An antimicrobial peptides-producing Bacillus strain CBS73 was isolated from fermented food (kimchi) that produces low-molecular-weight proteins with broad-spectrum antimicrobial activity. Our goal was to explore the therapeutic potential of antimicrobial substances produced by Bacillus species. Peptide CBS73 was purified from Bacillus subtilis subsp. subtilis with identity of 99.79%. It was found to be stable at pH 4.0-10.0 and temp $20-60^{\circ}C$. A protein band around 5.2 kDa was detected in tricine-SDS-PAGE and band was confirmed by MALDI-TOF test. Peptide CBS73 showed antimicrobial activity against MDR bacteria. The minimal inhibitory concentration (MIC) of peptide CBS73 for vancomycin-resistant S. aureus (VRSA), vancomycin resistant Enterococci (VRE) and Salmonella typhimurium ranged from $10-40{\mu}g/mL$. The antioxidant activity of peptide CBS73 was measured by DPPH scavenging, reducing power activity and total phenolic content. Cell viability and NO production result showed less cytotoxic effect upto $12{\mu}g/mL$. Peptide CBS73 could be a promising antimicrobial agent for clinical application.
Garlic (Allium sativum L.) contains a specific sulfur compound, the S-allyl derivative of L-cysteine sulfoxide, and has long been known for its antimicrobial activity against various microorganisms, including bacteria, fungi, and protozoa. The principal antimicrobial compound of garlic is S-allyl-L-propenethiosulfinate (allicin) which is generated by an enzyme, alliinase (L-cysteine sulfoxide lyase), from S-allyl-L-cysteine sulfoxide (alliin). This compound exists exclusively in Allium as a major non-protein sulfur-containing amino acid. S-Allyl-L-propenethiosulfinate belongs to the chemical group of thiosulfinates and is a highly potent antimicrobial. The potency of garlic extract is reduced during storage since thiosulfinates are unstable and are degraded to other compounds some of which do not have antimicrobial activity. Diallyl polysulfides and ajoene are sulfur compounds derived from allicin that do possess antimicrobial activity. It was recently found that garlic becomes antimicrobial on heating at cooking temperatures, and that the compound responsible for this is allyl alcohol, which is generated from alliin by thermal degradation.
Lee, Ye Jin;Kim, Chan-Hee;Oh, Hye Young;Go, Hye-Jin;Park, Nam Gyu
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.18
no.4
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pp.341-347
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2015
We evaluated the biological activities of five water extracts of tissue of the mottled anemone Urticina crassicornis. Most extracts exhibited broad-spectrum antimicrobial activity as determined by ultrasensitive radial diffusion assay (URDA) against gram-positive and -negative bacteria, including a fish pathogen, Aeromonas hydrophila, but no activity against fungi. The activity of the extracts was abolished by tryptic digestion, indicating that protein compounds were responsible for the antimicrobial activity. Furthermore, in a 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) free radical-scavenging activity assay, only the visceral tissue extract showed activity. However, no extract had hemolytic activity against human red blood cells. Consequently, this study suggests the water-soluble extract of mottled anemone to be a promising source of proteinaceous antimicrobial compounds that can be utilized for development of novel antibiotics.
To prove the extension of shelflife of soybean curd(Tofu) steeped in the diluted solution of botanical antimicrobial agent and stored at 20$^{\circ}C$, such chemical & microbial properties as the contents of moisture, crude protein and crude fat, colony count and surface color of Tofu were investigated in comparison with the control. Tofu treated with botanical antimicrobial agents showed higher contents of moisture, crude protein and crude fat compared to those of the control Tofu through all the storage period. After 7 days of the storage period, cell count of coliform bacteria reach 75 x 103CFU/m1 in the control Tofu, whereas 13∼39 CFU/ml in Tofu treated with botanical antimicrobial agent Treatment of Tofu with botanical antimicrobial agent seemed to be a potential method to prolong the shelflife of processed Tofu.
Kim, Woan-Sub;Kim, Pyeung-Hyeun;Shimazaki, Kei-ichi
Food Science of Animal Resources
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v.36
no.4
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pp.487-493
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2016
The antimicrobial activity of bovine lactoferrin hydrolysates (bLFH) was measured against Pseudomonas strains (P. syringae and P. fluorescens) in vitro. To compare susceptibility to bLFH, minimal inhibitory concentration (MIC) values were determined using chemiluminescence assays and paper disc plate assays. Antimicrobial effect against P. fluorescens was not observed by either assay, suggesting that bLFH did not exhibit antimicrobial activity against P. fluorescens. However, a significant inhibition of P. syringae growth was observed in the presence of bLFH. The addition of bLFH in liquid or solid medium inhibited growth of P. syringae in a dose-dependent manner. Furthermore, a bLFH peptide with antimicrobial activity toward P. syringae was isolated and identified. The N-terminal amino acid sequences of thus obtained antimicrobial bLFH peptides were analyzed by a protein sequencer and were found to be Leu-Arg-Ile-Pro-Ser-Lys-Val-Asp-Ser-Ala and Phe-Lys-Cys-Arg-Arg-Trp-Gln-Trp-Arg-Met. The latter peptide sequence is known to be characteristic of lactoferricin. Therefore, in the present study, we identified a new antimicrobial peptide against P. syringae, present within the N-terminus and possessing the amino acid sequence of Leu-Arg-Ile-Pro-Ser-Lys-Val-Asp-Ser-Ala.
