This study was done to establish a mouse model for catheter-related biofilm infection suitable to bioluminescence imaging (BLI). Biofilm formation of Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) Xen5 grown on catheter disks in vitro and in an implanted mouse model was real-time monitored during a 7-day study period using BLI. The numbers of integrated brightness (IB) and viable bacterial count (VBC) in the biofilm disks in vitro were highest at 24 h after inoculation; the IB of biofilm in vivo was increased until 24 h after implantation. A statistical correlation was observed between IB and VBC in vitro by linear regression analysis. The actual VBC value in vivo can be estimated accurately by IB without sacrifice. In addition, we monitored the change in white blood cells (WBCs) during infection. The number of WBCs on day 7 was significantly higher in the infection group than in the control group. This study indicates that BLI is a simple, fast, and sensitive method to measure catheter biofilm infection in mice.
Kim, Eun-Sook;Song, Ju-Yeon;Kim, Dae-Wi;Ko, Eun-Ji;Jensen, Susan E.;Lee, Kye-Joon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제18권12호
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pp.1884-1889
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2008
The ${\beta}$-lactamase inhibitory protein, BLIP-II, found in the culture supernatant of Streptomyces exfoliatus SMF19, shows no discernible sequence identity with other ${\beta}$-lactamase inhibitory proteins identified in Streptomyces spp. A null mutant of the gene encoding BLIP-II (bliB::$hyg^r$) showed a bald appearance on solid media. Although BLIP-II was initially isolated from the supernatant of submerged cultures, sites of BLIP-II accumulation were seen in the cell envelope. Mutation of bliB was also associated with changes in the formation of septa and condensation of the chromosomal DNA associated with sporulation. The bliB mutant exhibited infrequent septa, showing dispersed chromosomal DNA throughout the mycelium, whereas the condensed chromosomes of the wild-type were separated by regularly spaced septa giving the appearance of a string of beads. Therefore, on the basis of these results, it is suggested that BLIP-II is a regulator of morphological differentiation in S. exfoliatus SMF19.
The binding of TATA-binding protein (TBP) to the TATA-box containing promoter region is aided by many other transcriptional factors including TFIIA and TFIIB. The mechanistic insight into the assembly of RNA polymerase II preinitation complex (PIC) has been gained by either directly altering a function of target protein or perturbing molecular interactions using drugs, RNAi, or aptamers. Aptamers have been found particularly useful for studying a role of a subset of PIC on transcription for their ability to inhibit specific molecular interactions. One major hurdle to the wide use of aptamers as specific inhibitors arises from the difficulty with traditional assays to validate and determine specificity, affinity, and binding epitopes for aptamers against targets. Here, using a technique called the bio-layer interferometry (BLI) designed for a label-free, real-time, and multiplexed detection of molecular interactions, we studied the assembly of a subset of PIC, TBP binding to TATA DNA, and two distinct classes of aptamers against TPB in regard to their ability to inhibit TBP binding to TFIIA or TATA DNA. Using BLI, we measured not only equilibrium binding constants ($K_D$), which were overall in close agreement with those obtained by electrophoretic mobility shift assay, but also kinetic constants of binding ($k_{on}$ and $k_{off}$), differentiating aptamers of comparable KDs by their difference in binding kinetics. The assay developed in this study can readily be adopted for high throughput validation of candidate aptamers for specificity, affinity, and epitopes, providing both equilibrium and kinetic information for aptamer interaction with targets.
Objective : This study was designed to validate the cell trafficking efficiency of the in vivo bioluminescence image (BLI) study in the setting of transplantation of the luciferase expressing bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSC), which were delivered at each different time after transient middle cerebral artery occlusion (MCAO) in a mouse model. Methods : Transplanting donor BMSC were prepared by primary cell culture from transgenic mouse expressing luciferase (LUC). Transient focal infarcts were induced in 4-6-week-old male nude mice. The experiment mice were divided into five groups by the time of MSC transplantation : 1) sham-operation group, 2) 2-h group, 3) 1-day group, 4) 3-day group, and 5) 1-week group. BLI for detection of spatial distribution of transplanted MSC was performed by detecting emitted photons. Migration of the transplanted cells to the infarcted area was confirmed by histological examinations. Differences between groups were evaluated by paired t-test. Results : A focal spot of bioluminescence was observed at the injection site on the next day after transplantation by Signal intensity of bioluminescence. After 4 weeks, the mean signal intensities of 2-h, 1-day, 3-day, and 1-week group were $2.6{\times}10^7{\pm}7.4{\times}10^6$. $6.1{\times}10^6{\pm}1.2{\times}10^6$, $1.7{\times}10^6{\pm}4.4{\times}10^5$, and $8.9{\times}10^6{\pm}9.5{\times}10^5$, respectively. The 2-h group showed significantly higher signal intensity (p<0.01). The engrafted BMSC showed around the infarct border zones on immunohistochemical examination. The counts of LUC-positive cells revealed the highest number in the 2-h group, in agreement with the results of BLI experiments (p<0.01). Conclusion : In this study, the results suggested that the transplanted BMSC migrated to the infarct border zone in BLI study and the higher signal intensity of LUC-positive cells seen in 2 hrs after MSC transplantation in MCAO mouse model. In addition, noninvasive imaging in real time is an ideal method for tracking stem cell transplantation. This method can be widely applied to various research fields of cell transplantation therapy.
