본 연구에서는 항균활성을 지니는 기능성 생고분자 필름을 제조하기 위한 전 단계로 키토산과 젤라틴을 이용하여 혼합비율별로 키토산/젤라틴 혼합용액의 항균활성을 측정하였다. 사용된 균주는 그램양성(Bacillus cereus ATCC 14579, Listeria monecytogenes ATCC 15313) 및 그램음성(Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella enteritidis IFO 3313) 세균 4종류이고, paper diffusion method와 optical density method로 항균효과를 나타내는 키토산/젤라틴 혼합용액의 최적 혼합비율 및 키토산의 최소저해농도를 측정하였다. 또한 키토산의 용매로 사용된 2%(v/v) 초산의 항균효과를 측정하였다. 혼합비율별로 제조된 키토산/젤라틴 혼합용액을 이용하여 paper diffusion method로 paper disc(8 mm)에 $50\;{\mu}L$, $75\;{\mu}L$씩 분주시켜 항균활성을 측정한 결과, 저해환의 크기는 8 mm에서 18.07 mm로 측정되었다. 키토산의 농도가 0%에서 10%(B. cereus, E. coli, E. enteritidis), 20%(L. monocytogenes)까지는 전혀 항균활성을 나타내지 않았지만, 그 농도가 20%(B. cereus, E. coli, S. enteritidis), 30%(L. moncytogenes) 이상으로 높아질수록 항균활성이 서서히 증가하는 경향을 보였다. L. monocytogenes는 키토산의 농도가 30%에서 항균활성을 나타내었지만, 그 저해환의 크기가 뚜렷하지 않았다. 따라서 B. cereus. E. coli 및 S. enteritidis 균주들에 대하여 항균환성을 나타내는 혼합용액의 혼합비율은 chitosan/gelatin=2/8이였고, 그 때 항균활성을 나타내는 키토산의 절대량은 0.3 mg으로 측정되었다. 또한 L. monocytogenes에 대해서는 혼합비율이 chitosan/gelatin=4/6이였고, 항균활성을 나타내는 키토산의 절대량은 0.6 mg이었다. 혼합비율별로 제조된 키토산/젤라틴 혼합용액을 이용하여 항균활성을 나타내는 키토산의 최소저해농도를 optical density method로 측정하였다. 그 결과, B. cereus, L. monocytogenes, E. coli 및 S. enteritidis에 대한 키토산의 최소저해농도는 각각 0.1461 mg/mL, 0.2419 mg/mL, 0.0980 mg/mL 및 0.0490 mg/mL로 측정되었다. 또한 2%(v/v) 초산 자체의 최소저해농도를 측정한 결과, B. cereus, L. mosocytogenes, E. eoli에 대해서는 control과 비교시 유의적인 항균효과는 나타나지 않았다. 반면에 S. enteritidis의 경우는 배양시간 4시간까지는 항균활성을 나타내었지만, 8시간 이후부터는 S. enteritidis의 성장이 control 보다 높아져 배양시간 20시간에서는 control 보다 약 2배 이상 균주의 성장을 촉진시켰다.
The chemical compositions, and antibacterial and antifungal effects of essential oils extracted from three coniferous species, Pinus densiflora, Cryptomeria japonica, and Chamaecyparis obtusa, were investigated. Gas chromatography mass analysis of the essential oils revealed that the major components and the percentage of each essential oil were 16.66% $\beta$-phellandrene and 14.85% $\alpha$-pinene in P. densiflora; 31.45% kaur-16-ene and 11.06% sabinene in C. japonica; and 18.75% bicyclo [2,2,1] heptan-2-ol and 17.41% 2-carene in Ch. obtusa. The antimicrobial assay by agar disc diffusion method showed that $2.2{\mu}g$ of Ch. obtusa oil inhibited most effectively the growth of Escherichia coli ATCC 33312 and Klebsiella oxytoca ATCC 10031, whereas the C. japonica oil gave weak antimicrobial activity. The minimal inhibitory concentration(MIC) values for bacterial strains were in the range of 5.45-21.8 mg/ml depending on essential oils, but most Gram-negative bacteria were resistant even at 21.8 mg oil/ml. P. densiflora oil showed the most effective antifungal activity and the MIC values for Cryptococcus neoformans B42419 and Candida glabrata YFCC 062CCM 11658 were as low as 0.545 and 2.18 mg/ml, respectively. Cryp. neoformans B42419 was the most sensitive to all essential oils in the range of 0.545-2.18 mg/ml. Our data clearly showed that the essential oils from the three conifers had effective antimicrobial activity, especially against fungi.