Kim, Dae Hong;Lee, Ik Hwan;Nam, Seung Taek;Hong, Ji;Zhang, Peng;Lu, Li Fang;Hwang, Jae Sam;Park, Ki Cheol;Kim, Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.25
no.10
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pp.1640-1647
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2015
We recently reported that the antimicrobial peptide Lumbricusin (NH2-RNRRWCIDQQA), isolated from the earthworm, increases cell proliferation in neuroblastoma SH-SY5Y cells. Here, we investigated whether Lumbricusin has neurotropic activity in mouse neural stem cells (MNSCs) and a protective effect in a mouse model of Parkinson's disease (PD). In MNSCs isolated from mouse brains, Lumbricusin treatment significantly increased cell proliferation (up to 12%) and reduced the protein expression of p27Kip1 through proteasomal protein degradation but not transcriptional regulation. Lumbricusin inhibited the 6-OHDA-induced apoptosis of MNSCs, and also showed neuroprotective effects in a mouse PD model, ameliorating the motor impairments seen in the pole, elevated body swing, and rotation tests. These results suggest that the Lumbricusin-induced promotion of neural cell proliferation via p27Kip1 degradation has a protective effect in an experimental PD model. Thus, the antimicrobial peptide Lumbricusin could possibly be developed as a potential therapeutic agent for the treatment of PD.
Sung Wook Hong;Jong-Hui Kim;Hyun A Cha;Kun Sub Chung;Hyo Ju Bae;Won Seo Park;Jun-Sang Ham;Beom-Young Park;Mi-Hwa Oh
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.32
no.11
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pp.1462-1470
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2022
Natural antimicrobial substances are needed as alternatives to synthetic antimicrobials to protect against foodborne pathogens. In this study, a bacteriocin-producing bacterium, Bacillus subtilis HD15, was isolated from doenjang, a traditional Korean fermented soybean paste. We sequenced the complete genome of B. subtilis HD15. This genome size was 4,173,431 bp with a G + C content of of 43.58%, 4,305 genes, and 4,222 protein-coding genes with predicted functions, including a subtilosin A gene cluster. The bacteriocin was purified by ammonium sulfate precipitation, Diethylaminoethanol-Sepharose chromatography, and Sephacryl gel filtration, with 12.4-fold purification and 26.2% yield, respectively. The purified protein had a molecular weight of 3.6 kDa. The N-terminal amino acid sequence showed the highest similarity to Bacillus subtilis 168 subtilosin A (78%) but only 68% similarity to B. tequilensis subtilosin proteins, indicating that the antimicrobial substance isolated from B. subtilis HD15 is a novel bacteriocin related to subtilosin A. The purified protein from B. subtilis HD15 exhibited high antimicrobial activity against Listeria monocytogenes and Bacillus cereus. It showed stable activity in the range 0-70℃ and pH 2-10 and was completely inhibited by protease, proteinase K, and pronase E treatment, suggesting that it is a proteinaceous substance. These findings support the potential industrial applications of the novel bacteriocin purified from B. subtilis HD15.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.17
no.2
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pp.223-228
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2008
A novel beetle antimicrobial protein from stimulated Copris tripartitus and the corresponding gene were isolated in parallel through differential display-PCR and expression in Escherichia coli. To find cDNA clones responsible for bacteria resistance, the suppression subtractive hybridization and GeneFishing differentially expressed genes system were employed in the dung beetle, Copris tripartitus immunized with lipopolysaccaride. One cDNA clone from eight subtracted clones was selected through dot blot analysis and confirmed by northern blot analysis. The 516-bp, selected cDNA clone was determined by 5' and 3' rapid amplication of cDNA ends and cloned into the GST fusion expression vector pGEX-4T-1 for expression of the protein. The expressed protein was predicted 14.7 kDa and inhibited the growth of gram-negative bacteria such as Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. These results implied that the expressed protein is related to immune defense mechanism against microorganism.
The purpose of the study was to verify if or not as funtional food by estimating antitumor activity and antimicrobial activity of Coriolus versicolor(Fr.)Quel and Ganoderma Lucidum (Fr.)Karst. 1. The contents of moisture. crude fiber and crude protein of GL were higher $(18.28\%,\;10.3\%,\;78.4\%)$ than that of CV, but the content of crude lipid GL was higher than that of CV. 2. Inhibitory effects of on the growth of AGS human gastric adenocarcinoma cells and HT-29 human colon adenocarcinoma cell were increased by increasing of concentration in added methanol extracts of CV and GL. 3. Antimicrobial activity on Escherichia col1; Staphylococcus aureus, Salmonella typhimurium existed methanol extracts of CV. Therefore. it is suggested that CV is worth as functional food.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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