• Title/Summary/Keyword: Assembly Block

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Mechanism underlying NO-induced apoptosis in human gingival fibroblasts

  • Hwang, In-Nam;Jeong, Yeon-Jin;Jung, Ji-Yeon;Lee, Jin-Ha;Kim, Kang-Moon;Kim, Won-Jae
    • International Journal of Oral Biology
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    • v.34 no.1
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    • pp.7-14
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    • 2009
  • Nitric oxide (NO) acts as an intracellular messenger at the physiological level but can be cytotoxic at high concentrations. The cells within periodontal tissues, such as gingival and periodontal fibroblasts, contain nitric oxide syntheses and produce high concentrations of NO when exposed to bacterial lipopolysaccharides and cytokines. However, the cellular mechanisms underlying NO-induced cytotoxicity in periodontal tissues are unclear at present. In our current study, we examined the NO-induced cytotoxic mechanisms in human gingival fibroblasts (HGF). Cell viability and the levels of reactive oxygen species (ROS) were determined using a MTT assay and a fluorescent spectrometer, respectively. The morphological changes in the cells were examined by Diff-Quick staining. Expression of the Bcl-2 family and Fas was determined by RT-PCR or western blotting. The activity of caspase-3, -8 and -9 was assessed using a spectrophotometer. Sodium nitroprusside (SNP), a NO donor, decreased the cell viability of the HGF cells in a dose- and time-dependent manner. SNP enhanced the production of ROS, which was ameliorated by NAC, a free radical scavenger. ODQ, a soluble guanylate cyclase inhibitor, did not block the SNP-induced decrease in cell viability. SNP also caused apoptotic morphological changes, including cell shrinkage, chromatin condensation, and DNA fragmentation. The expression of Bax, a member of the proapoptotic Bcl-2 family, was upregulated in the SNP-treated HGF cells, whereas the expression of Bcl-2, a member of the anti-apoptotic Bcl-2 family, was downregulated. SNP augmented the release of cytochrome c from the mitochondria into the cytosol and enhanced the activity of caspase-8, -9, and -3. SNP also upregulated Fas, a component of the death receptor assembly. These results suggest that NO induces apoptosis in human gingival fibroblast via ROS and the Bcl-2 family through both mitochondrial- and death receptor-mediated pathways. Our data also indicate that the cyclic GMP pathway is not involved in NO-induced apoptosis.

Regulation of Cyclin D3 by Calpain Protease in Human Breast Carcinoma MDA-MB-231 Cells (인체 유방암세포에서 calpain protease에 의한 cyclin D3의 발현 조절)

  • Choi, Byung-Tae;Kim, Gun-Do;Choi, Yung-Hyun
    • Journal of Life Science
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    • v.16 no.4
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    • pp.598-604
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    • 2006
  • The $Ca^{2+}-activated$ neutral protease calpain induced proteolysis has been suggested to play a role in certain cell growth regulatory proteins. Cyclin proteolysis is essential for cell cycle progression. D-type cyclins, which form an assembly with cyclin-dependent kinases (cdk4 and cdk6), are synthesized earlier in G1 of the cell cycle and seem to be induced in response to external signals that promote entry into the cell cycle. Here we show that cyclin D3 protein levels are regulated at the posttranscriptional level by calpain protease. Treatment of human breast carcinoma MDA-MB-231 cells with lovastatin and actinomycin D resulted in a loss of cyclin D3 protein that was completely reversible by the peptide aldehyde calpain inhibitor, LLnL. The specific inhibitor of the 26S proteasome, lactacystin, the lysosome inhibitors, ammonium chloride and chloroquine, and the serine protease inhibitor, phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF), did not block the degradation of cyclin D3 by lovastatin and actinomycin D. Results of in vitro degradation of cyclin D3 by purified calpain showed that cyclin D3 protein is degraded in a $Ca^{2+}-dependent$ manner, and the half-life of cyclin D3 protein was dramatically increased in LLnL treated cells. These data suggested that cyclin D3 protein is regulated by the $Ca^{2+}-activated$ protease calpain.

Behavior Analysis of Assembling Soil Nailed Walls through Large Scaled Load Test (대형파괴재하시험을 통한 조립식 쏘일네일 벽체의 거동분석)

  • Kang, Inkyu;Kwon, Youngho;Park, Shinyoung;Ki, Minju;Kim, Hongtaek
    • Journal of the Korean GEO-environmental Society
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    • v.9 no.4
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    • pp.23-36
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    • 2008
  • Soil nailing system can be mentioned to a method of supporting as the shear strength of in-situ soils is increased by passive inclusions. In the general soil nailing system, facing walls are used in two kind of a lattice concrete block or a cast in placed concrete wall. A case of lattice concrete blocks is used in slow slopes greater than 1(V):0.7(H). Also, a case of a cast in placed concrete wall is used in steep slopes less than 1(V):0.5(H). The cast in placed concrete walls are constructed to 30 cm thick together with a shotcrete facing. In this study, the assembling soil nailing method as a new soil nailing system will be proposed. This method is assembly construction using precast concrete panels with 20 cm thick. So, the ability of construction and the quality of facings can be improved more than a conventional soil nailing system. This method can be obtained the effects that a global slope stability increase, as precast concrete panels are immediately put on cutting face after excavating a slope. In this study, confining effects of concrete panels using the assembling soil nailing system were found out by large scaled load tests. In the tests, the load-settlement relationship to an assembling soil nailing system due to the stiff facings as concrete panels appeared to be better than a typical soil nailing system with shotcrete facings.

