Major Royal Jelly Protein cDNAs of Apis cerana (AcMRJP) were cloned and characterized. The open reading frames (ORFs) of the AcMRJP1 and AcMRJP2 genes were 1302 and 1392 nucleotides, encoding 433 and 463 amino acid residues, respectively. The sequence divergences between AcMRJP1 and AcMRJP2 and their corresponding protein families in A. mellifera were 0.0618 and 0.0934 at the nucleotide level and 0.0912 and 0.1438 at the protein level, respectively. Phylogenetic analysis supports the orthologous similarity between these proteins. The deduced amino acids indicated high essential amino acid contents of AcMRJP1 and AcMRJP2 (47.5 and 44.8%, respectively). The genomic organization of both AcMRJP1 and AcMRJP2 was determined. Both the AcMRJP1 (3663 bp) and AcMRJP2 (3963 bp) genes contained six exons and five introns, where all boundaries conformed to the GT/AG rule. AcMRJP1 and AcMRJP2 cDNAs were cloned into pET17b, and both the recombinant (r) AcMRJP1 (47.9 kDa) and rAcMRJP2 (51.7 kDa) were expressed in the insoluble form. Western blot analysis and N-terminal sequencing of the solubilized proteins revealed successful expression of rAcMRJP1 and rAcMRJP2 in vitro. The yields of the purified rAcMRJP1 and rAcMRJP2 were approximately 20 and 8mg protein per liter of the flask culture, respectively.
본 연구는 설치모델 동물에서 봉독의 항통각 효과를 평가하고, 한국산 봉독과 미국산 봉독의 항통각 효과를 비교하는 것이 주된 관심이다. 한국산 봉독은 특별히 고안된 봉독 추출기를 사용하여 일벌 (Apis mellifera L.)에 전기충격을 가하여 생봉독을 수집하였으며, 수집된 생봉독은 봉독 건조기를 이용하여 봉독을 건조하였다. 미국산 봉독은 미국 시그마회사에서 상업적으로 판매되는 건조 봉독을 이용하였다. 한국산 봉독과 미국산 건조봉독을 생리식염수에 희석하여 체중 kg당 6 mg과 0.6 mg, 0.06 mg을 마우스와 랫드에 피하로 투여하여 항진통 효과를 조사하였다. 항통각 효과는 한국산 봉독과 미국산 봉독은 서로 비슷하였으며, 봉독의 용량이 많을수록 항통각 효과가 크게 나타났다. 이상의 결과에서 한국산 건조 봉독은 통증 치료에 사용될 수 있을 것으로 생각된다.
Mastitis is an inflammatory condition of the mammary gland, most often caused by bacterial infections, resulting in significant economic losses to the dairy industry. Antimicrobial resistance has been of great concern because of the extensive clinical use of antibiotics. For this reason, the development of new compounds as an alternative treatment to bovine mastitis is needed. Bee venom has been widely used as an oriental treatment for several inflammatory diseases and bacterial infections. The aim of the present study was to evaluate the antimicrobial activity of bee venom on bacteria isolated from bovine mastitis. A total of 107 isolates from bovine mastitic milk samples collected in 2019 and 2020 in Jeonbuk province. All bacterial isolates were tested for susceptibility to bee venom of the honey bee (Apis mellifera). In order to obtain comprehensive antibacterial activities of the bee venom, we measured the minimal inhibitory concentration (MIC) of the bee venom against bacterial strains. Bee venom showed significant inhibition of bacterial growth of Gram-negative bacteria Citrobacter spp., Escherchia coli, Klebsiella spp., Pseudomonas spp., Serratia spp. and Raoultella with MIC values of 96, 81, 72, 230, and 85 ㎍/mL, respectively, and Gram-positive bacterial Enterococcus spp., Staphylococcus spp. and Streptococcus spp. with MIC values of 29, 21 and 16 ㎍/mL, respectively. The results indicated that the MIC values were different depending on the bacterial strains, and those of Gram-positive bacteria were lower than those of Gram-negative bacteria for bee venom. These findings suggested that bee venom could be an effective antimicrobial treatment for bovine mastitis; however, further research is necessary to evaluate the mechanism underlying the antimicrobial action, its effectiveness/safety in vivo and effective application for therapeutic use.
