B. natto, B. subtilis이 두 가지 균주를 단독 또는 혼합균주로 발효시킨 청국장의 일반성분 및 효소활성을 조사하여 아미노태 질소량이나 수용성단백질 함량, 효소활성능이 높게 나타난 발효조건의 청국장 건조시킨 뒤 일정한 입자크기로 선별한 분말에 대해 수분함량과 유지의 종류와 양을 달리하여 제조한 청국장 spread의 점도, 퍼짐성, 색도변화 등을 조사하였다. 청국장 spread의 수분함량이 증가함에 따라 전체적으로 점도는 감소하였고, 퍼짐성은 향상되었으며, 색도 중 L값이 증가하였다. 유지를 첨가하여 spread를 제조했을 때에는 수분첨가시와 반대로 점도가 증가하여 퍼짐성이 감소하였으며, 색도 중 L값도 감소하였는데, 특히 콩기름보다 팜올레인유 첨가시 점도가 더 크게 증가하였다. 청국장 spread의 온도가 증가할수록 점도는 감소하여 퍼짐성은 향상되는 것으로 나타났으며, 동일온도에서 청국장 Spread 점도는 B. natto 혼합균주, B. subtilis를 접종한 순으로 증가하였다.
Some of the physiological properties of Sp816 bacteriophage of Bacillus subtilis SNU816 were characterized. It could form plaques on either B. subtilis SNU816 or B. natto 8102, but not on any other bacillus strains investrgated. Its plaque morphology was circular with a diameter of less than 1.0mm and had a narrow halo surrounding the clear center. Its latent period was 34-36 min and had a burst size of 547. It was most stable at pH 6.0, and rapidly inactivated at $60^{\circ}C$ with a initial deaty rate of -0.216 $min^{-1}$. Host range, thermal inactivation rate at $60^{\circ}C$, pH stability, and UV sensitivity revealed that SP816 was quite different from any other phages investigated together but seemed to be rather related to B. natto phages.
세균액화형의 ${\alpha}-amylase$의 공업적 생산의 효율성을 높이기 위한 연구의 일환으로 제분공장과 도정공장의 분산물인 밀기울과 쌀겨를 이용하여 배양배지를 조성하고 B. subtilus와 A. oryzae 및 B. natto를 배양한 후 액화형 ${\alpha}-amylase$의 활성을 조사한 결과 B. subtilus와 A. oryzae의 경우 순수배지와 비교하였을 때 큰 차이가 없었으나 B. natto의 경우 외밀기울에서 액화활성이 다른 대구조에 비하여 크게 나타났는데 순수 배지를 이용한 액화활성은 crude enzyme에서 27.3 unit/ ml이고, 최종 액화 활성은 1,255.8u / ml인데 반해 외밀기울을 이용한 액화 활성은 crude enzyme에서 256.0 unit/ ml이고, 최종 액화 활성은 10,700 unit 이었으며 최적 배양온도는 $37^{\circ}C$이며 최적 배양액 pH는 6.8이었다. 그리고 정제된 효소의 분자량은 34,000dalton이었다. 이상의 결과로 보아 밀거울이 ${\alpha}-amylase$의 공업적 생산을 위한 저렴한 기질로 사용될만한 가치가 있다고 사료된다.
콩알메주 model system에 4종의 Bacillus 균주를 접종하여 45시간 발효시킨 후 메주의 일반성분, 효소활성, 향기성분 등을 분석하고 제조된 메주로 청국장, 된장, 간장을 제조하여 제품의 관능을 평가하였다. 발효메주의 pH는 $7.98{\sim}8.68$ 이었으며 아미노태질소는 $286{\sim}439$ mg%, 암모니아태질소는 $0.11{\sim}0.23%$, 환원당은 $0.65{\sim}2.24%$ 그리고 유리지방산은 $0.33{\sim}1.10%$의 수준이었다. 단백질과 당의 분해율은 B. subtilis구간에서 높았으며 암모니아태질소와 유리지방산의 생성율은 B. natto 구간에서 높게 조사되었다. 효소활성은 시간에 따라 증가하였다가 발효 40시간대부터 정체되는 양상이었으며 B. subtilis구간의 효소활성이 높았다. 각 실험구간별로 유리당 5종, 지방산 5종, 유기산 6종을 검출하였으며 당에서는 stachyose와 raffinose 함량이 많았고 유기산은 각 균주별로 특징적인 구성비를 보였으며 아미노산과 지방산은 보고된 실험결과들과 유사하였다. 향기성분은 총 81종이 검출되었으며 pyrazine류와 3-methyl-1-butanol, benzaldehyde등이 Bacillus 메주의 공통적인 향기성분으로 분석되었다. 각 메주를 혼합하여 제조한 장류제품의 관능평가를 실시한 결과 청국장은 B. natto와 B. licheniformis를 혼합한 구간이, 된장에서는 B. megaterium과 B. subtilis의 혼합구간이, 간장에서는 B. megaterium과 A. oryzae의 혼합구간이 양호한 평가를 받아 각 제품별로 적정한 균주를 사용할 필요성이 있음을 알 수 있었다.
