To isolate of antagonistic bacteria to Phytophthora capsici, which cause Phytophthora blight in red pepper, 237 isolates of Pseudomonas spp. and 260 isolates of Bacillus spp. were screened in selective media from rhizosphere soils of red pepper at Kyongsan, Kyongju, Yongchon and Euisung in Kyongbuk. Among total 497 isolates, 8 isolates of Pseudomonas spp and 4 isolates of Bacillus spp. inhibited the mycelial growth of Phytophthora capsici above 50$\%$ . These antagonistic bacteria showed more inhibitory effect on TSA (tryptic soy agar) than V-8 juice agar. Four isolates, P0704, P1201, B1101 and B1901, showing the most prominent antagonistic activity were selected and identified as P. cepacia (P0704, P1201), B. polymyxa (B1101) and B. subtilis (B1901), respectively. Cell free filtrates of these isolates were shown to inhibit zoosporangia germination and mycelial growth of p. capsici indicating that these isolates turned out to be bacteria producing antifungal substances. As a result of antagonistic test to Phytophthora blight in green house p. cepacia (P0704) showed the highest antagonistic effect with 46.7$\%$ and the rest of them were in the range of 13.4$\%$ to 26.7$\%$ .
Kim, Young Soo;Kotnala, Balaraju;Kim, Young Ho;Jeon, Yongho
Journal of Ginseng Research
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v.40
no.4
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pp.453-461
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2016
Background: This study aims to describe the characterization of Paenibacillus polymyxa GBR-1 (GBR-1) with respect to its positive and negative effects on plants. Methods: The morphological characteristics of GBR-1 were identified with microscopy, and subjected to Biolog analysis for identification. Bacterial population and media optimization were determined by a growth curve. The potential for GBR-1 as a growth promoting agent, to have antagonistic activity, and to have hydrolytic activity at different temperatures was assessed. The coinoculation of GBR-1 with other microorganisms and its pathogenicity on various stored plants, including ginseng, were assessed. Results: Colony morphology, endospore-bearing cells, and cell division of GBR-1 were identified by microscopy; identification was performed by utilizing the Biolog system, gas chromatography of fatty acid methyl esters (GC-FAME). GBR-1 showed the strongest antagonistic activity against fungal and bacterial pathogens. GBR-1 cell numbers were relatively higher when the cells were cultured in brain heart infusion (BHI) medium when compared with other media. Furthermore, the starch-hydrolytic activity was influenced by GBR-1 at higher temperature compared to low temperatures. GBR-1 was pathogenic to some of the storage plants. Coinoculation of GBR-1 with other pathogens causes differences in rotting on ginseng roots. A significant growth promotion was observed in tobacco seedlings treated with GBR-1 suspensions under in vitro conditions, suggesting that its volatile organic compounds (VOCs) might play a role in growth promotion. Conclusion: The results of this study indicate that GBR-1 has both positive and negative effects on ginseng root and other stored plants as a potential biocontrol agent and eliciting in vitro growth promotion.
Ji, Seung Hyun;Paul, Narayan Chandra;Deng, Jian Xin;Kim, Young Sook;Yun, Bong-Sik;Yu, Seung Hun
Mycobiology
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v.41
no.4
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pp.234-242
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2013
A total of 62 bacterial isolates were obtained from Gomsohang mud flat, Mohang mud flat, and Jeju Island, Republic of Korea. Among them, the isolate CNU114001 showed significant antagonistic activity against pathogenic fungi by dual culture method. The isolate CNU114001 was identified as Bacillus amyloliquefaciens by morphological observation and molecular data analysis, including 16SrDNA and gyraseA (gyrA) gene sequences. Antifungal substances of the isolate were extracted and purified by silica gel column chromatography, thin layer chromatography, and high performance liquid chromatography. The heat and UV ray stable compound was identified as iturin, a lipopeptide (LP). The isolate CNU114001 showed broad spectrum activity against 12 phytopathogenic fungi by dual culture method. The semi purified compound significantly inhibits the mycelial growth of pathogenic fungi (Alternaria panax, Botrytis cinera, Colletotrichum orbiculare, Penicillium digitatum, Pyricularia grisea and Sclerotinia sclerotiorum) at 200 ppm concentration. Spore germ tube elongation of Botrytis cinerea was inhibited by culture filtrate of the isolate. Crude antifungal substance showed antagonistic activity against cucumber scleotiorum rot in laboratory, and showed antagonistic activity against tomato gray mold, cucumber, and pumpkin powdery mildew in greenhouse condition.