This experiment was carried out to investigate effects of honeybee venom treatment on the body weight gain, feed conversion and growth rate' in pigs. One hundred twenty nine piglets(LY) from 12 sows were allocated into two groups; honeybee venom-treated group (66 piglets from 6 sows) and non-treated control group (63 piglets from 6 sows). Natural honeybee venom was administrated at 0, 3, 14, 30, and 74 days after birth. The acupoints were Hai-men(ST-25), Du-kou(CV-8) and liao-chao(GV-I) points at 0 day, the regions of castration and tail ampution at 3 days, liao-chao(GV-1) and Bai-hui(GV-20) points at 14(weaning), 30(move into piglet stall) and 74(move into grower stall) days after birth. Control group was injected 1 ml of saline to the same site. Average body weight at 150 days after birth was 98.44 kg in bee venom treated group and 86.24 kg in control group, respectively. Average body weight of treated group was significantly increased by 14.15%(P < 0.0001). Average daily gain of bee venom treated group and control group were 649 g and 569 g, respectively, increased by 14.06%(P< 0.0001). Feed conversion of the treated group was 2.21 and control group was 2.49, increased by 11.25% in control group(P < 0.001). Survival rate at weaning was 95.5 % in treated group and 92.0% in control group, at growing(74 days after birth) was 92.4% in treated group and 85.7% in control group and survival rate at finishing(l50 days after birth) was 89.5 % and 79.4 %, respectively. Collecting together, the results in this study showed that growth performance and feed conversion were increased by treatment of natural honeybee venom to pigs. These results suggested that the treatment of bee venom could be used effectively for the increase productivity of livestock industry.
Yu-Na Hwang;In-Seo Kwon;Han-Heom Na;Jin-Sung Park;Keun-Cheol Kim
대한약침학회지
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제25권4호
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pp.390-395
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2022
Objectives: Sweet bee venom (sBV) is purified from Apis mellifera, containing a high level of melittin-its main component. It has been used as a therapeutic agent for pain relief and anti-inflammation, as well as for treating neuronal abnormalities. Recently, there have been studies on the therapeutic application of sBV for anticancer treatment. In the present study, we investigated the pharmacological effect of sBV treatment in A549 human lung cancer cells. Methods: We used microscopic analysis to observe the morphological changes in A549 cells after sBV treatment. The MTT assay was used to examine the cytotoxic effect after dose-dependent sBV treatment. Molecular changes in sBV were evaluated by the expression of apoptosis marker proteins using western blot analysis. Results: Microscopic analysis suggested that the growth inhibitory effect occurred in a dose-dependent manner; however, cell lysis occurred at a concentration over 20 ㎍/mL of sBV. The MTT assay indicated that sBV treatment exhibited a growth inhibitory effect at a concentration over 5 ㎍/mL. On fluorescence activated cell sorting analysis, G0 dead cells were observed after G1 arrest at treatment concentrations up to 10 ㎍/mL. However, rapid cell rupture was observed at a concentration of 20 ㎍/mL. Western blot analysis demonstrated that sBV treatment modulated the expression of multiple cell death-related proteins, including cleaved-PARP, cleaved-caspase 9, p53, Bcl2, and Bax. Conclusion: sBV induced cell death in A549 human lung cancer cells at a pharmacological concentration, albeit causing hemolytic cell death at a high concentration.
본 연구는 병해충 관리용 유기농업자재 허용물질로 지정된 식물추출물 중 님 추출물과 고삼추출물, 데리스 추출물 원제의 독성 평가를 위해 꿀벌에 대한 급성 접촉 및 섭식독성시험을 수행하였다. 급성접촉독성시험결과 님 추출물 2종과 데리스 추출물 2종은 $LD_{50}$이 100 ${\mu}g/bee$ 이상으로 독성이 매우 낮았고 고삼 추출물은 2종 모두 $LD_{50}$(48h)이 1.7 ${\mu}g/bee$로 매우 강한 독성을 보였다. 급성섭식독성시험결과 님 추출물 2종과 데리스 추출물 2종은 $LD_{50}$이 100 ${\mu}g/bee$ 이상으로 독성이 매우 낮았고 고삼 추출물A는 $LD_{50}$(48h)이 1.7 ${\mu}g/bee$, 고삼 추출물B는 $LD_{50}$(48h)이 0.3 ${\mu}g/bee$으로 모두 매우 강한 독성이 있는 것으로 평가되었다.
최근에는 화학적 살충소재 보다 친환경적인 살충소재를 선호하여 천연물질을 함유한 친환경 살충제의 개발이 활발히 이루어지고 있다. 본 연구의 목적은 해충 방제에 이용할 수 있는 친환경 농자재인 식물정유(싸임화이트, 클로브버드, 계피, 라벤더, 레몬유칼립투스)의 생태독성을 평가하는 것이다. 생태독성 평가로 물벼룩(Daphina magna), 송사리(Oryzias latipes), 꿀벌(Apis mellifera L.), 지렁이(Eisenia fetida)를 이용하였다. 물벼룩급성독성시험의 경우, 싸임화이트, 클로브버드, 계피 정유의 $EC_{50}$ 값은 각각 2.5, 2.8, $6.9mg\;L^{-1}$로 EPA 기준으로 보통독성정도이었고, 라벤더, 레몬유칼립투스 정유는 $10mg\;L^{-1}$ 이상이었다. 송사리급성독성 시험의 경우, 싸임화이트와 계피 정유의 $LC_{50}$ 값이 6.7, $7.5mg\;L^{-1}$으로 나타났으며 나머지 정유는 모두 $10mg\;L^{-1}$으로 확인되었다. 꿀벌급성독성시험은 접촉과 섭식 시험으로 나누어서 실시하였고, 모든 정유의 $LD_{50}$ 값이 $100{\mu}g$ a.i $bee^{-1}$ 이상으로 확인되었다. 지렁이급성독성시험의 경우, 싸임화이트, 클로브버드, 계피, 라벤더, 레몬유칼립투스의 $LC_{50}$ 값이 각각 149, 230, 743, 234, $635mg\;kg^{-1}$로 나타났다. 결과적으로 식물 정유들의 지렁이급성독성에 대한 안전성이 확인될 경우 환경에 대한 안전성이 확보된 친환경 살충소재로서의 활용 가능성이 예상되며, 친환경 농자재 생산에 기여할 것으로 사료된다.
