International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제4권2호
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pp.127-131
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2002
The qualitative and quantitative changes of bacterial flora associated with the Pure Mysore (Multivoltine) and NB$_4$D$_2$ (Bivoltine) silkworm (Bombyx modi L.) midgut during third, fourth and fifth instars were studied. Larvae reared on mulberry leaves were dissected and their midgut bacterial populations were enumerated through serial dilution technique and after 72 hrs of incubation period at 28 $\pm$ 1$^{\circ}C$, the bacterial population was estimated. The results showed a highest mean value of 15$\times$10/ sup 6/ sup 6/ CFU/g and 28$\times$10/ sup 6/ CFU/g in Pure Mysore and NB$_4$D$_2$races, respectively, in midgut tissue of fifth instar larvae. The natural epiphytic microflora of mulberry leaves fed during the respective instars was also studied and found maximum 14$\times$10$^3$ CFU/g in leaves fed in third instars, followed by 5.3$\times$10$^3$ CFU/g and 2.1$\times$10$^3$ CFU/g in leaves fed during fourth and fifth instars, respectively. The bacterial flora colonized in midgut was found to be elaborating amylase, caseinase, gelatinase, lipase and urease enzymes. The highest percentages of isolates were amylase producers followed by protein and lipid splitters in Pure Mysore, whereas in NB$_4$D$_2$ protein splitter were dominated followed by lipase and amylase producers in NB$_4$D$_2$. The results indicate that the natural microflora may play a vital role in the digestion of ingested food materials in silkworms.
1. 경과습성 1) 수원지방에 있어서 뽕나무 순집이혹파리(Diplosis mori Yokoyama)는 5세대를 마친다. 제 1세대는 6월 하순경 제 2세대는 9월 하순경에 출현한다. 2) 성충은 오후 7~8시경에 출현하며 그 수명은 2~5일이며 ♀(자)가 ♂(웅)보다 약간 긴 듯하다. 3) 유충은 제 2~제 3 탁엽 AB 내면과 제 2~제 3 미개엽 이면에 기생한다. 따라서 생장점 부근에 피해를 준다. 4) 변태별 기간은 기상조건에 따라서 차가 심하며 특히 용은 한발시는 우화하지 못한다. 5) 유충부화시는 유백색이지만 등홍색으로 변하여 고숙하며 고숙유충은 15~20cm의 도요능력을 가지고 토중 15~30cm에 잠입화용한다. 그 크기는 0.3mm로부터 2.0mm 내외까지 발육한다. 6) 용기간은 하계는 7~8일 내외이며 조잡한 견에 쌓여있다. 7) 월동상태는 원칙적으로 용태월동을 하나 때에 따라서 유충월동도 있다. 2. 방제법 1) B.H.C. 분제 토양살포는 고숙유충이 입토 4~5일 후나 우화하기 전에 반당 2%액 400~600$\ell$(20~30두) 이상을 시용함이 효과적이라고 생각된다. 2) 매몰시험에 있어서는 심도 5cm 이상이면 성충우화를 방지할 수 있다고 인정된다.
곤충 유전자를 이용한 항세균성 펩타이드 생산 및 응용에 관한 기초 연구로서 비병원성 세균(Escherichia coli K12)으로 면역 반응을 유도한 누에로부터 발현량이 증가하는 유전자 중 Hyalophora cecropia의 attacin과 cDNA 상동성을 나타내는 BmInc6 클론을 분리하고 그 특성을 조사하였다. BmInc6 cDNA의 전체염기서열을 분석한 결과 그 크기는 852 bp이고, 35번째 염기에서 변역이 개시되어 679 bp 위치에서 종결되는 open reading frame을 가지며 812번째 위치에 잠정 전사 종결 신호의 존재가 확인되었다(GenBank, AF005384). BmInc6에 의해 coding되는 아미노산은 214개이며, hydropathy 분석 결과 친수성을 나타내는 단백질이었다. 그리고 BmInc6 유전자에 의해 연역되는 펩타이드를 nuecin으로 명명하였다. Nuecin 유전자를 baculovirus 발현 백터계를 이용하여 곤충세포주에서 발현시킨 결과 전사체의 크기는 약 950 bp였고, 세포내 벌현 펩타이드의 분자량은 약 23 kDa이었다. 세포내에서 발현된 nuecin 전구체로 추정되는 23 kDa 펩타이드는 세포외로 분비되는 과정에서 약 3 kDa의 signal 펩타이드가 제거됨으로서 약 20 kDa의 성숙 nuecin으로 된다는 사실을 단백질 전기영동상으로 확인하였다. Nuecin 단백질의 항세균 활성을 수종의 그람 음성 및 양성 세균에 대해 검정한 결과, 특히 E. coli와 Bacillus subtilis에 높은 활성을 나타내었으며, attacin이 한정된 그람 음성 세균에만 항세균 활성을 나타내는데 비해 nuecin은 그람 음성은 물론 그람 양성에도 항세균 활성을 나타내어, 보다 넓은 항세균 스펙트럼을 가지는 것을 알 수 있었다.
