Acetobacter strains는 포도당을 함유한 복합배지에서 셀룰로오스를 합성할 수 있는 세균이다. 본 연구에서는 Acetobacter sp. A9에 의한 셀룰로오스 생산에 영향을 미치는 몇 가지 배양 환경요인을 진탕배양을 통하여 조사하였다. 배지에 3-(N-morpholino) propanesulfonir acid (MOPS)와 CaCO$_3$ 등과 같은 완충성분의 첨가는 hcetobacter sp. A9에 의한 셀룰로오스 생산량을 증가시켰다. 따라서 배양시간 경과에 따른 배양액의 수소이온농도 조절이 경제적인 셀룰로오스 대량생산에 중요한 요인임을 알 수 있었다. 배지에 직경 10 mm의 bead를 첨가함으로써 다양한 기능을 가진 'disintegrated bacterial cellulose'가 생산되었다.
Alcohol류를 배양액 속에 첨가하면 배양 중에 생성되는 BC가 엉기는 현상이 나타났다. 생성된 BC의 엉김은 생산배지로부터의 cellulose의 분리회수를 손쉽게 할 수 있는 장점이 있다. 이 중에서 ethanol을 사용하는 경우에는 BC의 생산성과 미생물의 성장속도가 증가하였다. Ethanol 이외의 alcohol류는 BC의 엉김현상에는 효과가 있었으나 그 독성으로 인하여 미생물의 성장과 BC의 생산성을 감소시켰다. Ethanol과 다른 alcohol 모두 BC의 엉김효과는 있으나 ethanol만 진탕배양에서 $\textrm{Cel}^{-}$균주의 출현 방지에 효과가 있었다.
Samples were collected from a commercial ethanol production plant to enumerate the bacterial contamination in each step of a starch based ethanol production process. Though the slurry of raw material used in the process carried bacteria with various colony morphology in the order of $10^4$ per ml, only the colonies of white and circular form survived and propagated through the processes to the order of $10^8$ per ml at the end of fermentation. Almost all of the bacterial isolates from the fermentation broth were lactic acid bacteria. Heterofermentative Lactobacillus fermentum and L. salivarius, and a facultatively heterofermentative L. casei were major bacteria of an ethanol fermentation. In a batch fermentation L. fermentum was more detrimental than L. casei to ethanol fermentation. In a cell-recycled fermentation, ethanol productivity of 5.72 g $I^{-1} h^{-1}$ was obtained when the culture was contaminated by L. fermentum, whilst that of the pure culture was 9.00 g $1^{-1} h^{-1}$. Similar effects were observed in a cell-recycled ethanol fermentation inoculated by fermentation broth collected from an industrial plant, which showed a bacterial contamination at the level of 10$^8$ cells per ml.
Lactobacillus pentosus K1-23 was selected from among 25 lactic acid bacterial strains owing to its high inhibitory activity against several pathogenic bacteria, including Escherichia coli, Salmonella typhimurium, S. gallinarum, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Clostridium perfringens, and Listeria monocytogenes. Additionally, among 13 strains of Aureobasidium spp., A. pullulans NRRL 58012 was shown to produce the highest amount of ${\beta}$-glucan ($15.45{\pm}0.07%$) and was selected. Next, the optimal conditions for a solid-phase mixed culture with these two different microorganisms (one bacterium and one yeast) were determined. The optimal inoculum sizes for L. pentosus and A. pullulans were 1% and 5%, respectively. The appropriate inoculation time for L. pentosus K1-23 was 3 days after the inoculation of A. pullulans to initiate fermentation. The addition of 0.5% corn steep powder and 0.1% $FeSO_4$ to the basal medium resulted in the increased production of lactic acid bacterial cells and ${\beta}$-glucan. The following optimal conditions for solid-phase mixed culture were also statistically determined by using the response surface method: $37.84^{\circ}C$, pH 5.25, moisture content of 60.82%, and culture time of 6.08 days for L. pentosus; and $24.11^{\circ}C$, pH 5.65, moisture content of 60.08%, and culture time of 5.71 days for A. pullulans. Using the predicted optimal conditions, the experimental production values of L. pentosus cells and ${\beta}$-glucan were $3.15{\pm}0.10{\times}10^8CFU/g$ and $13.41{\pm}0.04%$, respectively. This mixed culture may function as a highly efficient antibiotic substitute based on the combined action of its anti-pathogenic bacterial and immune-enhancing activities.
