Roots of Glycine max and Miscanthus sinensis and soil samples were collected from various field sites at Goesan, Chungbuk in Korea. Microscopic observations of the roots indicated high colonization rates of both arbuscular mycorrhizal fungi(AMF) and other fungi. The partial small subunit of ribosomal DNA genes were amplified with the genomic DNA extracted from their roots by nested polymerase chain reaction(PCR) with universal primer NS1 and fungal specific primers AML Restriction fragment length polymorphism(RFLP) was analyzed using the combinations of three restriction enzymes, HinfI, AluI and AsuC21. Nucleotides sequence analysis revealed that ten sequences from Miscanthus sinensis and one sequence from Glycine max were close to those of arbuscular mycorrhizal fungi. Also, 33% of total clones amplified with NS31-AM1 primers from M. sinensis and 97% from G. max were close to Fusarium oxysporum or other pathogenic fungi, and they were successfully distinguished from AME Results suggested that these techniques could help to distinguish arbuscular mycorrhizal fungi from root pathogenic fungi in the plant roots. Especially, DNA amplified by these primers showed distinct polymorphisms between AMF and plant pathogenic species of Fusarium when digested with AsuC21.
This study was conducted to investigate into the distribution of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) in the greenhouse soils grown strawberry plants in Damyang and Jangheung districts. Twenty three soil samples were collected from strawberry plants under greenhouse conditions, and mycorrhizal spores in soils were separated using wet-sieving methods. Number of mycorrhizal spores per 30g fresh soil sized over 500${\mu}$m, 355~500${\mu}$m, 251~354${\mu}$m, 107~250${\mu}$m and $45{\sim}106{\mu}m$ were 0.3, 1.0, 4.2, 50.4 and 119, etc. Total number of spores per 30g fresh soil were l73.9. Root infection by vesicles and hyphae were 25% and 4%, respectively. Mycorrhizal root infection by arbuscules was not shown in strawberry roots. Isolated mycorrhizal spores were inoculated into the host plant of sudangrass to identify the genus of arbuscular mycorrhizal fungi, and propagated for 4 months. As a result of identification, mass propagated mycorrhizal spores were Glomus sp., Gigaspora sp., and Acaulospora sp., and so on.
내생균근 균이 포함된 토양을 이용하여 4종류의 식물인 수수, 돌콩, 차풀 및 참깨를 재배하여, arbucular mycorrhizae의 감염도 및 포자 증식을 조사 하였다. 감염율의 변화는 계속하여 50일까지 증가하고 있는 반면에 포자생성은 30일 이후에 증가율이 감소하는 것이 관찰되었다. 이로써, AM 감염도는 포자생성과 상관관계를 갖지 않은 것으로 나타났다. 또한, 다양한 지역의 토양을 포트배양하여 포자의 증식을 조사하였으며, 다음과 같은 결과를 얻었다. 다양한 토양을 이용하여 포트배양한 결과 많은 양의 새로운 포자를 얻을 수 있었으며, 82개 토양 중 43개 토양에서 포자의 증식이 관찰되었으며 4속 15종의 포자가 동정되었다. 포트배양한 토양의 pH를 조사한 결과 pH에 따라 포자의 생성이 일정한 경향을 보였으며, 대체로 낮은 pH에서 많은 포자 증식을 관찰하였다.
전남 담양지역의 시설재배 토마토에서 발생하는 arbuscular 균근균의 분포를 조사하였다. 총 21 농가의 토마토 재배 토양을 채취한 후 arbuscular 균근균의 포자를 분리하여 계수한 결과 $500{\mu}m$ 이상은 0.01개 정도, $355{\sim}500{\mu}m$는 0.02개 정도, $251{\sim}354{\mu}m$는 0.09개 정도, $107{\sim}250{\mu}m$는 0.9개 정도, $45{\sim}106{\mu}m$는 2.0개 정도였으며, 토양 g 당 평균 3.02개 정도의 포자밀도로 분포하였다. 토마토 뿌리에서 균근 감염 양상을 보면 vesicle 18.0%, hyphae 6.0%, arbuscule 2.0%등 전체적으로 26.0% 정도의 감염율을 보였다. 분리된 arbuscular 균근균 포자를 수단그라스에 재접종하여 4개월 정도 배양하여 arbuscular 균근균의 동정을 실시한 결과 Glomus sp., Gigaspora sp. 및 Acaulospora sp. 등으로 동정되었다.