Background: 20(S)-protopanaxadiol (PPD), a ginsenoside metabolite, has prominent benefits for the central nervous system, especially in improving learning and memory. However, its transcriptional targets in brain tissue remain unknown. Methods: In this study, we first used mass spectrometry-based drug affinity responsive target stability (DARTS) to identify the potential proteins of ginsenosides and intersected them with the transcription factor library. Second, the transcription factor PURA was confirmed as a target of PPD by biolayer interferometry (BLI) and molecular docking. Next, the effect of PPD on the transcriptional levels of target genes of PURA in brain tissues was determined by qRT-PCR. Finally, bioinformatics analysis was used to analyze the potential biological features of these target proteins. Results: The results showed three overlapping transcription factors between the proteomics of DARTS and transcription factor library. BLI analysis further showed that PPD had a higher direct interaction with PURA than parent ginsenosides. Subsequently, BLI kinetic analysis, molecular docking, and mutations in key amino acids of PURA indicated that PPD specifically bound to PURA. The results of qRT-PCR showed that PPD could increase the transcription levels of PURA target genes in brain. Finally, bioinformatics analysis showed that these target proteins were involved in learning and memory function. Conclusion: The above-mentioned findings indicate that PURA is a transcription target of PPD in brain, and PPD upregulate the transcription levels of target genes related to cognitive dysfunction by binding PURA, which could provide a chemical and biological basis for the study of treating cognitive impairment by targeting PURA.
출산율 제고에 대한 정책적 고민은 OECD국가들의 공통된 관심사일 뿐 아니라 세계 최하위인 출산율을 기록하고 있는 한국의 최대 관심사이기도 하다. 많은 국가 예산을 투입해왔고 출산율 관련 여러 연구들이 진행되어 왔음에도 불구하고 한국의 출산율은 계속 감소 추세이다. 따라서 본 연구는 기존 출산율 연구에서 다루어져 왔던 출산율에 영향을 주는 세부적 요인들의 영향력 및 효과성 검증과 유럽 선진국가들의 사례를 통한 정책적 접근의 문제점을 인지하고 출산율과 삶의 질에 관한 거시적이고 구조적 접근을 통해 전체적 흐름을 다시 파악하고자 함에 그 목적이 있다. 즉 선진국의 높은 삶의 질은 출산율을 높이는지, 삶의 질과 출산율이 모두 높은 국가 모델은 어느 나라이며 그 나라의 출산에 대한 사회 및 정책적 흐름은 어떠한지를 살펴보았다. OECD국가들의 삶의 질 요인(BLI)와 CIA출산율 자료를 이용하여 분석한 결과, 삶의 질 수준이 높은 국가 중에도 출산율이 낮은 국가가 많다는 사실을 확인할 수 있었다. 그러나 삶의 질 수준과 출산율이 모두 높은 국가가 한국이 지향해야 할 국가 모델임을 인지하고 본 연구에서 새로 도출된 아이슬란드, 아일랜드, 뉴질랜드의 사례와 삶의 질 수준은 높지만 출산율이 낮은 독일의 사회적 특성을 비교해 본 결과 앞의 세 나라는 양성평등에 대한 인식 수준이 높게 나타났고 그 결과로 성별에 따른 임금 차이는 낮게 나타났음을 확인하였다. 반면에 독일의 경우는 성별에 따른 임금 불평등이 비교적 더 크게, 출산율은 더 낮게 나타남으로써 양성평등을 위한 인식전환이 출산율에 주요한 영향을 미치고 있음을 확인했다. 부모- 자식 간의 '상승관계(synergy)' 에 기초하여 가정 및 노동시장에서 양성평등 의식을 고양하는 것이 정책의 최우선 순위가 되고, 여타의 삶의 질을 높이는 요소를 적극 활용하여야 한다는 결론을 도출하였다. 즉 출산율 정책의 우선순위와 인프라적 지원을 동시에 추진하기 위해 국가의 출산율 목표를 '임신 가용한 여성의 출산율 제고'에서 '국민이 행복한 사회를 만드는 것' 으로 재설정하여 행복한 사회가 되어가는 과정에서 스스로 출산을 결정할 수 있는 시스템을 만들어야 할 것이다.
Applications of LCD panel are getting more increased for motion-image applications. However, when the motion-images are displayed on LCD panels, they may be blurred due to slow response time of liquid crystal (LC). One of the solutions of the problem is overdrive technique. The technique has a lot of memory usage. In this paper, we propose a reduction method of the frame memory that is required for LCD overdrive. Proposed overdrive architecture consists of line-based lifting integer (5, 3) DWT filter for image data reduction and BLI (Bi-Linearly Interpolation) LUT for pixel value accelerating.
In this paper, we proposed a reduced memory overdrive architecture. Proposed overdrive architecture consists of 2D-DWT filter, BLI and Color Conversion block. For Frame Memory reduction we eliminated HH data in DWT-IDWT process and converted color space RGB into YCbCr. Consequently, we reduced Frame Memory about 50%.
The early detection of early gastric cancer (EGC) is important. However, the sensitivity of conventional white light imaging (WLI) in detecting EGC had been reported to range only from 77% to 84%. Although the resolution of endoscopes has been remarkably developed, precancerous lesions such as adenomas and microscopic early cancers are difficult to diagnose with general endoscopy. Linked Color Imaging (LCI) magnifies the differences in color for easy detection. Therefore, it produces a bright image from a distance and is performed for screening endoscopy. The 410 nm wavelength of BLI (Blue Light Imaging) helps to detect cancer by showing microstructure and microvessels in the mucosal superficial layer. This review will focus on the utility of Image enhanced endoscopy (IEE) techniques in diagnosis of gastrointestinal cancer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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