This study was carried out to immunologically characterize Bacillus thuringiensis (B.t) antigens. Protein patterns of ultrasonicated- antigens of B. thuringiensis subspecies using SDS- PAGE revealed marked similarities among all the strains analyzed except for the difference between quantative variations of bands and some protein antigens. The comparison of the protein patterns showed that the protein antigen of 45 kilodalton (kd) was common in 11 strains and that the difference between B. thuringiensis subsp. canadensis and galleriae was noticed in quantative variations of bands despite of ambiguous serogrouping, suggesting a useful method for identification. All strains examined showed similar antigenic patterns in SDS-PAGE, while immunodominant bands differed in antigenic reactivity in western blot using polyclonal antibodies. Polyclonal antibody to B. thuringiensis subsp. thuringiensis and israelensis in indirect immunofluorescence assay reacted with flagella and cell surface antigens. The present study indicates that SDS-PAGE and western blot analysis may be used as tools for differentiation and identification of B. thuringiensis subspecies.
Thirteen subspecies of Bacillus thuringiensis including B. t. israelensis, B. t. morrisoni PG-14 and B.t. darmstadoemsos known to be toxic to dipteran insects were treated on the mushroom (Flammulina velutipes) compost to estimate the biological control effect of a sciarid fly, Lycoriella sp. According to the results, it was found that there were no significant effects of the tested strains of B, thuringiensis on the control of Lycoriella sp. For further confirmation, larval gut juice of Lycoriella sp. and trypsin were respectively treated into the parasporal crystal proteins of three subspecies of B. t. israelensis, B. t. morrisoni PG-14, and B. t. darmstadiensis. The proteins were separated by SDS-PAGE. According to the results, the major parasporal crystal proteins were respectively produced by B. t. morrisoni as the amount of 52 kd, B. y. israelensis as 37kd and B. t. darmstadiensis as 39kd, but the activity of these proteins could not be unfortunately confirmed in this study.
Kim, Soo-Young;Kang, Min-Ho;Choi, Hee-Baeg;Lee, Jee-Un;Charles, Jean Francois;Dumanoir, Veronique Cosmao;Lecadet, Marguerite M.;Lee, Hyung-Hoan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권5호
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pp.534-540
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1999
Thirty-seven strains of Bacillus thuringiensis were isolated from Korean soil and examined for H-antigen serotyping, toxicity, and different spectra of biological activities. The isolate HL-175 bore a specific H-antigen, different from the 51 known serotypes, a spherical $\delta$-endotoxin crystal, and minor different biochemical characteristics. It was resistant to ampicillin, colistin, and penicillin G. Therefore, it was classified as a new serotype, H52, with the name kim. The other 36 isolates also produced endotoxin crystals and endospores. The crystal shape of eight strains was cuboidal while the others were bipyramidal. Biochemical characteristics of the isolates were only slightly different from the known serotypes of B. thuringiensis. The flagellar (H) antigens of the 36 isolates were identified as: one colmeri (H21), three galleriae (H5a,5b); two pakistani (H13); one toumanoffi (H11a, 11b); and twenty-nine kurstaki (H3a,3b). All 36 isolates were resistant to ampicillin, colistin, penicillin, cephalothin, and chloramphenicol.
뽕나무하늘소(Apriona germari) 및 왕똥풍뎅이 (Aphodius apicalis) 사충으로부터 4종의 Bacillus thuringiensis를 분리하였다. B. thuringiensis의 편모 항원에 의한 동정 결과, 4종의 분리된 B. thuringiensis 중에서 1종은 darmstadiensis 아종으로 판명되었으나, 나머지 3종은 33종의 어느 B. thuringiensis 편모 항체와도 반응하지 않았다. 분리된 균주의 포자와 내독소 단백질 혼합물을 이용하여 뽕나무하늘소와 왕똥풍뎅이, 누에(Bombyx mori) 및 빨간집모가(Cules pipiens pallens) 유충에 대하여 생물검정한 결과, 이들 분리주들은 검정된 곤충에 대하여 독성을 갖지 않는 것으로 나타났다. 아울러 SDS-PAGE와 agarose gel electrophoresis를 이용하여 분리된 4종의 B. thuringiensis의 내독소 단백질과 plasmid DNA 패턴을 조사한 결과, darmstadiensis와 이미 보고된 20종의 무독성 B. thuringiensis와 차이를 보여 새로운 무독성 균주로 사료된다.
다양한 생물적 스트레스로부터 경제적으로 중요한 식물을 보호하기 위한 친환경 biocontrol agents (BCAs)는 오늘날 농업 및 생태 분야에서 다양하게 사용되고 있다. 다양한 BCAs 중에서, 많은 그람 양성Bacillus 속 아종이 친환경 생물학적 살충제 및 비료로서 성공적으로 산업화되었다. 이 연구에서 우리는 식물병원성 균류의 균사생장에 길항 효과를 보여주는 BCAs 중 하나인 Bacillus thuringiensis C25가 흰날개무늬병을 일으키는Rosellinia necatrix에 대한 길항작용이 있음을 확인하였다. 주사전자현미경을 통해B. thuringiensis C25가R. necatrix의 균사 세포벽을 분해하여 균사생장을 억제하는 것을 확인하였다. B. thuringiensis C25의 전장 유전체에서 5,683 유전자 세트의 서열을 동정하였고, 잠재적으로 곰팡이 세포벽 분해 효소 (CWDE)를 암호화하는 유전자 세트를 선발하였다. R. necatrix에 대한 균사성장 억제효과는B. thuringiensis C25의 균사 세포벽 분해 유전자의 전사 활성과 높은 상관 관계가 있었다. 상세하게는, B. thuringiensis C25에서ChiA, B 및 Glycos_transf_2 유전자를 포함하는 CWDE의 전사체 수준은R. necatrix와의 공동 배양에 의해 향상되었다. 결론적으로, 본 연구에서는 B. thuringiensis C25가 R. necatrix를 제어할 수 있는 생물학적 소재가 될 수 있으며, 식물 병원체에 대한 BCA의 항진균성 메커니즘의 이해를 촉진할 수 있음을 제시하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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