한방생약제의 항혈전 및 혈소판 응집 억제 효능을 탐색하기 위하여 하고초의 물 추출물로 혈전 용해능 활성과 혈액 응고시간 지연효과 즉 PT (prothrombin time), APTT (activated partial thromboplastin time)와 혈소판 응집억제 활성 등에 대해 항혈전 효능을 평가하였다. 혈전용해도를 측정하는 fibrin plate가 용해되어 형성된 투명환의 넓이를 측정하는 실험을 진행한 결과 혈전용해도가 농도의존적으로 효능을 나타내었다. 혈액 응고 cascade에 미치는 영향을 알아보기 위해 혈액 응고 시간 지연 및 단축 효과를 확인하고자 APTT와 PT에 미치는 영향을 조사한 결과 PT의 경우 10 mg/ml, 5 mg/ml의 경우에는 대조군보다 우수한 지연효과를 보였다. APTT의 경우에는 10 mg/ml, 5 mg/ml는 대조군과 비교하여 매우 탁월한 지연효과를 보이고, 2.5 mg/ml, 1.25 mg/ml에서도 높은 지연효과를 나타냈다. 혈소판의 응집에 따라 형성되는 두 전극 사이에 형성된 전기적 저항의 변화로 나타나는 실험을 시행한 결과 하고초의 ADP와 collagen에서 뛰어난 응집억제 활성을 보였다. 따라서 위의 항혈전 효능평가 실험결과를 볼 때 하고초를 향후에 혈전 질환의 치료제 개발에 효과적으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
Manganese superoxide dismutase (MnSOD) is a vital enzyme that protects cells from free radicals through eliminating superoxide radicals ($O^{2-}$). Hirudin, a kind of small active peptide molecule, is one of the strongest anticoagulants that can effectively cure thrombus diseases. In this study, we fused Hirudin to the C terminus of human MnSOD with the GGGGS linker to generate a novel dual-feature fusion protein, denoted as hMnSOD-Hirudin. The hMnSOD-Hirudin gene fragment was cloned into the pET15b (SmaI, CIAP) vector, forming a recombinant pET15b-hMnSOD-Hirudin plasmid, and then was transferred into Escherichia coli strain Rosetta-gami for expression. SDS-PAGE was used to detect the fusion protein, which was expected to be about 30 kDa upon IPTG induction. Furthermore, the hMnSOD-Hirudin protein was heavily detected as a soluble form in the supernatant. The purification rate observed after Ni NTA affinity chromatography was above 95%. The hMnSOD-Hirudin protein yield reached 67.25 mg per liter of bacterial culture. The identity of the purified protein was confirmed by western blotting. The hMnSOD-Hirudin protein activity assay evinced that the antioxidation activity of the hMnSOD-Hirudin protein obtained was $2,444.0{\pm}96.0U/mg$, and the anticoagulant activity of the hMnSOD-Hirudin protein was $599.0{\pm}35.0ATU/mg$. In addition, in vitro bioactivity assay showed that the hMnSOD-Hirudin protein had no or little cytotoxicity in H9c2, HK-2, and H9 (human $CD_4{^+}$, T cell) cell lines. Transwell migration assay and invasion assay showed that the hMnSOD-Hirudin protein could suppress human lung cancer 95-D cell metastasis and invasion in vitro.
The primary objective of this study was to determine the effects of abalone in reducing blood pressure and increasing anti-coagulant capacity. The serum angiotensin-converting-enzyme (ACE) activities of rats on an abalone-supplemented diet did not significantly differ from the ACE levels of rats on a normal diet, at any time (before the experiment, or 1 week, 2 weeks, 3 weeks, and 4 weeks, after commencement of the abalone diet) during the experiment. This result showed that abalone-supplemented diets had no effect on the activity of ACE, which controls blood pressure. To determine if an abalone-containing diet might increase anti-coagulant capacity, both prothrombin (PT) and activated partial thromboplastin time (APTT) levels were measured. The PT levels of control rats remained constant throughout the experiment. In rats fed the abalone-containing diet, PT levels increased with time, and the increase became statistically significant after 2 weeks, when compared to pre-trial PT levels. Control rats showed no significant change in APTT levels over time. The rats fed abalone, however, showed significant differences in APTT levels. Specifically, when pre-trial APTT levels were compared with 4-week levels, and when 1-week levels were compared with 4-week levels, the differences attained statistical significance. These results indicate that an abalone-supplemented diet may inhibit blood coagulation in normal rats. The results of this study prove the inherent health value of abalone, and may encourage investment in the seafood industry. Future studies will explore other possible beneficial effects of abalone, apart from the anti-hypertension and anti-coagulant effects examined above.
