담배에서 약배양에 의한 반수체육종을 실용화하고 저 중촌등의 'D'배지를 이용하여 실험을 하였든바 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 배양약중 평균 30% 이상이 반수농식물을 유기하였으며 약당 유기된 식물개체수는 평균 6주이상이었다. 2. F$_1$으로부터 유기된 반수체중 T.M.V 저항성은 이론치와 일치하는 1 : 1의 비를 나타내었다. 3. 반수체식물의 생육조사에서는 예기한바와 같이 모든 측정형질에 대하여 F$_1$의 반수체가 모본의 반수체보다 더큰 변이를 보였다.큰 변이를 보였다.
타가수정작물인 옥수수, 진주조, 메밀의 약 또는 조직배양기술의 향상을 위한 유전자형 및 문제점들을 찾아내어 개선하기 위하여 1988년 작물시험장 약 및 조직배양 연구실에서 실시한 주요연구결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 옥수수 약배양에서 FR1141/FR16 교잡종이 N6배지에서, Fla 2BT 73/S 6013 교잡종은 5$^{\circ}C$에서 7일간 저온전처리를 한 후 MS배지에 치상하였을 때 callus가 형성되었으나 27 공시 교잡종의 전체 37,450 약중에서 단지 두 개만이 callus가 형성되었다. 2. 옥수수 수원 19호의 미숙배를 MS 배지에 치상하였을 때 모두 callus가 형성되었으며 이 callus로부터 녹색체 분화율은 8.6%이었다. 3. 옥수수 수원 99호 등 20품종의 미숙웅수배양에서는 FR1141/FR16, B68/A116N//KS15, KS16/KS17, Ga209/DN578, SDB126/Ga209 교잡종 등에서 callus 형성율이 비교적 높았다. 4. 진주조$\times$Napier grass 종간교잡종의 조기배양에서 간의 조기ㅐ양에 적합한 절간신장부위의 절편크기가 2.5~4.0mm 이었고 callus 형성율이 50~100%로 비교적 높았다. 5. 메밀 신농 1호 식물체 분화율은 27%이었다. Epicotyl에서 유도한 callus에서 1개 식물체가 분화하였다. 6. 타가수정작물인 옥수수, 진주조, 메밀의 유전자형$\times$배지 및 환경 상호작용이 있어 유전자형에 따라서 약 및 조기배양반응이 크게 달랐다.
Doubled haploids have long been recognized as a valuable tool in plant breeding since it not only offers the quickest method of advancing heterozygous breeding lines to homozygosity, but also increased the selection efficiency over conventional procedures due to better discrimination between genotypes within any one generation. Salt tolerant mutants were obtained in rice the variety, 'Hawsungbyeo', through in vitro mutagenesis of in vitro cultured anther-derived calli. Various doses (30, 50, 70 and 90 Gy) of gamma ray were applied to investigate the effect of radiation on callus formation on medium containing 1% NaCl, green plant regeneration, frequency of selected doubled haploid mutants and of the salt tolerant screen. It was demonstrated that the dose of 30 and 50 Gy gamma rays had significant effects on callus formation, regeneration and selection of salt tolerance. No tolerant lines were obtained from non-mutagenized cultures. From gamma ray irradiated cultures, five tolerant lines ($M_2$generation) at germination stage and 13 tolerant lines ($M_3$genoration) at seedling stage were obtained. The frequency of salt tolerant mutants indicates that anther culture applied in connection with gamma rays is an effective way to improve salt tolerance.
To study the effect of genotype of donor plants on anther culture, anthers of nine hybrid cultivars (Derby, Special, Bossanova, Minipaprika, Fiesta, Boogie, Phenlene, Kufrah, and Clarity) of sweet pepper (Capsicum annuum L.) were cultured in a petridish containing C medium (Sibi, Dumas De Vaulx medium) supplemented with 0.1 mg/L 2,4-D and 0.1 mg/L kinetin, 3% sucrose and 0.32% Phytagel. The cultures were incubated in the dark at $35^{\circ}C$ for seven days, and then cultured at $25^{\circ}C$ with a photoperiod of 16 hr. daylength for 40 days. Frequency of callus formation and plant regeneration was varied among cultivars. Callus formation was ranged from 6% in Phenlene to 69.8% in Kufrah. The highest percentage of regenerated plantlets was obtained in cv. Phenlene (2.67%) followed by Bossanova (2.41%). Result of ploidy analysis; chromosome number observation and flowcytometry analysis, showed that haploid plants could be developed from all of these hybrid cultivars except cv. Fiesta, where highest percentage of haploid plants were obtained in Minipaprika (40%) followed by cv. Bossanova (36.1%). Haploid plants derived from these hybrid cultivars contained single set of chromosome (12 in numbers), higher stomata density (numbers), and smaller sized stomata as compare to diploid plants. The mean length of stomata was 26.9 ${\mu}m$ in haploid plants and 35.7 ${\mu}m$ in diploids.