하수를 이용해서 배양된 조류는 바이오디젤 생산에 유용한 자원이다. 그러나 실제 하수에서 조류의 영양염류 신진대사와 하수 세균과의 상호작용에 관한 연구는 미흡하다. 본 연구에서는 하수로 배양되는 대표적 조류균주인 Ankistrodesmus gracilis SAG 278-2에 의한 하수 내 질소, 인 제거 거동을 평가하였고, 조류와 상호작용하는 하수 내의 세균 군집을 분석하였다. 하수 슬러지 세균 군집과 비교하였을 때, 조류-세균 복합 군집은 하수 내보다 높은 영양염류 제거를 보였다. 16S rRNA 유전자 분석 결과, 조류-세균 군집에서 조류가 성장함에 따라 Unclassified Alcaligenaceae 세균이 선택적으로 우점됨을 알 수 있었고, 조류에 의해서 선택적으로 우점화된 하수세균은 자연 수질 환경에서 조류와 공생적으로 상호작용 하는 것으로 알려진 Alcaligenes faecalis subsp. 5659-H와 계통학적으로 가까운 것으로 밝혀졌다. 본 연구의 결과, 하수 내의 높은 영양염류 제거를 보이는 조류-세균 복합 군집에서의 조류의 성장 및 신진대사가 특정 세균의 분포에 영향을 주는 것을 알 수 있었다.
Bacillus thuringiensis (Bt)는 나비목의 해충방제에 주로 사용되는 미생물농약이다. 그러나 파밤나방(Spodoptera exigua)과 배추좀나방(Plutella xylostella)에서 보듯 종령기에 접어들면 Bt 감수성이 현격하게 낮아져 방제효율이 낮아진다. 본 연구는 Bt의 병원력을 제고시키기는 데 목적을 두고, 이를 위해 곤충의 면역반응을 억제시키는 곤충병원세균의 대사물질을 이용하여 Bt의 혼합제를 개발하려 했다. 곤충병원세균(Xenorhabdus nematophila (Xn) 또는 Photorhabdus temperata ssp. temperata (Ptt))의 배양액을 다양한 농도로 Bt에 혼합하여 파밤나방과 배추좀나방 종령 유충에 처리하였을 때 Bt 병원력을 현격하게 증가시켰다. 세균 배양액으로부터 동정한 다섯 가지의 화합물을 Bt와 혼합하여 처리하면 Bt 병원력을 또한 증가시켰다. 최적의 방제 효과를 나타낼 수 있는 Bt와 세균배양액 또는 대사물질의 혼합비율과 살포량을 결정한 후 배추 포장에 발생한 배추좀나방과 파밤나방 종령 유충에 대해 처리하였다. Bt와 Xn 배양액을 2 회 이상 살포하면 배추좀나방과 파밤나방에 대해 100%의 방제효과를 나타냈으나, Bt 단독으로 처리하면 각각 약 80%와 60% 이하의 방제효과를 나타내었다. Ptt 배양액 및 세균 대사물질을 포함한 다른 Bt 혼합제들 또한 뚜렷한 병원력 증가를 간이포장실험에서 보여주었다. 이러한 Bt 혼합제를 통틀어 "비티플러스"라 명명하였으며, 이는 Bt 약효의 단점을 극복한 효과적 미생물 살충제로 개발 가능성을 보여주었다.
During the screening or antiviral substances having inhibitory effect on tobacco mosaic virus(TMV) infection to tobacco plants, we found that a bacterial isolate, KTB61, which was identified as a Pseudomonas sp., strongly inhibited the formation of TMV local lesions. When the culture filtrate from KTB61 was applied on the upper surface of leaves of N. tabaccum Xanthi-nc tobacco at the same time of or 24 hours before TMV inoculation, almost complete inhibition was achieved. Incidence of systemic TMV infection to the susceptible tobacco cultivar, NC82, was reduced by 95% when TMV was inoculated onto the upper surface of leaves 24 hours after spraying the culture filtrate. Also 75∼80% of inhibitory effect was obtained by the inoculation of TMV onto the under surface of the leaves treated with culture filtrate 24 hours beforehand. In field trials, the TMV infection was reduced by 96.5% when the tobacco seedlings, N. tabaccum cv. NC82, were soaked with culture filtrate before transplanting.
