This study reports light and electron microscope examination of rumen fungal colonization of alkali-treated roughage feeds incubated in decron bags in the rumen of cannulated sheep for varying time intervals. Six roughages, pre-treated with ammonium hydroxide or sodium hydroxide at 4% (w/w) level were examined together with untreated control samples. Alkali pre-treatment was associated with an earlier and more pronounced fungal colonization than all control roughages. Sodium hydroxide pre-treatment was significantly more effective than ammonium hydroxide in improving the susceptibility of roughages to rumen fungal colonization and studies by SEM showed that the pre-treatment permitted greater penetration of feeds by fungi. Sodium hydroxide pre-treatment also significantly increased dry matter disappearance from feed held in Dacron bags in the rumen with all feeds except Lucerne stem. It is not known to what extent fungal activity contributed to increased breakdown of the feeds.
The study was to see the effect of administration of ruminal fungi on feed intake, growth rate, rumen fermentation and nutrient digestion of calves (Tharparkar$\times$Holstein-Friesian, average age: 10 months, average body weight: 130 kg). The 6 calves in first group were fed a mixture consisted of 50% wheat straw and 50% concentrate (Maize 62%, Groundnut cake 35%, Mineral mix. 2% and Common salt 1%) along with 1 kg green oats $animal^{-1}$$day^{-1}$ while second group calves were fed the above-mentioned diet in addition to a dose of 160 ml ($10^{6}$ CFU/ml) fungal culture $calf^{-1}$$week^{-1}$. The average dry matter intake per day was slightly lowered in fungal fed calves yet feed conversion ratio was higher. The average daily weight gain was significantly higher (15.37%) in fungal administered group as compared to control. The nutrient digestibility was increased for crude fibre, NDF and ADF with fungal administration. Digestible energy value of straw-based diet in terms of percent TDN also increased. The pH and $NH_{3}$-N were lower whereas TVFA, total-N, TCA-N and number of zoospores were higher in rumen liquor in fungal administered group.
Studies were made of digestion of timothy (Pheleum pretense) hay, tall fescue (Festuca elatior) hay, and rice (Oryza sativa) straw in pure cultures of rumen anaerobic fungus, Neocallimastix frontails MCH3. The fungus was inoculated on ground forages (1%, w/v) in an anaerobic medium and incubated at $39^{\circ}C$. Incubation was continued for 24, 48, 72 and 96 h. The losses of dry matter, xylose and glucose of forage during incubation were determined at the end of these incubation periods. Xylose and glucose were considered to be released from xylan and cellulose, respectively. The digested xylan to digested cellulose (X/C) ratios of the substrate were calculated. Xylanase and carboxymethyl cellulose (CMCase) of culture supernatant and residual substrate was measured at the same time. The X/C ratios in the cultures on timothy hay and rice straw were greater than 0.5 in the first 24-h incubation period. The values were smaller than 0.3 in tall fesque. The ratio of xylanase activity to that of CMCase in the first 24-h incubation period correlated well with the traits in X/C ratio. However xylanase activity was still superior to CMCase in the following incubation period (48 to 96 h), although the glucose (designated as cellulose) was more intensively digested than xylose (designated as xylan). The production of these polysaccharidases appeared to correlate with substrate cell-wall sugar composition, xylose to glucose ratios, at the beginning of fast growing period.
Kim, Hong-Lim;Weon, Hang-Yeon;Sohn, Bo-Kyun;Choi, Young-Hah;Kwack, Young-Bum
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.42
no.5
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pp.341-347
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2009
Soil microbial community has been changed after the treatment of anaerobic fermentation using wheat bran or rice bran was applied to the soil. In the dilution plate technique, the number of anaerobic bacteria and fungi was higher in rice bran-treated soil than in non and wheat bran-treated soil, but of yeast was higher in wheat bran-treated soil than in non and rice bran-treated soil. Specially, the fungi were not detected in the wheat bran-treated soil. Identified by 16S rDNA sequencing, the number of aerobic bacteria was similar in all treatments, the dominant bacteria was the genus Bacillus. In the phospholipid fatty acid (PLFA) technique, both Gram-positive and Gram-negative bacteria change slightly in all treatments for 20 days of fermentation process but, after 20day, increased rapidly in wheat or rice bran-treated soil. In conclusion, the microbial communities structure was dramatically changed after the treatment of wheat or rice bran to soil.