Dendranthema spp are distributed in various regions in Korea. This report is the quantitative results of phenolic compounds on the 5 resources collected from all over the country. It was known that it has phenolic compounds, as an anticoagulant activities and immunoadjuvant activity of contribute to the cardiovascular effects. This was used for quantitative analysis of chlorogenic acid(CA), 3,5-Dicaffeoylquinic acid(3,5-DCA), 4,5-Dicaffeoylquinic acid(4,5-DCA) and linarin, with UPLC-PDA and LC-IT-TOF-MS. Extraction efficiency of compounds was compared by using ultrasonic extraction and reflux extraction with different extraction conditions (methods and time). In 50% MeOH extracs (30 mins) of Dendranthema zawadskii (Herb.) Tzvelev (SDZ), Dendranthema zawadskii var. yezoense (Maek.) Y.M.Lee & H.J.Choi (NDZ), Dendranthema zawadskii (Herb.) Tzvelev var. teuisectum (Kitag.) J. H. Pak (GDZ), Dendranthema careanum (H. $L{\acute{e}}v$. & Vaniot) Vorosch. (HDC) and Dendranthema zawadskii var. tenuisectum Kitag (PDZ), chlorogenic acid contents were 1.14‰, 6.95‰, 7.27‰, 1.47‰ and 2.64‰, 3,5-dicaffeoylquinic acid contents were 3.30‰, 5.60‰, 10.81‰, 2.67‰ and 1.50‰, 4,5-dicaffeoylquinic acid contents were 0.74‰, 1.93‰, 3.36‰, 0.61‰ and 0.43‰ and linarin contents were 3.90‰, 10.15‰, 0.15‰, 0.73‰ and 0.21‰, respectively.
4년령의 잉글리시쉽독이 4일간의 호흡곤란과 비출혈로 본 건국대학교 수의과대학 동물병원에 내원하였다. 항응고제인 살서제의 섭취는 vitamine K1의 재생을 방지하여 순환 응고인자의 활성을 감소시킨다. 따라서 살서제에 중독이 되었을 때, 빠르고 적절한 치료가 수행되지 않으면 심각한 출혈로 인해 의식불명에 빠지고 심지어는 생명을 위협하기도 한다. 본 증례에서는 의식혼탁과 후궁반장의 임상증상을 보이는 4년령의 중성화된 개의 성공적인 치료를 보고하고자 한다. 적절한 수혈요법과 vitamin K1를 이용한 효과적인 치료를 실시하여 임상증상의 현저한 개선을 보였으며, 환축은 현재 완치되어 건강한 삶을 살고 있다.
Volatile components of crude fucoidan and its raw material, Undaria pinnatifida sporophylls were identified by GC/MSD analysis, and the effects of a combined method of solvent extraction and drying (hot-air drying or spray drying) on deordorization of fucoidans were examined. The major components of seaweed smell (odor) in crude fucoidan and Undaria pinnatifida sporophylls were identified as alkanes (octadecane, heptadecane, tetradecane) and acids (hexadecanoic acid, oleic acid). Solvent extraction and drying were combined for the deordorization of fucoidans: hot-air drying/deordorization process (HDDP) and spray drying/deordorization process (SDDP). The deordorization effects of solvent extraction using solvents including water, ethanol, and acetone were investigated. Among the tested solvents, ethanol was selected as a deordorization solvent, because the seaweed smell and taste were mostly lowered by ethanol extraction followed by drying. In addition, HDDP and SDDP were compared, showing that SDDP gave higher sensory characteristics than HDDP. When the crude fucoidan was treated by ethanol extraction for 30 min followed by SDDP, approximately 60% of off-flavor components of crude fucoidan was removed based on GC/MSD peak area, and the total sugar and sulfate contents and APTT-anticoagulant activity significantly increased compared to crude fucoidan. In conclusion, SDDP after ethanol treatment was proposed and established as a deordorization process for fucoidan preparation.
The aim of the study was to evaluate the effect of sodium nitrate consumption on egg quality and quantity, and some blood parameters of native breeder hens of West Azerbaijan province. One hundred native hens were used from wk 25 to 32 of age. These birds were divided into two groups. One group was fed the control diet (CD) but the other fed the same diet supplemented with 4.2 g/kg sodium nitrate (ND). After 2 wks of adaptation, eggs were collected daily and egg mass and egg production were measured weekly for five weeks. To assess the egg quality parameters, two eggs from each replicate pen were collected for three consecutive days each week. At the end of experimental period (wk 32 of age), blood samples of 5 birds per replicate were collected from the wing vein into anticoagulant tubes. Dietary sodium nitrate didn't affect the egg production, shell stiffness, shell thickness and Haugh unit (p>0.05) but it decreased the both egg production and egg mass during the last three weeks (wks 30, 31 and 32) (p<0.05). Furthermore, a treatment effect was observed for yolk colour (p<0.05). Both the egg production and egg mass were increased over time (p<0.05). No significant treatment${\times}$time interaction was observed for egg weight, egg production and egg mass (p>0.05). No effect of time or treatment${\times}$time were observed for shell stiffness (p>0.05). Over time, shell thickness was decreased while Haugh unit increased (p<0.05). None of the blood TP and TG or the activity of ALT, AST and LDH enzymes were affected by dietary consumption of sodium nitrate at wk 32 of age (p>0.05). Sodium nitrite decreased both the TAC and TC at wk 32 of age (p<0.001). It was concluded that the lower body antioxidant capacity of nitrate fed birds resulted in the lower performance (egg weight, egg production and egg mass).
