From the sequence alignment of various non-ribosomal peptide synthetases, several motifs of highly conserved sequences have been identified within each domain of peptide synthetases. We designed PCR primers based on the highly conserved nucleotide sequences to amplify and isolate a ∼7.2-kb DNA fragment of the Bacillus subtilis 713 which was isolated and reported to produce an antifungal peptide compound. Nucleotide sequence analysis of 4.8 kb of the predicted amino acids revealed significant homology to various peptide synthetases over the whole sequence and also revealed two amino acid-activating domains with highly conserved Core 1 to Core 6 and spacer motif. This suggests that the isolated DNA fragment is part of a peptide synthetase gene for antifungal peptide.
This study was conducted to reduce the using amount of chemical fungicides for the control of red-pepper powdery mildew. Effect of combined application of three microbial fungicides and six chemical fungicides for the control of red-pepper powdery mildew was examined in vitro, in pot assay and under field condition. One chemical fungicide (Azoxystrobin+Chlorothalonil) among six chemical fungicides significantly suppressed three microbial fungicides (Bacillus subtilis Y1336, Bacillus subtilis DBB1501, Bacillus subtilis QST-713) registered for the control of pepper powdery mildew in vitro. In the pot assay, two mixed application such as B. subtilis DBB1501+Trifloxystrobin, B. subtilis QST713+Trifloxystrobin among nine mixed applications of three microbial fungicides and three chemical fungicides showed the highest suppressive effect against red pepper powdery mildew. Also, suppressive effect of the mixed application of B. subtilis QST713 and Trifloxystrobin was similar to that of single application of three chemical fungicides(Myclobutanil, Trifloxystrobin, Hexaconazole). In the field test, when the microbial fungicides (B. subtilis DBB1501, B. subtilis QST713) and the chemical fungicide (Trifloxystrobin) for the control of powdery mildew of red pepper were mixed foliar sprayed four times at 7 day-intervals, the control values were in the range of 70.3% to 70.9%. On the other hand, when each of the chemical fungicide (Trifloxystrobin) was foliar sprayed four times at 7 day-intervals, the control value was 72.7%. Consequently, the mixed application of the microbial fungicides and chemical fungicides could be recommended as a one of control measures for reducing the using amount of chemical fungicides.
Peptide synthetases produced from various microorganisms are multifunctional enzyme complexes and their substrates are recognized and activated by adenylation domains. To identify the substrate specificity of the peptide synthetase isolated from Bacillus subtilis 713, known to produce an antifungal peptide, two adenylation domains containing the minimal functional portion were expressed and purified. ATP-ppi exchange experiments and kinetic studies revealed that the two adenylation enzymes had a substrate specificity to $_{L}-lysine{\;}and{\;}_{L}-tryptophan$, respectively. In addition, based on a signature sequence comparison, the substrate of the third domain was predicted to be L-glutamic acid. These results suggest that this peptide synthetase is novel because there has been no previous report on a peptide synthetase that uses $_{L}-lysine,{\;}_{L}-tryptophan,{\;}and{\;}_{L}-glutamic$ acid as substrates in that order.
The single application of Bacillus subtilis QST713(BS QST713) mixed application with fungicides and alternate application were treated to examine the control of alternaria leaf blight of Panax ginseng. Control value of alternaria leaf blight by single application of BS QST713 at 10 days interval was 83.3%, and those of single application at 10 days interval was $80.4{\sim}83.7%$ by azoxystrobin, chlorothalonil copper sulfate basic, copper sulfate basic, kresoxim-methyl, difenoconazole, mancozeb. When mixture of BS QST713 and fungicides were applied at 14 days interval, the control value of alternaria leaf blight were 83.6% by BS QST713 and mancozeb, and 82.6% by BS QST713 and azoxystrobin. However, mixture of BS QST713 with difenoconazole, kresoxim-methyl, copper sulfate basic and chlorothalonil copper sulfate basic exhibited the disease control values from 61.1% to 76.4%, which showed slightly lower control efficacy. In Daejeon, the alternate application of BS QST713 followed by copper sulfate basic with 14 days interval was 85.9% in control value, which showed the best control efficacy. The alternate application with other tested fungicides slightly decreased to $55.5{\sim}78.2%$ in control value. However, the alternate application of BS QST713 followed by fungicides showed very high control efficacy, which were approximately 90% in Muju, Jeonbuk Province. Consequently, the single, mixed or alternate application of BS QST713 and fungicides could be recommended as a control method to reduce the amount of fungicides.
This study was carried out to develop environmental friendly control for major diseases and pests on Boxthorn (Lycium chinense Mill.). Outbreak of Eighteen diseases and pests were found at the Boxthorn organic yards in Chung-nam province. Among them Powdery mildew (Erysiphe polygoni de Cand.), Hypophyllous mold (Pseudocercospora chengtuensis (Tai)), Western flower trips (Frankliniella occidentalis (Pergande)), Green peach aphid (Myzus pericae (Sulzer)) and Corn earworm (Helicoverpa armigera) needed to be controled by environmental friendly methods for high fruit yield of organic Boxthorn. In summer(Jun) test Bacilus subtilis QST 713 wettable powder and Sulfur wettable powder were effective and in autumn (Sep.) test Sulfur, Copper hydroxide and Paraffinic oil were relatively effective in Powdery mildew. In Hypophyllous mold control test Paraffinic oil and Bacilus subtilis GB - 0365 were effective with above 70% control value. And it was possible to control Western flower trips by natural enemy (Orius laevigatus) by 80% control value. Corn earworm was possible to control by Bacillus thuringiensis subsp. aizawai GB413 flowable and Bacillus thuringiensis aizawa 0423 wettable powder application above 70%. And Green peach aphid was controllable with environmental friendly materials, such as, Bacillus subtilis (Seoncho), Bacillus subtilis (Jinsami) above 80% and Ginkgo nut extract above 70% control value.