Antagonistic effects of Streptomyces species aganinst Fusarium solani causing ginseng root rot were investigated in terms of chitinase activity and growth inhibition in vitro. Among 131 isolates of streptomycetes obtained from ginseng cultivating soil, 9 isolates producing large clear zone around the colony on a chitin agar medium were selected for further study. All 9 isolates produced chitinase in a range from 0.10 to 0.38 U lysing cells of F. solani and inhibited germination of the conidia. In the ten-fold condentrated culture filtrate of S. alboniger ST59 and S. roseolilacinus ST129, the number of conidia of F. solane was reduced to about 20% of original count within 14 days. When S. alboniger ST59 and F. solani were grown simultaneously in the mineral saly medium, chitinase activity increased with incubation period, whereas mycelial volume of F. solani decreased. In a chitin added mineral salt medium, chitinase activity increased during the first four days and maintained steady level until the 8th day, and increased thereafter. S. alboniger ST59 lysed mycelia, conidia and even chlamydospores of F. solani. It is probable that the antagonistic activity of this streptomycete against F. solani is the lysis of fungal cell wall by streptomycete producing chitinase affected by antifungal substances.
79종의 식물재료의 Alternaria alternata에 대한 항균활성을 조사한 결과, 7가지 식물재료가 항균활성이 있었고, 11가지는 확실치 않았으며, 나머지 61가지는 항균활성이 나타나지 않았다. A. alternata에 항균활성이 나타난 7가지 식물재료 중 계피가 활성이 가장 높았으며, 오미지와 천궁이 중정도의 활성을 보였으며, 나머지는 약한 활성을 나타내었다. 항균 활성 성분은 계피와 천궁의 경우는 diethyl ether에 분리되었고, 오미자의 경우는 butanol에 분리되었다. 계피의 diethyl ether 추출물은 1,000 배액 이하에서 식별 가능한 항균활성이 나타났다. 계피의 성분으로 cinnam aldehyde가 가장 높은 활성을 보여, 이 물질이 계피의 주요 항균물질로 사료된다.
Among 131 isolates of Strptomyces obtained from ginseng cultivating soil, the two isolates ST59 and ST129 showing high antagonistic activity to Fusarium solani(Mart.) Appel & We. causing ginseng root rot were identified. The two isolates were identified Streptomyces alboniger Porter, et al. and Strptomyces reseolilacinus Pridham, et al., respectively, based on mrophology, cultural, and physiological characteristics on various culture media. Spore chains of ST59 and ST129 were flexuous(RF) and coiled(S). Spore surfaces of two isolates were all smooth. Aerial mass color of ST59 was white series and ST129 red series.
To examine the control effect of damping-off on radish caused by Pythium spp., researchers used the isolates of a fungivorous nematode, Aphelenchus avenae, and antagonistic fungi, Trichoderma spp. These were used as biocontrol agents, either alone, or in combination. Growth rates of the A. avenae isolates and fungal damages by the nematodes varied depending on Trichoderma spp., which contained lower T. koningii and T. virens cultures than other Trichoderma cultures. Phythium spp. were damaged by all five Aphelenchus isolates, but the multiplication rate of nematode isolate Aa-3 was very poor. Antibiotic activity of T. virens and T. harzianum to Pythium spp. was stronger than that of T. koningii. Control efficacy against damping-off of radish was most enhanced under the treatment using the nematode-T. harzianum combination. On the contrary, the combinations of the nematodes and T. virens or T. koningii mostly did not increase or decreased their control effect vis-$\`{a}$-vis that of the nematodes or antagonistic fungi being used alone. The results suggest that the fungivorous nematodes may play a leading role in the disease control, and that the activity of the fungivorous nematodes may be activated by T. harzianum, but inhibited by T. koningii and T.virens.
