colibacillosis, Salmonellosis, Swine dysentery, Clostridial infection, Rotaviral infection, TGE, Porcine epidemic diarrhea(PED) and Ballantidiosis occured pro- dominently in the period of pre- and post- weaning, which were 178 cases(53.8%) and not related to occurrence according to age and season. The respiratory diseases were Atrophic rhinitis(AR), Swine enzootic pneumonia, Pneumonic pasteurellosis, Pleuropneumonia, Branchopneumonia, PRRS and which were 48 cases(14.5%) and higher prevalent in spring and summer. The viral diseases was 73 cases(22.1%) that occurred in the period of 5 weeks piglet and prevalent mainly in spring. The bacterial diseases were 188 cases(56.8%) that were not related to occurrence according to age and season. Salmonellosis was prevalent in 3 to 5 weeks piglet and mainly occurred in summer. Viral septicemia and rotaviral infection occurred after 5 weeks piglets intensively and 3 to 5 weeks, respectively. And the both occurred without relation with season. PRRS occurred after 4 weeks piglet and prevalent in summer. TGE occurred 1 to 7 days old piglets and prevalent in spring and winter. Hematologic values of anemia was decrease in number of Red Blood Cell, concentration of Hemoglobin and Hematocrit. Amikacin, cephalothin, colistin, norfloxacin were effective to E coli, and amikacin, cephalothin, nortloxacin, neomycin were effective to Salmonellra spp. but clindamycin, erythromycin, penicillin, sulfonamides were resistant to E coli and Salmonella spp.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제40권2호
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• pp.104-111
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• 1993

연구배경 : 그람 음성균의 내독소는 ARDS를 유발하는 제일 흔한 원인으로 알려져 있으며 그 기전중에 내독소에 의해서 폐로의 유입이 증가되고 활성화된 호중구에서 분비하는 산소기가 증가하여 모세혈관 내피세포등에 손상을 입히기 때문이라는 설이 유력하다. 그러한 증가된 산소기를 처리하는 항산화효소가 내독소를 대량 투여하거나 소량 반복투여시 어떻게 변화하는지 알아보고자 본 실험을 하였다. 방법 : 250~300g 되는 쥐에 내독소 대량투여군은 7mg/kg body weight로 내독소를 1회 복강내 주사하였고 소량 반복투여군은 1 mg/kg body weight로 10일간 매일 복강내 주사하였다. 대량투여군은 주사후 6, 12, 24시간후에, 소량 반복투여군은 주사후 3, 7, 10일에 각각 기관지 폐포세척술을 시행하고 살해하였다. 폐동맥을 통하여 생리 식염수를 주입하여 적혈구를 제거한후 양측 폐를 들어내고 무게를 잰후 무게의 5배되는 용량의 50 mM potassium phosphate 완충액하에 3분 간 homogenize시켰다. 이들 $4^{\circ}C$ 에서 60분간 100,000g의 속도로 원심분리하여 상충액을 $-70^{\circ}C$에 보관하였다가 Cu, Zn SOD, Mn SOD, catalase, GSH-Px와 albumin 농도를 측정하였다. 결과: 1) 폐의 wet/dry 무게비 및 기관지 폐포세척액내 albumin 농도는 내독소 대량투여후 12시간에 최고로 증가하였고 기관지 폐포세척액내 호중구는 내독소 대량투여후 6 시간에 최고로 증가하였다. 2) Cu, Zn SOD (IU/mg protein)는 대조군 ($66.7{\pm}26.3$)에 비해 대량투여군에서 6시간후 ($21.86{\pm}5.79$)와 12시간후 ($31.96{\pm}9.54$)에 각각 의의있는 감소를 나타냈으며 소량 반복투여군에서는 큰 변화가 없었다. 3) Mn SOD, catalase, GSH-Px의 양은 대량 또는 소량투여군 모두에서 특별한 변화를 관찰할 수 없었다. 결론: 내독소를 대량투여시 급성 폐부종의 소견과 함께 폐조직내 Cu, Zn SOD가 6시간 및 12시간후에 현저히 감소함을 관찰할 수 있었는데 이러한 현상은 내독소에 의해서 폐의 세포가 손상을 받은 때문으로 생각된다. 따라서 SOD를 외부에서 보충해주거나 폐내에서 합성을 증가시키는 방법으로 급성 폐손상의 진행을 막을수 있는지에 대한 연구가 진행되어야 할 것으로 사료된다.