Objectives: Spontaneous pregnancy is a rare event after repeated failure of in vitro fertilization (IVF) or Intrauterine insemination (IUI) treatment. So this paper is to report the natural pregnancy of Gamiseogagjihwang-tang treatments on two infertile patients who were repeatedly failed in IVF or IUI. Methods: One patient was a 35-year-old patient diagnosed with the adenomyosis and contralateral tubal obstruction, treated with 90 cc Gamiseogagjihwang-tang two times per day for 6 weeks after second failure of IVF. The other patient was a 34-year-old patient undergone induced abortion by three times, treated with 90 cc Gamiseogagjihwang-tang two times per day for 4 weeks after second failure of IUI. Results: Through taking Gamiseogagjihwang-tang without assisted reproduction techniques, two cases got pregnant naturally. Conclusions: These cases suggest that Gamiseogagjihwang-tang is effective in treating infertile female after failure in IVF or IUI and inducing spontaneous pregnancy. Therefore, there needs to be more trial on infertile patients treated with Seogagjihwang-tang.
Objective : To evaluate the safety and efficacy of selective fetal reduction (SFR) and compare the outcome of twin pregnancy after SFR in multiple pregnancy induced by assisted reproductive technology (ART) with that of natural twin pregnancy. Methods : From September 1995 to March 2002 in Ajou University Hospital, SFR was performed in 79 patients whose gestational sacs were more than 3. Of these 79 patients, 47 patents resulted in twin pregnancy after SFR. SFR was performed using transvaginal intracardiac KCl injection at gestational age of $6{\sim}9$ weeks. Control group was composed of 264 patients with natural twin pregnancy, who delivered after intrauterine pregnancy at 24 weeks, from June 1994 through December 2002. We compared Obstetric and perinatal outcomes between SFR group and natural twin group. Results: Among 47 patients with twin pregnancy after SFR, 2 spontaneous abortion were occurred at intrauterine pregnancy at 8 and 19 weeks. Obstetrical and perinatal outcomes were available in 43 patients. Single intrauterine fetal death was occurred in 1 of 43 (2.3%) patients in SFR group. Incidence of preterm labor, premature rupture of membrane, preeclampsia and placenta previa were similar, but gestational diabetes mellitus (GDM) was occurred more frequently in SFR group (3 (7.0%) vs 4 (1.5%), p=0.02). Mean gestational age, mean birth weight, incidence of discordancy, use of intubation and ventilation, incidence of fetal anomaly, low (<7) Apgar score and intrauterine growth restriction were similar in both groups. Conclusion: Twin pregnancy after SFR has the increased incidence for GDM but other obstetric and perinatal outcome was similar compared with natural twin pregnancy. So SFR is a safe and effective procedure, so we suggest SFR is needed in multifetal pregnancy more than triplet.
Cryopreservation of epididymal spermatozoa offers a potential tool for rescuing genetic material from males of genetically elite populations. Castration, catastrophic injury, sudden death or any other event that makes semen collection or mating impossible may prematurely terminate a stallion reproduction. Stallion epididymal spermatozoa vary widely in the loss of progressive motility, acrosomal integrity, and viability during freezing and thawing. The objective of this work was to investigate the effect of (1) freezing package types on cryopreservation efficiency, (2) thawing temperatures (37, 56 or $70^{\circ}C$) on Computer Assisted Sperm Analysis (CASA) parameters and (3) post-thawing incubation time (0, 1, 2 or 4h) on castrated stallion epididymis. Post-thawed sperm motility ranged between 59.69% and 64.28% ($56^{\circ}C$ and $37^{\circ}C$) in various thawing temperatures. When stallion epididymis sperm was frozen, straw was better than freezing tube on VCL (Velocity of Curvilinear Line) and VAP (Velocity of Average Path) parameter. Higher percentage of motility was observed at $37^{\circ}C$ thawing temperature even though no significant difference was observed among various temperatures. The motility, VCL, ALH (Amplitude of Lateral Head displacement), VAP, BCF (Beat-Cross Frequency) and STR (Straightness index) parameter of post-thawed sperm were significantly decreased by increasing the incubation time for all thawing temperatures. The present study showed that type of freezing package (Straw vs. Freezing tube) was not significantly different on cryopreservation efficiency. Furthermore, stallion epididymal spermatozoa frozen-thawed at $37^{\circ}C$ for 1 min resulted the highest proportion of motility and velocity movement. In addition, motility and viability of frozen-thawed stallion epididymal spermatozoa were also decreased by incubation.