누에 핵다각체병 바이러스의 gp64 프로모터를 이용한 transient 발현 벡터를 제작하기 위해서 gp64 유전자의 구조를 분석하였다. Southern blotting 분석을 통해 genome DNA에서 gp64 유전자를 탐색하기 gp64 구조유전자를 포함하는 2,277 nucleotide의 염기를 분석하였으며 gp64의 early, late 프로모터 발현을 조절하는 인자들을 확인하였다. gp64프로모터를 이용한 transient 발현 벡터를 제작하고 외래유전자로써 lacZ 유전자를 Bm5 세포주에서 transient 발현시켰다. 세포주 내에 도입된 플라스미드 DNA의 안정성을 확인하였으며, gp64 프로모터의 외래유전자 발현성 여부를 조사하기 위하여 gp64 프로모터 하에 laxZ 유전자를 가지는 재조합 바이러스를 제작하고 $\beta$-galactosidase in 냐셔 staining을 수행한 결과 전체적인 발현량은 매우 약한 것으로 판단되었다. BmNPV-K1의 gp64 프로모터를 이용한 벡터는 더욱 민감한 표지 유전자를 발현시켜 재조합 바이러스의 분리에 이용하거나 숙주세포에 독성을 보이는 유전자 산물의 소량 발현에 더욱 유용할 것으로 판단된다.
Simple sequence repeats (SSRs) and interSSR (ISSR) marker systems were used in this study to reveal genetic changes induced by artificial selection for short/long larval duration in the tropical strain Nistari of the silkworm Bombyx mori. Artificial selection separated longer larval duration (LLD) ($29.428{\pm}0.723days$) and shorter larval duration (SLD) ($22.573{\pm}0.839days$) lines from a base, inbred population of Nistari (larval span of $23.143{\pm}0.35days$). SSR polymorphism was observed between the LLD and SLD lines at one microsatellite locus, Bmsat106 ($CA_7$) and at two loci of 1074 bp and 823 bp generated with the ISSR primer UBC873. Each of these loci was present only in the LLD line. The loci segregated in the third generation of selection and were fixed in opposite directions. In the $F_2$ generation of the $LLD{\times}SLD$ lines, the alleles of Bmsat106 and $UBC873_{1074bp}$ segregated in a 1:1 ratio and the loci were present only in the LLD individuals. $UBC873_{823bp}$ was homozygous. Single factor ANOVA showed a significant association between the segregating loci and longer larval duration. Together, the two alleles contributed to an 18% increase in larval duration. The nucleotide sequences of the $UBC873_{1074bp}$ and $UBC873_{823bp}$ loci had 67% A/T content and consisted of direct, reverse, complementary and palindromic repeats. The repeats appeared to be "nested" (59%) in larger repeats or as clustered elements adjacent to other repeats. Of 203 microsatellites identified, dinucleotides (67.8%) predominated and were rich in A/T and T/A motifs. The sequences of the $UBC873_{1074bp}$ and $UBC873_{823bp}$ loci showed similarity (E = 0.0) to contigs located in Scaffold 010774 and Scaffold 000139, respectively, of the B. mori genome. BLASTN analysis of the $UBC873_{1074bp}$ sequence showed significant homology of (nt.) 45-122 with upstream region of three exons from Bombyx. The complete sequence of this locus showed ~49% nucleotide conservation with transposon 412 of Drosophila melanogaster and the Ikirara insertions of Anopheles gambiae. The A + T richness and lack of coding potential of these small loci, and their absence in the SLD line, reflect the active process of genetic change associated with the switch to short larval duration as an adaptation to the tropics.
최근 잠상산물 추출물인 BF-7이 기억력과 학습력 개선에 크게 유용하다는 연구결과들이 보고되고 있다. 이를 바탕으로 본 연구는 과연 이 BF-7이 일반적인 학생들의 학습력 및 인지력 개선을 유도하는지 여부를 재확인하고자 하였다. 본 연구결과 3주 동안의 BF-7 복용(매일 400mg)으로, 평균 IQ 10 이상의 증가를 보였다. 이의 의학적 검증을 위하여, SPECT를 이용하여 두뇌의 인지기능과 학습력 등을 담당하는 부위의 혈류량 개선을 살펴봄으로써 이런 개선효과를 확인하고자 하였다. 그 결과 parahippocampal gyrus 와 medial temporal area부위 즉 학습 관련한 두뇌부위의 혈류량과 글루코오스 사용량이 증가하는 것으로 나타났다. 따라서 BF-7의 복용은 효과적으로 두뇌의 활성을 유도하여, 인지기능과 기억력, 학습력 증진 효과를 갖는 것으로 나타났다.