To evaluate the hypolipidemic effects of Cheonggukjang (CGJ), which is frequently used in Korea similar to Natto in Japan and Douchi in China like a dairy product, boiled soybeans were fermented with two Bacillus strains, B. subtilis and B. licheniforms, isolated from rice straw and their antihyperlipidemic effects of their products were investigated. Treatment with the CGJs significantly reduced blood triglyceride (TG) and total cholesterol (TC) levels and increased HDL cholesterol levels in Triton WR-1339-induced hyperlipidemic mice. The treatment of non-fermented soybeans alone also reduced blood TG and TC levels, but not significantly. Feeding the CGJs significantly lowered high blood TG and TC levels as well as body and epididymal mass weights in hyperlipidemic mice induced by the long-term feeding of a high-fat diet that increased blood HDL cholesterol levels. The B. subtilis-fermented CGJ products more potently reduced TG and TC levels, although the differences between the starters were not significant. These finding suggest that CGJ products may be effective as hypolipidemic foods by the synergistic interaction of soy and Bacillus strains.
Kim, Chang-Sup;Han, Nam-Soo;Kweon, Dae-Hyuk;Seo, Jin-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권2호
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pp.230-233
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1999
A plasmid vector was constructed for the expression and secretion of Bacillus macerans cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) in Bacillus subtilis. The vector, pUBACGT, was composed of the ribosome-binding sequence, signal sequence, and cgt gene from B. macerans under the control of amyR2, the promoter of amyE gene coding for $\alpha$-amylase from B. subtilis var. natto. Bacillus subtilis LKS88, a mutant strain lacking genes for an amylase and two proteases, was used as a host for the transformation of the plasmid vector. The transformants were selected on kanamycin-containing Luria-Bertani plates. The starch hydrolyzing activity was observed on the starch-containing plates by the iodine method and cyclodextrin-forming activity was detected in the culture medium. A SDS-PAGE analysis showed that most of the expressed CGTase in the recombinant B. subtilis was secreted into the medium at a high expression level.
The purpose of this study was to compare the effect of solid-state fermentation on soybean using three microbial strains under four different fermentation times. Soybean was fermented for 12, 24, 36 or 48 hours with highly proteolytic microbes, either Bacillus amyloliquefaciens (BA), B. subtilis (BS), or B. subtilis var. natto (BN), and levels of total protein concentration, protein distribution, and antioxidant activity were analyzed. Total protein was highest in the BS 12 h group (9.21 ㎍·µL-1) and lowest in BN 48 h (6.80 ㎍·µL-1), respectively (p < 0.001). Furthermore, three microbes decomposed large molecular weight proteins as well as major allergens of soybean such as β-conglycinin, Gly m Bd 30K, and glycinin. Each treatment group showed the highest degradation rate at 48 h fermentation and among the three microbes, BS showed a relatively higher degradation rate. The radical scavenging ability, known as an indicator of antioxidant activity, showed a significant increase in all treatment groups except BA 24 h. The results from this study suggest that protein concentration, and degradation and antioxidant activity were affected by different types of microbial trains and fermentation period and that B. subtilis fermentation might be the most effective way to increase nutritional and functional properties of soybean.