Chung, H. M.;Kim, N. H.;Kim, J. W.;J. M. Lim;Park, C.;J. J. Ko;K. Y. Cha;Kim, J. M.;K. S. Chung
한국가축번식학회지
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제24권2호
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pp.143-154
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2000
본 연구는 생식보조기법을 시행한 불임환자로부터 얻은 난자를 일반적인 수정법과 세포질내 정자직접주입법으로 수정을 유도한 다음 정상수정에 실패한 난자에 대한 미세소관과 염색체의 형태학적 차이를 laser scanning confocal microscope를 이용하여 비교분석하고자 실시하였다. 일반적 수정법 혹은 세포질내 정자직접주입법 실시 후 18시간째에 해부현미경 하에서 난자를 관찰하였을 때 전핵형성에 실패한 미수정란, 한 개의 전핵 또는 3개이상의 전핵의 형성이 관찰된 이상수정란으로 구분하여 연구를 실시하였다. 미세소관의 관찰을 위해서 (-tubulin antibody를 반응시킨 후 형광물질이 부착된 2차항체와 반응시킨 후 관찰하였으며 염색체의 관찰을 위해서는 propidium iodide로 염색한 다음 confocal microscope 하에서 관찰하였다. 연구결과 대부분의 난자는 수정과정중에 있었으나 일부의 난자에서는 특정단계에서 정지되어 있는 것이 관찰되었다. 즉, 감수분열 중기에서 정자의 침입이 이루어지지 않은 경우, 정자의 침입은 이루어졌으나 sperm aster 형성이 불완전한 경우, 웅성 및 자성전핵의 형성에 실패한 경우 및 전핵의 위치가 불완전한 경우 등이 관찰되었고 이들 난자의 경우 높은 비율로 미세소관과 염색체의 이상이 관찰되었다. 이상의 연구결과로 미루어 볼 때 생식보조기법의 시술과정에서 채취되는 난자의 수정실패의 원인은 세포골격기관 특히 미세소관의 이상과 염색체의 이상에 기인되는 것으로 사료되면 이러한 세포골격 구성물질의 이상에 대해서는 추후에 세포조직학적 또는 분자생물학적 분석이 필요하다고 하겠다.
The objective of this study was to establish an in vitro culture system for ovarian preantral follicles of B6D2F1. First, we optimized the in vitro preantral-follicle culture by culture duration, follicle stimulating hormone (FSH) type, and activin A concentration. Duration of in vitro culture for 9, 11, and 13 days was sufficient for the normal development of preantral follicles to antral follicles. Formation of cumulus cell-oocyte complex (COC) was induced by treatment with human chorionic gonadotropin (hCG; 2.5 IU/mL) and epidermal growth factor (EGF; 5 ng/mL). In addition, metaphase II (MII) oocytes formed during this in vitro culture of preantral follicles. In vitro preantralfollicle culture for 9 days showed higher rates of growth and maturation, thus yielding a greater number of antral follicles, and there were significant differences (p < 0.05) in the number of MII oocytes (that formed from these preantral follicles via differentiation) between the 9-day culture and 11-day or 13-day culture. The follicles cultured for 9 days contained a tightly packed well-defined COC, whereas in follicles cultured for 11 days, the COC was not well defined (spreading was observed in the culture dish); the follicles cultured for 13 days disintegrated and released the oocyte. Second, we compared the growth of the preantral follicles in vitro in the presence of various FSH types. There were no significant differences in the growth and maturation rates and in differentiation into MII oocytes during in vitro culture between preantral follicles supplemented with FSH from Merck and those supplemented with FSH from Sigma. To increase the efficiency of MII oocyte formation, the preantral follicles were cultured at different activin A concentrations (0 to 200 ng/mL). The control follicles, which were not treated with activin A, showed the highest rate of differentiation into antral follicles and into MII oocytes among all the groups (0 to 200 ng/mL). Therefore, activin A (50 to 200 ng/mL) had a negative effect on oocyte maturation. Thus, in this study, we propose an in vitro system of preantral-follicle culture that can serve as a therapeutic strategy for fertility preservation of human oocytes for assisted reproductive medicine, for conservation of endangered species, and for creation of superior breeds.