Yam, Prunella was stepwise extracted with hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol, and water. Anti-microbial activity of each extract was investigated. Hexane extract was tested for anti-microbial effect on Streptocaccus mutans, one of causative factor of dental caries. Methanol extracts of 7 plants were investigated to anti-microbial effects on S. mutans KCTC 5316, P. gingivalis KCTC 5352, S. aureus KCTC 1927 by means of agar diffusion method. Methanol extract of Yam and Prunella revealed anti-microbial activity against S. mutans, P. gingivalis, and S. aureus. Also, hexane fraction of Yam revealed anti-microbial activity against S. mutans. In sequence of hexane, chloroform, ethylacetate, butanol fraction by Prunelia acted as potent anti-microbial agent on P. gingivalis. The measured MIC of hexane fraction of Yam and Prunella on S. mutans KCTC 5316 strain was 0.25 mg/ml and 0.5 mg/ml and the MIC of hexane fraction of Prunella on S. aureus was 0.5 mg/ml. The hexane fraction of Yam and Prunella suppressed viable ceil counts(VCC) of S. mutans, especially after 24 hrs. The Prunella hexane fraction suppressed VCC of S. aureus, after 12 and 24 hrs. Tested concentrations were 0.1, 0.25 and 0.5 mg/ml. the results were compared with control (0 mg/ml). The pH of S. mutans media and GTase activity were determined to evaluate the anticariogenic activity of Yam, Prunella hexane fraction. The pH were increased from 5.6 to 7.0-7.2 in concentration of 2.0 mg/ml. Yam hexane extraction revealed 35% inhibition to GTase activity and Punella inhibited 25% of GTase. These results suggest that the hexane extracts of Yam and prunella have Antibacterial activities against S. mutans, P. gingivalis, S. aureus and have preventive effect on dental caries.
Makade, Chetana S.;Shenoi, Pratima R.;Morey, Elakshi;Paralikar, Ameya V.
Restorative Dentistry and Endodontics
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제42권4호
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pp.264-272
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2017
Objectives: Literature has shown that micro-organisms contaminate gutta percha (GP) during storage and manipulation. Till date herbal extracts are not explored as an alternative medicament for pre-operative chairside disinfection of GP cones. The purpose of our study was to evaluate the antimicrobial activity and efficacy of lemon grass oil (LG), basil oil (BO), and obicure tea extract (OT) in disinfecting GP cones before obturation. Materials and Methods: Agar diffusion method was used to evaluate the antimicrobial efficacy of LG, BO, OT, and sodium hypochlorite (control) against common contaminants, namely, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, and Candida albicans. One hundred and twenty GP cones were contaminated and cut into 2. First half was placed in the broth and incubated; whereas the second was treated with herbal extracts for 1 minute and then incubated for 24 hours in the broth. Any inhibition in bacterial growth was noted with presence/absence of turbidity. Two-way analysis of variance and ${\chi}^2$ test were used to assess the effectiveness of herbal extracts to decontaminate GP. Results: LG showed the highest inhibition zones ($29.9{\pm}6.9mm$) for all tested organisms, followed by OT extract ($16.3{\pm}1.8mm$), sodium hypochlorite ($16.0{\pm}1.6mm$), and BO ($14.5{\pm}5.3mm$). Statistically significant difference was observed between LG and other herbal extracts (p < 0.05). Conclusions: All extracts proved to be potential rapid chairside disinfectants of GP cones with LG showing the highest antimicrobial activity.