본 연구는 성인성 치주염 환자의 치은연하 치면세균막을 총 60개 치아에서 채취하여 F. nucleatum과 A. actinomycetemcomitans의 동정을 위해 세균배양법, single PCR법 및 mutliplex PCR법을 실시하였고, 세균 동정법간의 비교를 통해 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. F. nucleatum과 A. actinomycetemcomitans의 동정을 위해 세균배양법, single PCR 및 multiplex PCR을 실시한 결과 F. nucleatum은 각각 12개(20.0%), 45개(75.0%), 43개(71.7%) 치아에서 양성반응을 보였지만, A. actinomycetemcomitans는 각각 0개(0.0%), 4개(6.7%), 1개(1.7%) 치아에서 양성반응이 나타났다. 2. F. nucleatum은 세균배양법에 비해 single PCR법 및 multiplex PCR법에서 높은 검출 빈도를 보여 좀 더 효율적인 세균 동정법으로 생각되었지만, 통계적으로는 유의한 차이가 없었다. 3. A. actinomycetemcomitans는 세균배양법에서 전혀 검출되지 않아 통계적으로 검정할 수 없었고, 세균 동정법간의 비교도 어려웠다. 4. F. nucleatum과 A. actinomycetemcomitans의 동정을 위한 single PCR법과 multiplex PCR법 간의 비교에서 두 세균 모두 검출 빈도에 있어서는 큰 차이를 보이지 않았지만, 통계적으로는 유의한 차이를 보였다.
Eight distinct bacteria were isolated form diseased mycelia of the edible mushroom, Pleurotus eryngii. 16S rDNA sequence analysis showed that the isolates belonged to a variety of bacterial genera including Bacillus (LBS5), Enterobacter (LBS1), Sphingomonas (LBS8 and LBS10), Staphylococcus (LBS3, LBS4 and LBS9) and Moraxella (LBS6). Among them, 4 bacterial isolates including LBS1, LBS4, LBS5, and LBS9 evidenced growth inhibitory activity on the mushroom mycelia. The inhibitory activity on the growth of the mushroom fruiting bodies was evaluated by the treatment of the bacterial culture broth or the heat-treated cell-free supernatant of the broth. The treatment of the culture broths or the cell-free supernatants of LBS4 or LBS9 completely inhibited the formation of the fruiting body, thereby suggesting that the inhibitory agent is a heat-stable compound. In the case of LBS5, only the bacterial cell-containing culture broth was capable of inhibiting the formation of the fruiting body, whereas the cell-free supernatant did not, which suggests that an inhibitory agent generated by LBS5 is a protein or a heat-labile chemical compound, potentially a fungal cell wall-degrading enzyme. The culture broth of LBS1 was not inhibitory. However, its cell-free supernatant was capable of inhibiting the formation of fruiting bodies. This indicates that LBS1 may produce an inhibitory heat-stable chemical compound which is readily degraded by its own secreted enzyme.
Objective : This experimental study was performed to investigate the effect of Herbe-medicine used for eye disease(Sean-tang, Jinpi-san, Tangpo-san, Copitdis Rhizoma) on Staphylococcus epidermidis keratitis. Methods : After administering various herbal eye drops on Staphylococcus epidermidis, I measured MIC and the size of inhibition zone. MIC was measured by dropping from 20 to $50{\mu}{\ell}$ according to density. Anti-bacterial potency was measured by the size of inhibition zone with change of volume under 2 days culture condition. Also continuous anti-bacterial potency of herbal eye drops was measured by the size of inhibition zone according to 2 days and 6 days culture each under the $50{\mu}{\ell}$ condition. Results : 1. MIC on Staphylococcus epidermidis in Sean-tang, Jinpi-san was 1%, $50{\mu}{\ell}$ 2. MIC on Staphylococcus epidermidis in Tangpo-san, Coptidis rhizoma was 10%, $50{\mu}{\ell}$ 3. MIC on Staphylococcus epidermidis in Cravit was 0.1%, $20{\mu}{\ell}$. 4. Under the 2 days culture condition, the size of inhibition zone on Staphylococcus epidermidis by volume for Sean-tang was 10.0mm in $50{\mu}{\ell}$, Jinpi-san was 16.0mm in $50{\mu}{\ell}$, Tangpo-san was 17.5mm in $50{\mu}{\ell}$, Coptidis rhizoma was 31.0mm in $50{\mu}{\ell}$ and Cravit was 34mm in $50{\mu}{\ell}$, showed the highest anti-bacterial potency. 5. Under the $50{\mu}{\ell}$ condition, the size of inhibition zone on Staphylococcus epidermidis by 2 and 6 culture days for Sean-tang was 47.5mm in 6days, Jinpi-san was 36.0mm in 6days, Tangpo-san was 45.0mm in 6 days and Cravit was 48.0mm in 6 days, which showed the highest anti-bacterial potency. 6. Under the $50{\mu}{\ell}$ culture condition, the size of inhibition zone on Staphylococcus epidermidis by 2 and 6 culture days for Coptidis rhizoma was 31.0mm in 2 days and 6 days, which showed the same anti-bacteria1 potency. Conclusions : The present author think that Herbe-medicine used for eye disease can be used to cure Staphylococcus epidermidis keratitis and if further study is performed, the use of the Herbe-medicine used for eye disease will be valuable and beneficial in the clinical medicines.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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