• 제목/요약/키워드: BRV S97

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Multiplex real-time PCR을 이용한 송아지 설사병 원인 주요 병원체의 동시검출 (Simultaneous Detection of Major Pathogens Causing Bovine Diarrhea by Multiplex Real-time PCR Panel)

  • 김원일;조용일;강석진;허태영;정영훈;김남수
    • 한국임상수의학회지
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    • 제29권5호
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    • pp.377-383
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    • 2012
  • 송아지 설사병은 국내 축산산업에 큰 피해를 주는 중요한 질병이다. 다양한 감염성 원인체들이 송아지 설사병에 관련될 수가 있기 때문에 효과적인 치료를 위해서는 신속한 감별진단이 필수적이다. 따라서 소설사병 바이러스(BVDV), 소 코로나바이러스(BCoV), A형 소 로타바이러스(BRV), 살모넬라, $K99^+$ 대장균, Cryptosporidium parvum등의 6개의 주요 병원체들을 동시에 검출하는 두 개의 multiplex real-time PCR으로 구성된 PCR 패널을 개발하여 국내 농가에서 전북대학교 동물질병진단센터로 접수된 97개의 설사 분변을 검사하였다. 또한 현미경 검사법을 이용하여 97개의 분변에서 Coccidium 충란을 검사하였다. 개발된 multiplex PCR의 민감도는 BVDV, BCoV와 BRV의 경우는 0.1 $TCID_{50}$, $K99^+$ 대장균은 5 CFU, Salmonella는 0.5 CFU, Cryptosporidium는 50 oocysts로 측정되었다. 또한 multiplex PCR의 증폭효율은 병원체에 따라0.97에서 0.99였다. 국내에서 접수된97개의 분변 중 36개의 분변은 multiplex PCR에 의해 최소 하나의 병원체에 대해 양성으로 판정되었고, 6개의 샘플은 2개의 병원체에 동시에 양성반응을 보였다. 또한 1달 이상 연령의 송아지 분변48개에서는 Coccidium 충란이 발견되었다. 결과적으로, 새로이 개발된 multiplex real-time PCR은 BVDV, BCoV, BRV, $K99^+$ 대장균, Salmonella와 Cryptosporidium과 관련된 송아지 설사병을 신속하고 정확하게 진단할 수 있는 유용한 검사법이 될 수 있을 것으로 기대되며 향후 Coccidium까지 검출할 수 있는 동시 진단법이 개발될 필요가 있을 것으로 생각된다.

$textsc{k}$-Casein, GMP, Sialic Acid가 한우송아지 Rotavirus와 제주도 Bovine Rotavirus(JBR)의 MA-104 세포감염에 미치는 영향 (Effect of $textsc{k}$-Casein, GMP and Sialic Acid on the Infection of MA-104 Cells by Korean Native Cattle Rotavirus and JBR)

  • 유제현;김종헌;박범석;유대환;신원선;김세민;지병주;송진욱
    • 한국축산식품학회지
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    • 제22권3호
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    • pp.274-280
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    • 2002
  • 로타바이러스는 유아와 어린 포유동물에 있어서 위장염을 일으키는 원인체로서 다양한 혈청형에 의해 발병되기 때문에 효과적인 백신 개발이 되지 않고 있다. 본 연구는 국내 분리 한우송아지 로타바이러스 S97과 JBR(Jeju island bovine rotavirus)에 $textsc{k}$-casein, GMf, sialic acid를 첨가하여 MA-104세포에 감염시켰을 때 그 억제 효과를 규명하기 위해 시행하였다. 한우송아지 로타바이러스 597과 JBR을 무혈청 Ml99배지의 MA-104세포에 감염시켜 37$^{\circ}C$에서 6일간 회전 배양하여 활성화시킨 다음, 로타바이러스 역가를 분석하였고, MA-104 세포에 활성화된 BRV를 감염시키고, $textsc{k}$-casein, GMP sialic acid를 각각 농도에 따라 첨가하여 15시간 배양한 다음 AEC 염색법으로 염색시켜 현미경 상에서 감염된 세포수를 계산하였다. 한우송아지 로타바이러스 S97과 GMR의 역가는 각각 2.5$\times$107과 2.0$\times$106 PFU/ml이었다. $textsc{k}$-casein, GMP의 농도 20001M에서 S97의 세포감염율은 97.4%와 97.44%로 나타났고, $textsc{k}$-casein, GWP의 농도 2000$\mu$M에서 JBR의 세포감염 억제율은 99.52%와 99.78%로 나타났다. Sialic acid의 농도 2000$\mu$M에서의 S97과 JBR의 세포감염 억제율은 3.85%와 3.63%로 나타났다. $textsc{k}$-casein, CU는 로타바이러스 S97과 JBR에 대해 농도 2000UM에서 97%이상의 억제효과를 나타냈으며, sialic acid는 억제효과가 거의 없었다. K-casein, GMP는 송아지뿐만 아니라 유아의 로타바이러스에 의한 설사를 억제할 수 있을 것으로 기대된다.

한우에서의 Rotavirus의 분리와 Serotype 결정 및 염기서열 분석 (Isolation, Serotyping and Nucleotide Sequence Analysis of Bovine Rotavirus Isolated from Korean Native Cattle)

  • 유제현;차광종;김응률;김유성;이영건;송진욱;조홍찬;주지선;박범석;유대환;김세민;지병주;이중복
    • 대한바이러스학회지
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    • 제30권3호
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    • pp.189-202
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    • 2000
  • This study was conducted to see what types of bovine rotaviruses were isolated at Jedong farm in Jeju province and Seohwa farm in Chungnum province. The results were as follows. 1. Rotavirus was positively detected in 18 out of 39 fecal samples from calves with diarrhea in Jeju province and in 13 out of 18 fecal samples from calves with diarrhea in Chungnam province. 2. The electropherotype pattern of dsRNA for 31 viruses was shown to be 4 : 2 : 3 : 2 type like traditional group A and the imigration pattern of dsRNA was the long type like NCDV (G6), JBR (G6), B223 (G10) and KK3 (G10). 3. The serotypes of the 18 viruses of Jedong and 9 viruses of Seowha were shown to be group A, subgroup I, G6, and P1 by ELISA and PCR analyses. The serotypes of S-2, S-6, S-9 and S-12 viruses of Seowha were shown to be group A, subgroup I, G10, but was not shown to be P type. 4. The partial nucleotide sequence of VP4 of S-8 was 97% homology with that of BRV 033. VP4 of J-10 showed 96% homology with that of BRV 033 in nucleotide sequence.

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