Objective: Microbial aggregation around dental implants can lead to loss/loosening of the implants. This study was aimed at surface treating titanium microimplants with silver nanoparticles (AgNPs) to achieve antibacterial properties. Methods: AgNP-modified titanium microimplants (Ti-nAg) were prepared using two methods. The first method involved coating the microimplants with regular AgNPs (Ti-AgNP) and the second involved coating them with a AgNP-coated biopolymer (Ti-BP-AgNP). The topologies, microstructures, and chemical compositions of the surfaces of the Ti-nAg were characterized by scanning electron microscopy (SEM) equipped with energy-dispersive spectrometer (EDS) and X-ray photoelectron spectroscopy (XPS). Disk diffusion tests using Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, and Aggregatibacter actinomycetemcomitans were performed to test the antibacterial activity of the Ti-nAg microimplants. Results: SEM revealed that only a meager amount of AgNPs was sparsely deposited on the Ti-AgNP surface with the first method, while a layer of AgNP-coated biopolymer extended along the Ti-BP-AgNP surface in the second method. The diameters of the coated nanoparticles were in the range of 10 to 30 nm. EDS revealed 1.05 atomic % of Ag on the surface of the Ti-AgNP and an astounding 21.2 atomic % on the surface of the Ti-BP-AgNP. XPS confirmed the metallic state of silver on the Ti-BP-AgNP surface. After 24 hours of incubation, clear zones of inhibition were seen around the Ti-BP-AgNP microimplants in all three test bacterial culture plates, whereas no antibacterial effect was observed with the Ti-AgNP microimplants. Conclusions: Titanium microimplants modified with Ti-BP-AgNP exhibit excellent antibacterial properties, making them a promising implantable biomaterial.
본 연구는 닭의 분뇨로부터 악취저감 방안으로, 쌀뜨물에 L. sakei의 배양조건과 저장 중 안정성을 검토하였다. 그리고 닭 분뇨로부터 미생물을 분리 동정하고, 이들 미생물에 대한 L. sakei의 항균능력을 검토하였다. 또한 L. sakei 함유 쌀뜨물 발효액이 닭 분뇨의 악취를 저감시키는지에 대하여 연구를 수행하였다. 연구결과, 쌀뜨물은 L. sakeiv의 생장에 좋은 영양소로 확인되었으며, 저장 기간 중 생존력도 강한 것으로 증명되었다. 또한 L. sakei는 닭의 분뇨로부터 분리된 악취유발 미생물의 생장 또한 억제하는 것으로 나타났다. 이러한 항균작용 또는 정균작용으로 사회적으로 문제가 되는 축산분뇨에 대하여, L. sakei를 이용해 배양된 쌀뜨물은 악취 유발을 저감할 수 있는 것으로 사료된다. 더욱이 쌀뜨물은 가치가 인정되지 않아 그대로 하수도로 버리게 되어 환경오염을 유발원으로 인식되었는데, 유산균 발효에 의한 악취 제거, 기능성 사료의 이용 등 산업적으로 많은 응용이 적용될 것으로 기대된다.
Lee, Joon Ha;Kim, In-Woo;Kim, Mi-Ae;Yun, Eun-Young;Nam, Sung-Hee;Ahn, Mi-Young;Lee, Young Bo;Hwang, Jae Sam
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제31권1호
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pp.14-19
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2015
In a previous report, we identified several candidate antimicrobial peptides through de novo RNA sequencing of the centipede Scolopendra subspinipes mutilans. Here, we identify and characterize one of these peptides, Scolopendrasin I. We identified the centipede antimicrobial peptide Cecropin from the centipede transcriptome using an SVM algorithm, and subsequently analyzed the amino acid sequence for predicted secondary structure using a GOR algorithm. We identified an alpha helical region of Cecropin and named it Scolopendrasin I. We then assessed antimicrobial and hemolytic activity of Scolopendrasin I. Scolopendrasin I showed antimicrobial activity against various microbes, including antibiotic-resistant Gram-negative bacteria, in a radial diffusion assay. Scolopendrasin I had potent antibacterial activity against acne-associated microbes in a colony count assay and showed no hemolytic activity in a hemolysis assay. In addition, we confirmed that Scolopendrasin I bound to the surface of bacteria via a specific interaction with lipoteichoic acid and lipopolysaccharide, two components of bacterial cell membranes. In conclusion, the results presented here provide evidence that this is an efficient strategy for antimicrobial peptide candidate identification and that Scolopendrasin I has potential for successful antibiotic development.