체리의 경우 유과기나 과실수확기에 비가 잦을 경우 각종 곰팡이에 의한 과실썩음병과 열과가 발생하여 고품질의 과실을 생산하기 어렵다. 따라서 우리나라와 같이 장마기가 있는 기후조건에서는 농약살포 횟수를 줄이고 고품질의 과실을 안정적으로 생산하기 위해서는 반드시 비가림 시설재배가 필요하다. 국내에서 체리의 개화시기는 4월 상 중순으로 개화기 저온에 의해 자연상태의 꿀벌을 통한 화분매개는 결실율이 불안정하며, 봄철에는 화분매개용 꿀벌 봉군을 구입하기가 어렵다. 따라서 본 연구에서는 최근 시설재배 방울토마토, 애호박 등에서 화분매개용으로 많이 이용되고 있는 서양뒤영벌을 비가림 재배 조건에서 꿀벌을 대신하여 체리에 대한 화분매개 곤충으로 이용코자 하였다. 방화활동력은 서양뒤영벌의 경우 한 꽃에 약 6초 정도 머물러 분당 11개 정도의 꽃을 방문하였고, 꿀벌의 경우 한 꽃에 약 15초씩 머물러 분당 4~5개 정도의 꽃을 방문하였다. 또한 결실율과 과실특성에 있어 두 벌 처리구 간에 통계적인 유의성은 없었다. 따라서 비가림 체리 재배에서 개화기에 화분매개용으로 꿀벌을 대신하여 서양뒤영벌을 이용하더라도 어떠한 부정적인 영향은 없었다.
본 연구에서는 양식 넙치의 주요 어병세균인 E. tarda, V. ichthyoenteri와 S. iniae에 대한 국내산 꿀벌로부터 분리한 봉독의 항균활성을 검색하였다. 그 결과 봉독은 폐사 납치로부터 분리한 그람음성균인 E. tarda, V. ichthyoenteri와 양성균인 S. iniae 모두에서 강한 항균 활성을 나타내는 것으로 확인되었다. 봉독은 E. tarda와 V. ichthyoenteri에 대하여 최소발육저지 농도는 각각 17.6 ${\mu}g$/ml, 1.76 ${\mu}g$/ml 였으며, 최소살균 농도는 34.6 ${\mu}g$/ml, 6.8 ${\mu}g$/ml, 항균력 지속시간은 5시간, 6시간으로 측정되었다. 또한 그람 양성균인 S. iniae에 대한 최소발육저지농도는 3.49 ${\mu}g$/ml, 최소살균농도는 11 ${\mu}g$/ml였으며, 항균력지속시간은 7시간으로 봉독은 매우 강한 증식 및 살균 억제력을 보였다. 뿐만 아니라, 다양한 pH 조건하에서도 향균활성이 유지되는 것으로 확인되었다.
Honey production from approximately 1.6 million colonies owned by about 199,000 Korean beekeepers was almost 23,000 metric tons in 2009. Nosema causes significant losses in honey production and the virus decreases population size. We initiated a survey of honey bee colonies on the blooming period of Acacia to determine the prevalence of Nosema and virus in 2011. Most Korean beekeepers have moved from the south to north of Korea to get Acacia nectar for 2 mon. This provided a valuable opportunity to sample bees originating from diverse areas in one location. Twenty hives owned by 18 beekeepers were sampled in this year. Nosema spore counts ranged from zero to 1,710,000 spores per bee. The average number of nosema spores per bee was 580,000. Approximately 95% of the colonies were infected with Nosema, based on the presence of spores in the flowering period of Acacia. This indicates that Nosema is the predominant species affecting honeybee colonies. Also, the seven most important honeybee viruses were investigated by reverse transcription-PCR. Among them, four different viruses were detected in samples. Black queen cell virus was present in all samples. Chronic bee paralysis virus was detected in 10% of samples. Deformed wing virus was present in only 5% of the samples. Prevalence of Sacbrood virus was 15%. However, Cloudy wing virus, Israel acute paralysis virus and kashmir bee virus were not detected in any of samples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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