칡 추출물에 감마선을 조사하여 색상 개선, 항산화성 및 항균성에 미치는 영향을 검토하였다. 칡 추출물은 methanol 과 acetone으로 추출하였으며, 감마선은 10, 20 그리고 30 kGy로 조사하였다. 칡 추출물은 감마선 조사 선량이 증가할수록 명도(Hunter color L-value)가 증가하였으며, 적색도(a값) 와 황색도(b값)은 감소하는 경향을 보여줬다. 칡 추출물의 항산화력(TBARS)은 acetone 추출물보다 methanol 추출물이 더 높았다. 전자 공여능 측정 결과는 methanol 추출의 경우 비조사구와 조사구 모두 비슷한 활성을 보여줬으나 acetone 추출의 경우 감소하는 경향을 보여줬다. 칡 추출물의 용매별 및 감마선 조사 선량에 따른 항균효과는 acetone 추출의 경우, B. subtilis, B, natto, B, megaterium, S, aureus, Sal, typhymurium and E coli.등 모든 균주에 대체적으로 높은 항균 활성을 나타냈으나, methanol 추출의 경우에서는 Sal. typhymurium과 E. coli을 제외하고 항균 활성을 나타내었다. 또한 칡 추출물은 30 kGy까지 감마선을 조사했을 때, 추출물의 생리활성이 감소하는 경향은 나타나지 않았다. 따라서 칡 추출물을 감마선 조사 후, 식품 보존제 및 화장품 원료로서 가능성이 있을 것으로 생각된다.
오미자 추출물을 감마선 조사하여 색택 개선, 항산화성, 항균성에 대하여 실험하였다. 오미자의 추출 방법은 열수추출, ethanol, methanol 그리고 acetone으로 추출하였으며, 감마선 조사는 10, 20 그리고 30 kGy로 하였다. 감마선 조사 선량이 증가할수록 명도(Hunter color L-value)의 경우 비조사구보다 조사구가 월등히 밝은 색을 보였으며, 적색도(a값)와 황색도(b값)는 감소하는 결과를 보여줬다. TBA가 분석 결과는 ethanol로 추출한 경우 가장 높은 항산화력을 확인하였다. 전자 공여능의 측정 결과는 열수 추출한 경우에 비조사구와 조사구 모두 가장 활성이 높았으며 ethanol과 methanol의 경우에는 비조사구와 비슷한 활성을 보여줬다. 오미자 추출 용매별 및 감마선 조사 선량에 따른 항균효과는 B. subtilis, B. natto, B. megaterium, S. aureus, Sal, typhymurium과 E. coli 등 모든 균주에 대해 아주 높은 항균 활성을 나타내었다. 또한 오미자 추출물은 30 kGy까지 감마선을 조사하여도 추출물의 생리 활성에는 영향을 미치지 않았다 따라서 감마선 조사 기술은 천연 식품 보존제 및 화장품 원료로서 사용하기 위한 오미자 추출물의 색택 개선에 활용 가능성이 높을 것으로 기대된다.
유해균인 Bacillus cereus와 독소 생성 곰팡이 증식 억제 능력을 지닌 Bacillus amyloliquefaciens EMD17(EMD17)과 Bacillus subtilis EMD4(EMD4)를 단독 혹은 1:1로 대두에 접종하여 청국장을 제조하였다. 대조구로는 나토균주로 알려진 Bacillus subtilis KACC16450 균을 접종한 청국장을 제조하였다. B. amyloliquefaciens EMD17 접종 청국장에서는 오염시킨 B. cereus 증식이 즉시 억제되어 $37^{\circ}C$ 발효 12시간에 검출되지 않았다. EMD4 접종 청국장에서도 B. cereus 증식 억제가 관찰되었으나 억제 정도는 약했다. 48시간 발효 후 청국장 시료들은 $4^{\circ}C$에서 10일간 저장하였고 B. cereus는 EMD4 접종 청국장에서 검출되지 않았다. 그러나 대조구에서는 상당수 B. cereus 균수가 유지되었다. 청국장의 pH 값은 시료 간 유의차가 없었고 혈전용해능은 발효 중에는 EMD17을 접종한 청국장이 그리고 저장 중에는 나토균주를 접종한 것이 높았다. 총 페놀성 화합물도 나토균주 청국장에서 높았다. 이상 결과들에서 B. amyloliquefaciens EMD17 같은 균주들을 종균으로 사용함으로써 청국장에서 B. cereus 억제가 가능함을 알 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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