Choi, Seo Yeol;Kim, Jong-Wan;Ko, Ji Won;Lee, Young Seok;Chang, Young Pyo
Clinical and Experimental Pediatrics
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제61권8호
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pp.245-252
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2018
Purpose: This study investigated patterns of ischemic injury observed in brain images from patients with neonatal group B Streptococcal (GBS) meningitis. Methods: Clinical findings and brain images from eight term or near-term newborn infants with GBS meningitis were reviewed. Results: GBS meningitis was confirmed in all 8 infants via cerebrospinal fluid (CSF) analysis, and patients tested positive for GBS in both blood and CSF cultures. Six infants (75.0%) showed early onset manifestation of the disease (<7 days); the remaining 2 (25.0%) showed late onset manifestation. In 6 infants (75%), cranial ultrasonography showed focal or diffuse echogenicity, suggesting hypoxic-ischemic injury in the basal ganglia, cerebral hemispheres, and periventricular or subcortical white matter; these findings are compatible with meningitis. Findings from magnetic resonance imaging (MRI) were compatible with bacterial meningitis, showing prominent leptomeningeal enhancement, a widening echogenic interhemisphere, and ventricular wall thickening in all infants. Restrictive ischemic lesions observed through diffusion-weighted imaging were evident in all eight infants. Patterns of ischemic injury as detected through MRI were subdivided into 3 groups: 3 infants (37.5%) predominantly showed multiple punctuate lesions in the basal ganglia, 2 infants (25.0%) showed focal or diffuse cerebral infarcts, and 3 infants (37.5%) predominantly showed focal subcortical or periventricular white matter lesions. Four infants (50%) showed significant developmental delay or cerebral palsy. Conclusion: Certain patterns of ischemic injury are commonly recognized in brain images from patients with neonatal GBS meningitis, and this ischemic complication may modify disease processes and contribute to poor neurologic outcomes.
CMCase와 xylanase 분비능이 우수한 고온성 세균을 분리하기 위하여 진주 인근지역의 느타리 재배농장으로부터 수확후배지를 수집하였다. 느타리 수확후배지로부터 17종의 균주를 분리하였으며 이 중 CMCase와 xylanase 활성이 큰 균주 YJ09를 선발하였다. Bacillus ID kit와 MicroLog system을 이용하여 분리균 YJ09의 생리적 생화학적 특성을 조사한 결과 분리균 YJ09은 B. licheniformis와 유사한 특징을 나타내었으며 16S rDNA 염기서열 분석 결과에서도 B. licheniformis와 98.9%의 상동성을 나타내었다. 이와 같은 결과를 종합하여 분리균 YJ09은 B. licheniformis YJ09로 동정되었다. 분리균이 분비하는 CMCase와 xylanase 활성은 분리균이 증식함에 따라 대수증식기 중반부터 급격히 증가하였고 정지기에 진입하면 효소활성이 더 이상 증가하지 않는 것으로 나타났으며 xylanase 활성은 대수증식기 초기부터 지속적으로 증가하여 대수증식기 중반에 최대활성을 나타내었다.
The hydrolysis of proteins constitutes an invaluable tool, granting access to a variety of peptide fragments with potentially interesting biological properties. Therefore, a hemoglobin (Hb) hydrolysate of Crocodylus siamensis was generated by digestion under acidic conditions. The antibacterial and antioxidant activities of the Hb hydrolysate were assessed in comparison with intact Hb. A disc diffusion assay revealed that the Hb hydrolysate exhibited antibacterial activity against eight strains of gram-positive bacteria and showed a higher efficacy than intact Hb. Moreover, the antioxidant activity of intact Hb and its hydrolysate was evaluated using ABTS and DPPH radical scavenging assays. The Hb hydrolysate exhibited free radical scavenging rates of 6-32%, whereas intact Hb showed a slightly higher activity. In addition, non-toxicity to human erythrocytes was observed after treatment with quantities of Hb hydrolysate up to $10{\mu}g$. Moreover, active fragmented Hb (P3) was obtained after purifying the Hb hydrolysate by reversed-phase HPLC. Scanning electron microscopy demonstrated the induction of bacterial cell membrane abnormalities after exposure to P3. Antibacterial and antioxidant activities play crucial roles for supporting the wound healing activity. Consequently, an in vivo mice excisional skin wound healing assay was carried out to investigate the effects of intact Hb treatment on wound healing in more detail. The results clearly demonstrate that intact Hb is capable of promoting 75% wound closure within 6 days. These findings imply that intact Hb of C. siamensis and its acid hydrolysate may serve as valuable precursors for food supplementary products benefitting human health.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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