우리나라 4개 도(경기, 충북, 경북, 전북)의 9개 지역에서 19종의 콩과식물 주변으로부터 65곳 토양 표본을 채취, 내생균근균을 분리동정하여 생태학적 분석을 하였다. 그 결과 4속 21종이 발견되었고, Glomus속이 47.6%로서 출현빈도가 가장 높았고 Gigaspora속은4.8%로서 다른 속에 비해 빈도가 아주 낮았다. 콩과식물 주변 토양에서 가장 보편적으로 발견되는 내생균근균의 종은 Acaulospora laeuis와 Glomus laminated spores cf. macrocarpus var. macrocarpus.였다. 19종 콩과식물 중 Cassia mimosoides var. nomame와 Kummerowia striata의 두 식물 주변토양에서 내생균근균의 종수가 가장 많이 관찰되었다. 분리된 내생균근균의 포자수는 토양(건조하지 않은 토양임) 10g당 $0.3{\sin}10$개로 나타났다. 생태적으로 교란된 지역과 자연생태의 식생에서 채집한 콩과식물 주변토양의 내생균근균의 종 다양성을 비교한 결과 교란된 지역이 높은 것으로 나타났다.
The diversity of arbuscular mycorrhizal fungi (AM) was investigated in cultivated and natural fold sites or chungbuk, Korea. soils were collected from rhizosphere or Sorghum bicolor, Fagopyrum esculentum and Glycine max in cultivated sites, and of Miscanthus sinensis, Glycine soja and Lespedeza cuneata in natural sites. Total 20 species of Glomalean fungi were found in this study. Species richness, species diversity and density of AM fungi were significantly lower in the arable sites. While only AM fungal spores belong to Glomus and Acaulospora were found in arable fold sites, more diverse fungal spores including Gigasporaceae were found in natural grasslands. AM fungal spore composition did not significantly differ among crop plant species. Results suggest that the agricultural practices were significantly influenced on AM fungal community structures and mycorrhizal developments.
Growth responses of Zea mays and Glycine max to colonization by mixture of combination of three species of arbuscular mycorrhizal (AM) fungi, two species of Glomus and a species of Scutellospora were compared. In Zea mays, plants inoculated with single species of AM fungi showed significantly higher in dry weight than non-mycorrhizal plant for all three AM fungal species. Also, growth of plants inoculated with spores of two species of AM fungi was significantly higher than nonmycorrhizal control except for plants inoculated with two Glomus species. When three species of AM fungi were inoculated, the plants showed the highest growth. In Glycine max, plants with single AM fungal species inoculation were not significantly different in plant growth from nonmycorrhizal plants. When the plants were inoculated with combination of two or more AM fungal species, their growth significantly increased compared to nonmycorrhizal plants. In both plant species, mycorrhizal root colonization by Scutellospora species was significantly lower than by Glomus species.
Agrobacterium rhizogenes의 Ri t-DNA로 형질전환된 당근의 모상근에 Glomus sp.를 감염시킨후 arbuscular 균근균 포자를 Modified Strullu & Romand 배지상에서 12주 동안 기내증식하였다. 기내증식을 위한 접종원으로는 포자보다는 균근감염 뿌리가 더 좋았다. 당근 모상근과 arbuscular 균근균의 대치배양으로 증식된 Glomus sp.의 포자는 직경 약 $50{\mu}m$정도의 원형 또는 타원형의 포자로서 균사의 중간부위에서 형성되었다. 12주 동안 기내에서 대치 배양한 결과 plate 당 약 1,200개 정도의 arbuscular 균근균 포자를 생산하였다.
A new species of arbuscular mycorrhizal fungi (Glomeromycota), Acaulospora koreana, was isolated from forest soils in South Korea. This novel fungus was collected from the rhizosphere of Lindera obtusiloba and Styrax obassia in forest and propagated with Sorghum bicolor in pot. Morphological characteristics of spores of A. koreana are rarely distinguished from Acaulospora mellea, which is reported as one of the most abundant mycorrhizal species in Korea. However, molecular evidence of rDNA sequence using improved primers for glomeromycotan fungal identification strongly supported that A. koreana is different from A. mellea but also any other species belonging to the genus Acaulospora. This is the first novel glomeromycatan fungus introduced in South Korea, but it suggests that there is a high possibility for discovering new arbuscular mycorrhizal fungi considering the abundance of plant species and advanced phylogenetic analysis technique.
The genomic DNAs were extracted from roots of Glycine max and Sorghum bicolor, and compared with those from spores of two arbuscular mycorrhizal(AM) fungi, Glomus mosseae and Scutellospora heterogama. The partial small subunit(SSU) of ribosomal RNA genes were synthesized and amplified by polymerase chain reaction with the fungal specific primers, AM1 and NS31. By the recent molecular techniques, the presence of another AM fungal DNA were confirmed in the roots of two plants, and three sequences of rDNA fragments amplified were identified to be close to those of G. caledonium, G. fasiculatum and G. proliferum. The two AM fungi, both, were found to colonize at the cortical layers of plant roots collected in the fields, together.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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