Nam, Myeong-Hyeon;Kim, Hyeon-Suk;Lee, Won-Keun;Gleason, Mark L.;Kim, Hong-Gi
Horticultural Science & Technology
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v.29
no.2
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pp.151-155
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2011
The fungus Botrytis cinerea causes fruit rot of strawberry and the damages can result in harvest losses upto 50%. Proper timing of fungicide application is essential for successful control of Botrytis fruit rot, fenhexamid plus iminoctadine tris, cyprodinil plus fludioxonil, fludioxonil alone, and Bacillus subtilis QST713 were applied to individual buds, flowers, and green and red fruit of cultivar 'Seolhyang' ex vivo. Cyprodinil plus fludioxonil or fludioxonil alone was applied i) before and after a 5-hr period of low-temperature ($0^{\circ}C$) incubation ex vivo ii) in field trials. Strawberry flowers and red fruit were more susceptible to B. cinerea than the green fruits. Incidence of Botrytis rot with fenhexamid plus iminoctadine tris and cyprodinil plus fludioxonil was the lowest at flowering, whereas B. subtilis QST713 did not significantly among treatments. In 2010, incidence of Botrytis fruit rot was significantly reduced when fludioxonil was applied two times at 1 week intervals from 50% bloom in field trials. Cultivars Redpearl and Seolhyang were more susceptible to low-temperature than cvs. Maehyang and Akihime. Cyprodinil plus fludioxonil application was effective when applied before onset of the low-temperature treatment period. Fludioxonil showed the most effective when it was sprayed one and more than two times in before and post low-temperature condition, respectively. These results demonstrate that fungicide selection and timing can interact with stage of fruit development and low-temperature in determining effectiveness of suppression of Botrytis fruit rot.
Kim, Young-Il;Jeong, Se-Hyung;Seok, Joon-Sang;Yang, Si-Yong;Huh, Jung-Won;Kwak, Wan-Sup
Journal of Animal Science and Technology
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v.50
no.5
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pp.713-720
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2008
This study was conducted to isolate and identify xylanase- and cellulase-producing thermophilic bacteria from stacked spent mushroom substrates and to determine the optimal medium conditions for their growth. Bacteria with the highest xylanase and CMCase activities were strain 3 and 201-7. Both of them were identified as Bacillus spp. and named Bacillus subtilis KU3 and Bacillus subtilis KU201-7. The optimal medium condition of Bacillus subtilis KU3 was obtained when 3%(w/v) of yeast extract and 1%(w/v) of maltose were used as nitrogen and carbon sources, respectively. That of Bacillus subtilis KU201-7 was obtained when 0.5%(w/v) of yeast extract and 0.5%(w/v) of CMC were used as nitrogen and carbon sources, respectively.
Pepper anthracnose caused by Collectotrichum acutaum has been known as one of the most damaging diseases of pepper, which has reduced not only yield but also quality of pepper produce almost every year. This study was conducted to develop control strategy against pepper anthracnose by alternate application of agricultural organic materials and chemical fungicides. The alternate application effect of agricultural organic materials and chemical fungicides for controlling pepper anthracnose were examined in vitro and in the field. First, thirteen microbial agents and twenty two agricultural organic materials were screened for antifungal activity against C. acutatum through the dual culture method and bioassay. As a result, one microbial agent (Bacillus subtilis QST-713) and three agricultural organic materials (sulfur, bordeaux mixture, marine algae extracts) were found to show high inhibition effect against C. acutatum. In the field test, when Iminoctadine tris+thiram, a chemical fungicide for controlling pepper anthracnose, was sprayed, it reduced disease incidence by 89.5%. Meanwhile Sulfur, bordeaux mixture, copper, marine algae extracts and Bacillus subtilis QST-713 showed low disease incidence at the range of 33.1~81.0%. However, when Iminoctadine tris+thiram and agricultural organic materials(bordeaux mixture, marine algae extracts) were applied to pepper fruits alternately two times at 7 days interval, there was a 81.7 and 87.1% reduction in disease, respectively. Consequently, the alternate spray of chemical fungicide (Iminoctadine tris+thiram) and agricultural organic materials (bordeaux mixture, marine algae extracts) could be recommended as a control method to reduce the using amount of chemical fungicide.
Nam, Hyo-Song;Yang, Hyun-Ju;Oh, Byung Jun;Anderson, Anne J.;Kim, Young Cheol
The Plant Pathology Journal
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v.32
no.3
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pp.273-280
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2016
Most biocontrol agents for plant diseases have been isolated from sources such as soils and plants. As an alternative source, we examined the feces of tertiary larvae of the herbivorous rhino beetle, Allomyrina dichotoma for presence of biocontrol-active microbes. The initial screen was performed to detect antifungal activity against two common fungal plant pathogens. The strain with strongest antifungal activity was identified as Bacillus amyloliquefaciens KB3. The inhibitory activity of this strain correlated with lipopeptide productions, including iturin A and surfactin. Production of these surfactants in the KB3 isolate varied with the culture phase and growth medium used. In planta biocontrol activities of cell-free culture filtrates of KB3 were similar to those of the commercial biocontrol agent, B. subtilis QST-713. These results support the presence of microbes with the potential to inhibit fungal growth, such as plant pathogens, in diverse ecological niches.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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