The study was conducted to evaluate the seminal attributes and cryobanking of Achhami (Bos indicus) bull semen. Of two Achhami bulls, 8 ejaculates from each bull were evaluated for seminal attributes. For semen freezing and cryo-banking, 4 ejaculates (having ≥2 mL semen volume, ≥75% of sperm motility and ≥1,000 × 106 cells/mL of sperm concentration) from each bull were used. Semen samples were diluted in egg-yolk-tris-citrate extender using a two-step dilution protocol, and were frozen in liquid nitrogen (LN2) vapour in a styrofoam box. The mean semen volume, colour, sperm mass activity, motility, viability, concentration, abnormal acrosome, midpiece and tail and, abnormal head of two Achhami bulls were 4.4 ± 0.5 mL vs. 2.5 ± 0.2 mL, 2.5 ± 0.1 vs. 2.4 ± 0.1, 3.5 ± 0.1 vs. 3.5 ± 0.1, 77.0 ± 1.1% vs. 78.3 ± 1.3%, 94.4 ± 0.5% vs. 91.0 ± 0.6%, 1137.7 ± 73.7 × 106 cells/mL vs. 1060.0 ± 44.3 × 106 cells/mL, 10.2 ± 0.5% vs. 10.3 ± 0.5% and 6.7 ± 0.5% vs. 8.2 ± 0.3%, respectively. The post-thawed sperm motility and viability were 53.0 ± 2.0% vs. 50.0 ± 0.0% and 80.2 ± 0.4% vs. 73.2 ± 0.7%, while evaluating by computer-assisted sperm analysis (CASA) system, the percentage of the progressive motility, fast motility, slow motility, local motility and immotile sperm were 75%, 68%, 7.4%, 16.6% and 8.6%, respectively. A total number of 620 doses semen straw were cryo-banked. Due to the acceptable post-thawed sperm motility and viability recorded, cryopreservation of Achhami semen is hereby recommended so as to preserve the Achhami breed. For further validation, the fertility will be observed from the produced frozen semen.
본 실험은 1.48$\mu\textrm{m}$ diode laser의 인간배에 대한 적용 가능성 여부를 조사하기 위한 예비실험으로, 체외생산된 생쥐배에 1.48$\mu\textrm{m}$ diode laser를 이용한 zona pellucida (ZP) drilling 처리가 배의 부화와 체내발달에 효과적인지를 조사하고자 실시하였다. 그 결과는 다음과 같다. 발달단계가 상이한(4-세포기배, 배반포기배) 생쥐배에 laser ZP drilling 처리한 후 72시간 (배반포기배) 또는 120시간 (4-세포기배) 동안 배양하였던 바, laser ZP drilling 처리를 받은 배반포기배의 부화율(81.8%)이 대조군 (54. 2%)이나 laser ZP drilling 처리를 받은 4-세포기배 (45.5%) 보다 유의하게 높게 나타났다(p<0.05). 또한, laser ZP drilling된 배반포기배를 가임신이 유도된 대리모에 이식하였던 바, 처리군 (48.7%)의 착상율이 대조군 (43.6%)보다 약간 높게 나타났다. 한편, 임신된 대리모 일부는 분만을 유도하였던 바, 태어난 모든 새끼는 처리군에 관계없이 정상적인 염색체수 (n=40), 정상적인 성장과 생식기능을 나타내었다. 이러한 결과는 1.48$\mu\textrm{m}$ diode laser를 이용한 ZP drilling이 생쥐배의 부화를 증진시키고 정상적인 임신을 유도할 수 있어 인간배에 대한 적용 간으성을 시사한다고 하겠다.