Objectives : The purpose of this study is to observe the effects of Mori Ramulus herbal-acupuncture solution(MR-HAS) on arthritis of mice induced by Collagen II at Joksamni(ST36). Methods : The author performed several experimental items. First, it is the cell survival rate of mice lung fibroblasts. Second, it is the incidence rate of arthritis and arthritis index of CIA. Third, it is the levels of IL-6, $TNF-{\alpha}$, $IFN-{\gamma}$, $IL-1{\beta}$, IgG, IgM and anti-collagen II in serum and the level of $IFN-{\gamma}$, $IFN-{\gamma}/IL-4$ ratio in CIA mouse spleen cell culture. Fourth, it is histological analysis of the mice joint. Fifth, it is expression ratio of CD3e+ to CD19+ cell, CD4+ to CD8+ cell, CD69+/CD3e+ cells, CD11a+/CD19+ cells and CD11b+/Gr-l+ cells and CD4+/CD25+ cells. Results : 1. In the MR-HA, the incidence of arthritis and the arthritis index were significantly decreased. 2. In MR-HA, the levels of IL-6, $IFN-{\gamma}$, $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, IgG, IgM and anti-collagen II in serum of CIA mice and the level of $IFN-{\gamma}$, IL-4, $IFN-{\gamma}$, IL-4 ratio in CIA mouse spleen cell culture were significantly decreased. 3. In histology, the cartilage destruction and synovial cell proliferation were decreased in the MR-HA, and the collagen fiber expressions in the MR-HA were similar with that of the Normal group. 4. In the MR-HA, the expression ratio of CD3e+ to CD19+ cell and CD4+ to CD8+ cell were similarly maintained as Normal group in lymph nodes, and CD69+/CD3e+ cells and CD11a+/CD19+ cells were decreased in lymph nodes, and CD11b+/Gr-1+ cells and CD4+/CD25+ cells were decreased in synovium. Conclusion : These results suggest that MR-HA at ST36 has an effect to control synovial cell proliferation and cartilage destruction in rheumatoid arthritis, as well as prophylaxis is important to treat rheumatoid arthritis in clinic.
집누에는 지리적인 특징에 의해 중국종, 일본종, 유럽종, 열대종 및 한국종으로 분류된다. 한국종계통은 품종수도 적을 뿐만 아니라 관련 연구도 미미한 실정이다. 본 연구는 한국재래종으로 추측되는 품종들을 국내 · 외로부터 수집하여 등위효소 및 체액단백질유전자와 RAPD다형분석을 실시하여 한국재래종 계통의 품종적 유연관계와 계통특성을 밝히고자 하였다. 1. 등위효소유전자의 분석결과, 몇 개의 유전자군에서 한국재래종과 타 지역종간에 유전자형 및 유전자 빈도의 차이가 명확히 나타났다. 2. RAPSD의 결과를 UPGMA법에 의해 분석한 결과, 짐누에군과 멧누에군으로 크게 구분되었으며 유전적 유사계수 0.6930을 기준으로 한국재래종, 일본종 및 중국종으로 그룹화되었다. 3. 이상의 결과를 종합하면, 한국재래종 누에계통은 하나의 지역종 원종계통으로 분류될 수 있는 명확한 유전적 특성을 가지는 것은 물론 한국종의 계통특성도 뚜렷한 것으로 확인되었다.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제3권1호
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pp.69-73
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2001
The effect of topical application 100,300 and 500 $\mu$g/ ml with Mineral Salts of magnesium sulphate and potassium nitrate on economic parameters was ana- lyzed following treatment of last larval stadium. The treated larvae showed significantly decreased larval weight and silk gland weight in all the treated groups along with other decreased Iarval, cocoon and adult parameters. The female cocoon weight was significantly decreased in all the treated groups with decreased female cocoon shell weight and male cocoon weight at 300 and 500$\mu$g/ml respectively. The length and weight of filament was significantly decreased at 300 and 500 $\mu$g/ml respectively and denier at 500 $\mu$g/ ml. The fecundity decreased significantly in 300 and 500 $\mu$g/ml treated groups when compared with the corresponding parameters of the carrier control.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제3권1호
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pp.93-96
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2001
The effect of supplementation with potassium nitrate on biochemical constituents was analyzed following treatment of last larval stadium. The fat body glycogen and haemolymph trehalosre significantly increased in all the treated groups. The fat body and haemolymph protein also increased significantly in all the treated groups except 500 ${\mu}g$/ml where increased fat body protein and decreased haemolymph protein were not significant. The total lipids, phospholipids and neutral lipids of the fat body increased significantly in all the groups except 50 and 300 ${\mu}g$/ml where the fat body phospholipids increased but the increase was not significant. However the total lipids, phospholipids and neutral lipids are significantly decreased in 500 ${\mu}g$/ml treated group when compared with that of the carrier control.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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