고추 (Capsicum annuum L.)의 일대잡종을 이용하여 모본의 유전자형 및 생태형이 약배양 효율에 미치는 영향을 조사하였다. 모본의 유전자형에 따라 약배양 효율에 차이를 보였다. 또한 약배양 효율은 모본으로 배 발생률이 낮은 계통보다 높은 계통을 사용한 교배조합에서 높아 약배양 효율에 세포질 효과가 있는 것으로 나타났다. 또한 생태형에 따른 배 발생 효율은 재래종$\times$피망 교배조합에서 배 발생률이 17.8~46.1%로 가장 높았고, 피망$\times$재래종 조합은 5.4~8.5%의 배발생률을 보여 가장 낮았다. 재래종 $\times$남방계, 남방계 $\times$재래종, 남방계 $\times$피망, 피망 $\times$남방계 교배조합의 배 발생률은 10.5~23.1%로 비교적 중간값을 보였다.
국내 시판 $F_1$ 4품종과 일본 시판종 1품종을 이용하여 무 약배양을 실시하였다. 무 약배양에 적합한 배지 및 적정 전처리 및 치상후 처리 조건을 구명하기 위하여 $4^{\circ}C$ 전처리 및 치상 후 $35^{\circ}C$ 처리를 병행처리 또는 단독처리하여 약배양에 미치는 영향을 조사하였고, 적정 치상 시기를 결정하고자 약을 치상하는 시기에 따른 배발생율을 조사하였다. 이상의 실험 결과를 요약하면 다음과 같다.1. 무 약배양은 아직까지는 품종간 배발생율의 차이가 두드러지게 나타나고 있어 태백의 경우는 배발생이 잘 되는 품종으로 밝혀졌고, 배발생율은 태백, 백자, 그리고 일본 품종인 대청 및 박달의 순으로 좋았다.2. 배지는 N/N 배지를 기본배지로하고 호르몬을 NAA 0.1 mg/l 와 BAP 0.05mg/l 첨가한 배지가 배발생에 가장 효과적이었다.3. 그러나 배지간 배발생율 차이는 $4^{\circ}C$ 전처리에 영향을 받아 배발생율이 다르게 나타나는 것으로 나타났다.
Herbicide tolerant rice (Oryza sativa L. cv. Ilpumbyeo) cell lines were selected from $\gamma$-ray-irradiated anther-derived cell cultures. The anther-derived cell clusters were small (300 to 400 ${\mu}{\textrm}{m}$ in diameter) and uniform ones that were screened by miracloth filtering. The cell suspensions were very efficient to plate one layer onto agar medium and to screen target cell lines. Herbicide tolerant cell lines were selected by 5 mg/L cyhalofop butyl (CHB) treatment by using the small cell suspensions on agar N6 medium containing 1 mg/L 2,4-D and 0.2 mg/L kinetin. Of the cell lines, one line (CHB-1) showed stable tolerance at 10 mg/L concentration after 6-month culture without herbicide suspension. Growth stability of CHB-1 was similar to that of control cell line on 10 mg/L CHB containing medium. In this experiment we established herbicide tolerant cell line selection system by using anther-derived uniform-cell suspensions with $\gamma$-ray-irradiation.
The research concerned of the regeneration of plants from embryos obtained from anther cultures of ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer). The aim was to determine the influence of the regeneration medium on the efficiency of the regeneration process. We conducted to determine the optimum conditions such as cold pretreatment, plant growth regulators and carbon sources on anther culture of P. ginseng. Highest callus formation rate was obtained when flower buds pretreated at $4^{\circ}C$ for 1 day. Among the treated growth regulators with various degrees of concentration in Murashige and Skoog's (MS) medium, 4.53 ${\mu}M$ of 2.4-dichlorophenoxyacetic acid and 4.44 ${\mu}M$ of 6-benzylaminopurine gives the most responsive callus with the frequency of 73.89% and 129.53 g of fresh weight. When we used 3-9% of sucrose and maltose among the different kinds and various concentrations of carbohydrates, callus was formed highest 67.29% in the medium with 3% of sucrose. Shoots induced from callus supplemented with 28.9 ${\mu}M$ of gibberellic acid and rooted in Gamborg's B5 medium supplemented with 14.7 ${\mu}M$ of indole-3-butyric acid.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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