Ma, Lei;Jung, Dae-Jin;Jung, Eun-Ju;Lee, Woo-Jin;Hwang, Ju-Mi;Bae, Jeong-Won;Kim, Dae-Hyun;Yi, Jun Koo;Lee, Sang Moo;Ha, Jae Jung;Kwon, Woo-Sung
한국동물생명공학회지
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제36권2호
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pp.106-115
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2021
Sperm cryopreservation is an important method of assisted reproductive techniques and storing genetic resources. It plays a vital role in genetic improvement, livestock industrial preservation of endangered species, and clinical practice. Consequently, the cryopreservation technique is well organized through various studies, especially on Korean native cattle (Hanwoo). However, the cryopreservation technique of Korean native brindled cattle, which is one of the native cattle species in Korea, is not well organized. Therefore, it is necessary to develop a Supplementary Table technique for the cryopreservation of Korean native brindled cattle. For this purpose, it is important to first evaluate the quality of the currently produced cryopreserved sperm of Korean native brindled cattle. In this study, we randomly selected 72 individual Korean native brindled cattle semen samples collected from 8 different region research centers and used them to evaluate sperm functions. We focused on the quality evaluation of cryopreserved Korean native brindled cattle semen following the measurement of motion kinematics, capacitation status, intracellular ATP level, sperm motility, and cell viability. Then, the values of each of the eight groups were derived from various sperm parameters of nine individual samples, including sperm motility, kinematics, cellular motility, and intracellular ATP levels, which were used to compare and evaluate sperm function. Overall, differences in various sperm parameters were observed between most of the research centers. Particularly, the deviations of motility and motion kinematics were high according to the sample. Therefore, we suggest that it is necessary to develop a standard method for the cryopreservation of Korean native brindled cattle semen. We also suggest the need for sperm quality evaluation of the cryopreserved semen of Korean native brindled cattle before using artificial insemination to attain a high fertility rate.
Nsiyapnze Katte Yato Katte;Tchoffo Herve;Azafack Kana Dorice;Chongsi Margaret Mary Momo;Ngoula Ferdinand
한국동물생명공학회지
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제38권4호
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pp.236-246
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2023
Background: This study helps to evaluate the Ovarian potential of Cameroonian Zebu cattle (Bos indicus) slaughtered in Etoudi - Yaoundé for implementing Assisted Reproductive Techniques (ARTs). The aim was to enhance the productivity of the cattle sub-sector in Cameroon while conserving local genetic resources. Methods: A total of 144 cows, including 94 cycled cows and 50 pregnant cows, were included in the study. Live weights were determined by measuring the thoracic perimeter of each cow using a Rondo measuring tape. Age was determined postmortem through examination of dentition and horns, while the uterus and ovaries were removed, weighed, and classified based on physiological status (pregnant or nonpregnant). Follicles were counted, and their diameters were measured and categorized into small (Ø < 3 mm), medium (Ø 3-8 mm), and large (Ø > 8 mm). Results: The results revealed an average follicular population of 32.02 ± 9.31 per cow, with 22.43 ± 8.45 small follicles, 8.42 ± 3.87 medium follicles, and 0.76 ± 0.34 large follicles. The weight of the right ovary was significantly higher than that of the left ovary (p < 0.05), and cows aged 6 to 9 years exhibited a higher number of follicles compared to other age groups. Cows with medium (BCS = 3) and large (BCS = 4-5) body reserves had the heaviest ovaries. Additionally, pregnant cows had heavier uteri compared to non-pregnant cows, and cows with a body condition score of 3 or higher had higher uterine weights than lean cows (BCS = 1-2). Conclusions: This study demonstrates that age, body condition score, and pregnancy status influence ovarian weight. Body Condition Score serves as a reliable indicator of cow nutritional status, and cows with BCS of 3-5 are excellent candidates for in vitro production of embryos.
병합임신은 두 개의 수정란이 자궁강 내와 자궁강 외에 동시에 착상되어 임신되는 것을 말한다. 그 예가 드물어 자연발생빈도는 약 30,000건의 임신 중 1명으로 나타나지만, 최근에는 불임환자의 체외 수정을 위한 배란 유도제의 사용이나 기타 생식 보조술의 발달, 골반내 염증, 난관수술로 인해 증가하고 있다. 병합임신은 조기 진단이 어려워 이에 따른 모성 사망률, 이환율이 높아지므로, 진단에 있어서 신중함이 중요하다. 저자들은 경찰병원에서 자연 생리주기에서 7주간의 무월경과 심한 하복부 통증을 주소로 내원한 29세 여환에서 발견된 좌측 난관임신과 자궁강 내 임신이 공존하는 병합임신을 간단한 문헌 고찰과 함께 보고하는 바이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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