Background: Rhizobacteria play an important role in plant defense and could be promising sources of biocontrol agents. This study aimed to screen antagonistic bacteria and develop a biocontrol system for root rot complex of Panax notoginseng. Methods: Pure-culture methods were used to isolate bacteria from the rhizosphere soil of notoginseng plants. The identification of isolates was based on the analysis of 16S ribosomal RNA (rRNA) sequences. Results: A total of 279 bacteria were obtained from rhizosphere soils of healthy and root-rot notoginseng plants, and uncultivated soil. Among all the isolates, 88 showed antagonistic activity to at least one of three phytopathogenic fungi, Fusarium oxysporum, Fusarium solani, and Phoma herbarum mainly causing root rot disease of P. notoginseng. Based on the 16S rRNA sequencing, the antagonistic bacteria were characterized into four clusters, Firmicutes, Proteobacteria, Actinobacteria, and Bacteroidetesi. The genus Bacillus was the most frequently isolated, and Bacillus siamensis (Hs02), Bacillus atrophaeus (Hs09) showed strong antagonistic activity to the three pathogens. The distribution pattern differed in soil types, genera Achromobacter, Acidovorax, Brevibacterium, Brevundimonas, Flavimonas, and Streptomyces were only found in rhizosphere of healthy plants, while Delftia, Leclercia, Brevibacillus, Microbacterium, Pantoea, Rhizobium, and Stenotrophomonas only exist in soil of diseased plant, and Acinetobacter only exist in uncultivated soil. Conclusion: The results suggest that diverse bacteria exist in the P. notoginseng rhizosphere soil, with differences in community in the same field, and antagonistic isolates may be good potential biological control agent for the notoginseng root-rot diseases caused by F. oxysporum, Fusarium solani, and Panax herbarum.
For the development of a biological control method against B. cereus in cheonggukjang, 20 Bacillus spp. were isolated from the naturally fermented baektae and heuktae cheonggukjang, identified by using 16S rDNA sequences. Among the isolated strains, Bacillus sp. SC-8 was selected using the B. cereus lawn cell assay as an antagonistic microorganism against B. cereus. The culture medium of Bacillus sp. SC-8 after 24 hr of incubation at $37^{\circ}C$ also evidenced a high level of antagonistic activity. In cheonggukjang fermented with the mixed culture of Bacillus sp. SC-8 and B. cereus, antagonistic effect against B. cereus was maintained during the fermentation of cheonggukjang, while its effect was reduced during storage at $4^{\circ}C$ due to the decrement of cell population of Bacillus sp. SC-8. In Bacillus sp. SC-15, which was utilized a control, antagonistic activity against B. cereus was not demonstrated on the lawn cell plate assay and culture medium, but its effects were detected in cheonggukjang. Therefore, the production of antagonistic substances of Bacillus spp. depends on the fermentative environment.
This study was performed to investigate the antagonistic properties of mushroom strains against Korean oak wilt pathogen (Raffaelea quercus-mongolicae) by assessing their predominance on potato dextrose agar plates after pairing culture. Among the total of 158 strains of mushroom tested, thirty-three strains showed no antagonistic activities against the pathogen in both the short term (6~7 days) and long term (27~31 days). Ninety-six strains of tested mushrooms had a weak or no long term antagonistic activity. The antagonistic activities of 29 strains were higher than those of other strains with the levels of $\geq$ R+ and $\geq$ R for short and long term, respectively. We found that these strains with antagonistic activities against R. quercus-mongolicae belong to the species of mushrooms living on different host plants such as conifers, oaks and other broad-leaved trees. In order to use the trees damaged by Korean oak wilt as a resource(bed-log) for cultivating mushrooms, seven strains of antagonist 29 strains were selected as follows; Laetiporus sulphureus KFRI 654, Laetiporus miniatus KFRI 914, Lentinula edodes KFRI 269 and 764, Pycnoporus coccineus KFRI 588, Schizophyllum commune KFRI 832 and Trametes versicolor KFRI 100.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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