• 제목/요약/키워드: BASTA

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Bioloistic-mediated Transformation of Cotton (Gossypium hirsutum L.): Embryogenic Calli as Explant

  • Haq Ikram-ul;Asad Shaheen;Zafar Yusuf
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제7권4호
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    • pp.211-218
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    • 2005
  • Genetic transformation was carried out by using biolistic gun method. The hypocotyl derived embryogenic calli (explants) of cotton (Gossypium hirsutum L.) cv. Cocker-312 were transformed with a recombinant pGreen II plasmid, in which both, bar (selection marker) and GUS (${\beta}$-glucuronidase) reporter genes were incorporated. Explants were arranged on osmoticum-containing medium (0.5M mannitol) 4 hours prior to and 16 hours after bombardment that was resulted into an increase about >80% for GUS stable expression. 3 days after bombardment, GUS assay was performed, which exhibited, $18.36{\pm}1.00$ calli showed blue spots. The transformed embryogenic calli were cultured on selection medium (@ 6 mg/L basta) for 3 months. The putative transgenic plants were developed via selective somatic embryogenesis (@1.50 mg/L basta); maximum $27.58{\pm}1.25$ somatic embryos were obtained while $17.47{\pm}1.00$ embryos developed into plantlets (@ 0.75mg/L basta). In five independent experiments, up to 7.24% transformation efficiency was recorded. The presence of the transgenes was analyzed by using PCR and southern hybridization analysis. The transgenic plants were developed with in 6-7 months, but mostly transformants were abnormal in morphology.

Petunia hybrida에 Agrobacterium으로 도입된 bar Gene의 발현과 후대검정 (Expression and Inheritance of bar Gene in Petunia hybrida Transformed with Agrobacterium)

  • 하영민;김종철;이상우;이신우;김주현
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제30권2호
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    • pp.143-149
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    • 2003
  • This experiment was carried out to confirm the stability of bar gene introduced into petunia plant through Agrobacerium-mediated transformation. Twenty-five transgenic plants T$_{0}$ plants, back cross (BC$_1$) populations to wild type and F$_1$plants between different T$_{0}$ plants were prepared, and polymerase chain reaction(PCR), PCR-Southern blot analysis, and field test with 0.1% Basta treatment were done. The results of PCR, PCR-Southern blot hybridization, and field test indicated that NPTII and bar gene introduced into the genome of petuina plants were stably transmitted to their progenies, and conferred the plants resistance to herbicide, Basta.sta.

다양한 신경학적 이상을 나타낸 glufosinate ammonium(바스타$^{(R)}$) 급성 경구 중독 1례 (A Case of Acute Glufosinate Ammonium ($BASTA^{(R)}$) Intoxication Associated with Various Neurological Abnormalities)

  • 백진휘;김준식;이현규;박현주;하충건;노형근
    • 대한임상독성학회지
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    • 제3권2호
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    • pp.103-106
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    • 2005
  • BASTA is an herbicide which contains glufosinate ammonium as a main component with an anionic surfactant, polyoxyethylene alkylether sulfate, and nonselectively inhibits glutamine synthetase. It became a wildly used herbicide in Korea and its intoxication is now increasing. A 42-year old woman ingested about 300ml of BASTA in a suicide attempt. She showed unconsciousness and respiratory distress in the beginning, and later developed multiple generalized convulsions, low blood pressure, fever and diabetes insipidus. Although she became alert 12 days after the ingestion, she showed retrograde amnesia for a period of about recent 10 years. A neuropsychological test on day 22 revealed frontal lobe dysfunction, visual memory disturbance and slight decrease in visuospatial function. All these neurological abnormalities that might occur due to glufosinate ammonium were almost improved in the follow-up test performed a month later.

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Herbicide Resistant Turfgrass(Zoysia japonica cv. 'Zenith') Plants by Particle bombardment-mediated Transformation

  • Lim Sun-Hyung;Kang Byung-Chorl;Shin Hong-Kyun
    • 아시안잔디학회지
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    • 제18권4호
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    • pp.211-219
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    • 2004
  • Transgenic zoysiagrass (Zoysia japonica cv. Zenith) plants have been obtained by particle bombardment of embryogenic callus with the plasmid pSMABuba, which contains hygromycin resistance (hpt) and bialaphos resistance (bar) genes. Parameters on DNA delivery efficiency of the particle bombardment were partially optimized using transient expression assay of a chimeric $\beta-glucuronidase$(gusA) gene driven by the CaMV 35S promoter. Stably transfarmed zoysiagrass plants were recovered with a selection scheme using hygromycin. Transgenic zoysiagrass plants were confirmed by PCR analysis with specific primer for bar gene. Expression of the transgene in transformed zoysiagrass plants was demonstrated by Reverse transcriptase (RT)-PCR analysis. All the tested transgenic plants showed herbicide BastaR resistance at the field application rate of $0.1\%-0.3\%$.