Kim Dong Chung;In Man-Jin;Lee Ji Young;Hwang Yoon Kyung;Lee Sung Dong
Journal of Ginseng Research
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제23권4호
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pp.217-221
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1999
홍삼으로부터 염기성 수웅액 추출, 음이온교환 크로마토그래피 및 겔여과 크로마토그래피를 순차적으로 수행하여 항트롬빈 활성을 보이는 다당체를 분리하였다. 이 다당체는 셀룰로스 아세테이트막을 사용한 전기영동에서 하나의 띠로 나타나 비교적 순수하게 정제되었음을 알 수 있었고, 겔여과 크로마토그래피에서 결정된 평균 분자량은 약 177kDa이었다. $40.2\%$의 유론산, $9.2\%$의 황산기 및 $1.5\%$의 단백질을 포함하는 산성다당체였고, 구성 중성당으로 rhamnose, mannose, galactose, arabinose, glucose, fucose, xylose를 1.00 : 0.88 :0.86 : 0.78 : 0.70 : 0.33 : 0.22의 비율로 포함하고 있었다. 이 다당체는 트롬빈에 의한 피브리노겐의 응고를 농도에 비례하여 저해하였고, 혈장을 사용한 실험에서 내인성 경로를 통해 혈액응고를 저해하는 것으로 나타났다.
Thrombocytopenic patients without detectable bound antiplatelet antibody should be diagnosed with idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP) if no other cause of their decreased platelet count could be found. More recently the term "autoimmune thrombocytopenic purpura (ATP) has supplanted ITP since the disease is related to the production of autoantibodies against one's own platelets. This entity should not be confused with isoimmune thrombocytopenic purpura (also called alloimmune thrombocytopenic purpura). In this cases maternal antiplatelet antibodies directed against the PLA 1 antigen on the fetal platelets causes severe fetal and neonatal thrombocytopenia in a situation analogous to Rheusus disease. Antibodies to the negatively charged phospholipids, lupus anticoagulant, and anticardiolipin have been linked to adverse pregnancy events. Pregnant women possessing these antibodies have an increased risk of spontaneous abortion, stillbirths, intrauterine fetal growth retardation, preterm birth, and arterial and venous thrombosis. Antiphospholipid antibodies decrease or may even disappear between pregnancies only to recur with increased activity in a subsequent pregnancy and lead to loss. We have experienced a case of antiphospholipid syndrome associated with autoimmune thrombocytopenic purpura in patient with recurrent spontaneous abortion. So we report this case with a brief review of literatures.
Seow, Lay-Jing;Beh, Hooi-Kheng;Ibrahim, Pazilah;Sadikun, Amirin;Asmawi, Mohd Zaini
셀메드
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제2권2호
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pp.20.1-20.5
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2012
$Gynura$$segetum$ (Lour.) Merr. ($Compositae$) is a well recognized medicinal plant in Indonesia and Malaysia. It is believed to have an anticoagulant effect and is used in treating snake-bites, inflammations and other skin afflictions. This study was carried out to evaluate the antimicrobial effects of $Gynura$$segetum$ leaves extracts and its fractions. The chemical compositions of the active extracts were also determined. The antimicrobial activities of different solvent extracts of leaves of $Gynura$$segetum$ were evaluated using the agar well-diffusion method. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of the active subfractions was determined by the tube dilution method. Gas Chromatography-mass spectrometry (GC-MS) analysis was carried out to identify the chemical compositions of the active extracts. The ethyl acetate fraction and its subfraction E4 performed potent antimicrobial activities and fifteen known chemical constituents were identified by GCMS analysis as 4-vinylphenol, 1-tetradecene, phenol, 2,4-bis(1,1-dimethylethyl), 1-hexadecene, E-15-heptadecenal, hexadecanoic acid, 1,2-benzenedicarboxylic acid, dibutyl ester, 1-docosene, octadecanoic acid, 1-eicosene, cyclotetracosane, 1,2-benzenedicarboxylic acid, bis(2-ethylhexyl)ester, butanedioic acid, monomethyl ester, niacin and 4-hydroxy-benzoic acid. The results of this study suggested a connection between the antimicrobial activities and the chemical structures. The plant may be used as a potential source for antimicrobial agents.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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