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Methods of Incorporating Design for Production Considerations into Concept Design Investigations (개념설계 단계에서 총 건조비를 최소로 하는 생산지향적 설계 적용 방법)

  • H.S.,Bong
    • Bulletin of the Society of Naval Architects of Korea
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    • v.27 no.3
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    • pp.131-136
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    • 1990
  • 여러해 전부터 선박의 생산실적이나 생산성 관련 자료를 기록하고 보완하는 작업을 꾸준히 개선토록 노력해온 결과중 중요한 것 하나는, 선박의 여러 가지 설계 검토과정에서 충분히 활용할 수 있는 함축성 있고 믿을만한 형태의 생산정보를 제공해줄 수 있게 되었다는 것이라고 말 할 수 있겠다. 이러한 자료들은 생산계획상 각 단계(stage)에서의 작업량, 예상재료비와 인건비의 산출등이 포함될 수 있으며, 선박이나 해상구조물의 전반적인 설계방법론(design methodology)을 개선코자 한다면 ''생산지향적 설계(Design for Production)''의 근간이 되는 선박건조전략(build strategy), 구매정책(purchasing policy)과 생산기술(production technology)에 대한 폭넓은 지식이 한데 어우러져야 한다. 최근에는 CIMS의 일부분에서 보는 바와 같은 경영관리, 설계 및 생산지원 시스템의 도입으로 이와 같은 설계 프로세스의 추진을 가능케하고 있다. 이와 병행하여 설계를 지원하기 위한 전산기술, 특히 대화형 화상처리기술(interactive graphics)의 발달은 설계자가 선박의 형상이나 구조 배치를 여러 가지로 변화시켜 가면서 눈으로 즉시 확인할 수 있도록 설계자의 능력을 배가시키는데 크게 기여하고 있다. 여러 가지의 설계안(alternative design arrangement)을 신속히 만들어내고 이를 즉시 검토 평가할 수 있는 능력을 초기설계 단계에서 가질 수 있다면 이는 분명히 큰 장점일 것이며, 더구나 설계초기 단계에 생산관련인자를 설계에서 고려할 수 있다면 이는 더욱 두드러진 발전일 것이다. 생산공법과 관련생산 비용을 정확히 반영한 각 가지의 설계안을 짧은 시간내에 검토하고 생산소요 비용을 산출하여 비교함으로써, 수주계약단계에서 실제적인 생산공법과 신뢰성있는 생산실적자료를 기준으로 하여 총 건조비(total production cost)를 최소로 하는 최적의 설계를 선택할 수 있도록 해 줄 것이다. 이제 이와 같은 새로운 설계도구(design tool)를 제공해 주므로써 초기설계에 각종 생산관련 정보나 지식 및 실적자료가 반영가능토록 발전되었다. 본 논문은 영국의 뉴카슬대학교(Univ. of Newcastle upon Type)에서 위에 언급한 특징들을 반영하여 새로운 선박구조 설계 방법을 개발한 연구결과를 보여주고 있다. 본 선계연구는 5단계로 구분되는데; (1) 컴퓨터 그라픽스를 이용하고 생산정보 데이타베이스와 연결시켜 구조형상(geometry)을 정의하고 구조부재 칫수(scantling) 계산/결정 (2) 블럭 분할(block division) 및 강재 배치(panel arrangement)의 확정을 위해 생산기술 및 건조방식에 대한 정보 제공 (3) 상기 (1) 및 (2)를 활용하여 아래 각 생산 단계에서의 생산작업 분석(work content assessment) a) 생산 준비 단계(Preparation) b) 가공 조립 단계(Fabrication/Assembly) c) 탑재 단계(Erection) (4) 각각의 설계(안)에 대하여 재료비(material cost), 인건비(labour cost) 및 오버헤드 비용(overhead cost)을 산출키 위한 조선소의 생산시설 및 각종 품셈 정보 (5) 총 건조 비용(total production cost)을 산출하여 각각의 설계안을 비교 검토. 본 설계 방식을 산적화물선(Bulk Carrier) 설계에 적용하여 구조배치(structural geometry), 표준화의 정도(levels of standardisation), 구조생산공법(structural topology) 등의 변화에 따른 설계 결과의 민감도를 분석(sensitivity studies)하였다. 전산장비는 설계자의 대화형 접근을 용이하도록 하기 위해 VAX의 화상 처리장치를 이용하여 각 설계안에 대한 구조형상과 작업분석, 건조비 현황 등을 제시할 수 있도록 하였다. 결론적으로 본 연구는 설계초기 단계에서 상세한 건조비 모델(detailed production cost model)을 대화형 화상 처리방법에 접합시켜 이를 이용하여 여러가지 설계안의 도출과 비교검토를 신속히 처리할 수 있도록 함은 물론, 각종 생산 실적정보를 초기설계에 반영하는 최초의 시도라고 믿으며, 생산지향적(Design for Production) 최적설계분야의 발전에 많은 도움이 되기를 기대해 마지 않는다. 참고로 본 시스템의 설계 적용결과를 부록에 요약 소개하며, 상세한 내용은 참고문헌 [4] 또는 [7]을 참조 요망한다.

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