넙치의 초기 생활사에 미치는 해양 독성물질들의 급성독성 영향 (The effect of acute toxicity of marine toxicants on early life of coastal olive flounder)

  • 탁건태;김중균
    • 생명과학회지
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    • 제10권3호
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    • pp.247-253
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    • 2000
  • 넙치의 초기생활사에 있어서의 해양 오염물질의 급성독성을 알아보았는데, 수정란 및 부화 직후의 넙치 자어에 미치는 급성독성 영향은 Aroclor 1254> 제초제 바스타액>HgCl2>CdCl2 순이었으며, 수정 란보다는 자어에 대한 영향이 더 크게 나타났다. 이때, 넙치 수정란에 독성물질을 처리하였을 때의 부화 율은 처리 농도에 의존적인 경향을 나타내었으며, 높은 처리 농도에서 부화하여 기형으로 발생한 개체 는 곧 죽었고, 난황 흡수율도 독성 물질의 처리 농도가 높을수록 낮은 경향을 보였다. Aroclor 1254, 바 스타액, HgCl2 및 CdCl2의 72시간 반수치사농도는 넙치 수정란에 대하여 각각 15.5 ng/L, 21 nL/L, 17 $\mu\textrm{g}$/L 및 29 $\mu\textrm{g}$/L이었으며, 부화 직후의 자어에 대해서는 각각 3.5 ng/L, 16.0 nL/L, 10.5 $\mu\textrm{g}$/L 및 15.0 $\mu\textrm{g}$/L 이었다. 일반적으로 알려진 해양오염물질의 반수치사농도는 어패류의 성체를 대상으로 조사한 경 우가 많은데, 실제 해양 환경에 있어서는 수산생물의 초기 생활사에 미치는 해양 독성물질의 영향을 조 사하여 해양 독성물질의 규제 농도를 정해야 할 것이다.

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Phosphinothricin acetyltransferase 유전자를 이용한 현사시의 형질전환 (Transformation of Populus alba $\times$Populus glandulosa Using Phosphinothricin Acetyltransferase Gene)

  • 오경은;양덕춘;문흥규;박재인
    • 식물조직배양학회지
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    • 제26권3호
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    • pp.163-169
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    • 1999
  • 우리나라의 주요 개량 포플러의 하나인 현사시 3호를 대상으로 Arobacterium tumefaciens MP 90/PAT을 이용하여 비선택성 제초제인 Basta에 내성을 갖는 형질전환체를 획득하고자 본 실험을 수행하였다. 기내 배양된 엽절편을 재료로 균주에 10분간 감염, 2일간 공조 배양 및 3주간 선발배지에서 배양으로 kanamycin에 내성을 갖는 잠정적인 형질전환 캘러스를 유도하였다. 선발된 캘러스로부터 배양 4주 후 줄기를 유도하였으며, 증식된 줄기는 발근시켜 완전한 형질전환체를 얻었다. 형질전환체는 PCR기법 및 Southern blot 분석으로 PAT 유전자 전이를 확인하고. 유전자의 발현은 GUS 유전자의 발색 반응으로 확인하였다. 형질전환체는 폿트로 이식하여 4주간 생장시킨 후 제초제 Basta로 살포한 결과 대조구 식물체는 고사되었으나, 형질전환체는 정상적인 생육이 가능하였다

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Phosphinothricin Acetyltransferase 유전자 도입에 의한 제초제 저항성 감자의 선발 (Selection of Herbicide Resistant Potatoes Transformed with Phosphinothricin Acetyltransferase Gene)

  • 한성수;정재훈;방극수;양덕춘
    • 한국잡초학회지
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    • 제17권4호
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    • pp.390-399
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    • 1997
  • 비선택성 제초제 Bialaphos(basta)에 저항성인 PAT gene을 감자(Solanum tuberosum. cv. Desiree)에 도입하고자 본 실험을 실시하였다. 잎과 줄기절편을 이용한 신초재분화의 최적조건은 MS배지에 IBA 0.1mg/L+BA 0.5mg/L 조합처리하였을 때 가장 양호하였으며 재분화율은 잎은 54%, 줄기는 46%이었다. 이 조건에서 감자의 잎과 줄기 절편을 GUS : NPTII gene과 PAT gene을 가진 binary vector를 함유한 A. tumefaciens MP90에 공동배양하였다. 공동 배양시 acetosyringone 100${\mu}M$을 첨가할 경우 형질전환율이 잎의 경우 19%, 줄기의 경우 10%로 무처리보다 공히 약 4배가량 높았다. Kanamycin 100mg/L에서 캘러스가 형성된 후 이로부터 재생된 식물체를 약 6주후 Basta 10mg/L를 포함한 재분화배지에 옮겼을 경우 모두 생존하였다. 선발된 식물체의 형질전환여부를 조사하기 위해서 PCR, GUS반응 및 Southern blot를 실시한 결과 형질 전환체에 도입된 유전자가 안정되게 삽입되어 발현됨을 확인하였다. 확인된 형질전환체는 포장에 이식하여 순화시켰으며, 4주 후 제초제를 살포한 결과 대조구로 사용한 감자는 모두 고사되었으나, 형질전환체는 정상적인 생육을 보였다. 따라서 본 실험결과 PAT 유전자를 감자 식물체에 도입하여 감자 genome내에 안정되게 삽입되어 발현되는 제초제 저항성 감자를 선발할 수 있었다.

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먹물버섯 Coprinellus congregatus에서 분열자를 사용한 형질전환 (Genetic Transformation of a Mushroom Forming Fungus Coprinellus congregatus to an Antibiotic Resistance Using Oidia Instead of Protoplast Generation)

  • 박남미;김동식;최형태
    • 미생물학회지
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    • 제42권1호
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    • pp.59-61
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    • 2006
  • 먹물버섯의 하나인 Coprinellus congregatus를 대상으로 유전자의 도입을 위한 형질전환실험에서 원형질체를 생성하지 않고 분열자 (oidium)를 사용하는 방법을 확립하였다. 분열자는 20일 이상된 CKMM 한천배지에서 생성되며, 이를 밤샘배양으로 발아를 촉진시킨 상태에서 전기천공방법으로 항생물질 basta에 대한 형질전환을 수행한 결과 10-20 형질전환체/${\mu}g$ DNA의 수율로 형질전환체를 확보할 수 있었다. 이 형질전환체들은 도입된 벡터가 염색체 상에 삽입되어 유전적으로 안정된 상태를 유지하였다.