Responses of the rumen fungus, Neocallimastix frontalis RE1, to long chain fatty acid (LCFA) were evaluated by measuring gas production, filter paper (FP) cellulose digestion and polysaccharidase enzyme activities. LCFA (stearic acid, $C_{18:0}$; oleic acid, $C_{18:1}$; linoleic acid, $C_{18:2}$ and linolenic acid, $C_{18:3}$) were emulsitied by ultrasonication under anaerobic condition, and added to the medium. When N frontalis RE1 was grown in culture with stearic, oleic and linoleic acid, the cumulative gas production, gas pool size, FP cellulose digestion and enzymes activities significantly (p<0.05) increased at some incubation times(especially, exponential phases of fungal growth, 48~120 h of incubation) relative to that for control cultures. However, the addition of linolenic acid strongly inhibited all of the investigated parameters up to 120 h incubation, but not after 168 and 216 h of incubation. These results indicated that stearic, oleic and linoleic acids tended to have great stimulatory effects on fungal cellulolysis, whereas linolenic acid caused a significant (p<0.05) inhibitory effects on the cellulolysis by the rumen fungus. These results are the first report of the effect of LCFAs on the ruminal fungi. Further research is needed to identify the mode of action of LCFAs on fungal strains and to verify whether or not ruminal fungi have ability to hydrate unsaturated LCFAs to saturated FAs. There was high correlation between cumulative in vitro gas production and fungal growth (94.78%), FP cellulose degradation (96.34%), CMCase activity(90.86%) or xylanase activity (87.67%). Thus measuring of cumulative gas production could be a useful tool for evaluating fungal growth and/or enzyme production by ruminal fungi.
A series of experiments was carried out to determine the possibility for the non-ionic surfactant (NIS) as a feed additive for ruminant animals. The effect of the NIS on (1) the enzyme distribution in the rumen fluids of Hereford bulls, (2) the growth of pure culture of rumen bacteria and (3) rumen anaerobic fungi, (4) the ruminal fermentation characteristics of Korean native cattle (Hanwoo), and (5) the performances of Holstein dairy cows were investigated. When NIS was added to rumen fluid at the level of 0.05 and 0.1% (v/v), the total and specific activities of cell-free enzymes were significantly (p<0.01) increased, but those of cell-bound enzymes were slightly decreased, but not statistically significant. The growth rates of ruminal noncellulolytic species (Ruminobacter amylophilus, Megasphaera elsdenii, Prevotella ruminicola and Selenomonas ruminantium) were significantly (p<0.01) increased by the addition of NIS at both concentrations tested. However, the growth rate of ruminal cellulolytic bacteria (Fibrobacter succinogenes, Ruminococcus albus, Ruminococcus flavefaciens and Butyrivibrio fibrisolvens) were slightly increased or not affected by the NIS. In general, NIS appears to effect Gram-negative bacteria more than Gram-positive bacteria; and non-cellulolytic bacteria more than cellulolytic bacteria. The growth rates of ruminal monocentric fungi (Neocallimastix patriciarum and Piromyces communis) and polycentric fungi (Orpinomyces joyonii and Anaeromyces mucronatus) were also significantly (p<0.01) increased by the addition of NIS at all concentrations tested. When NIS was administrated to the rumen of Hanwoo, Total VFA and ammonia-N concentrations, the microbial cell growth rate, CMCase and xylanase activities in the rumen increased with statistical difference (p<0.01), but NIS administration did not affect at the time of 0 and 9 h post-feeding. Addition of NIS to TMR resulted in increased TMR intake and increased milk production by Holstein cows and decreased body condition scores. The NEFA and corticoid concentrations in the blood were lowered by the addition of NIS. These results indicated that the addition of NIS may greatly stimulate the release of some kinds of enzymes from microbial cells, and stimulate the growth rates of a range of anaerobic ruminal microorganisms, and also stimulate the rumen fermentation characteristics and animal performances. Our data indicates potential uses of the NIS as a feed additive for ruminant animals.
This study has been conducted to evaluate the effects of a single stage anaerobic co-biogasification of food waste and primary sewage sludge mixture (1 : 5 V/V%) according to mixing ratio (0% : CAP0, 0.5% : CAP0.5, 1%: CAP1.0) in red pepper powder, which was reported as the material anti-bacterial and anti-fungi, under mesophilic condition ($35^{\circ}C$). during 31 days. It showed that red pepper powder effected anaerobic bacteria, Especially, Hydrolytic bacteria and methanogenic bacteria was inhibited much more than Acetogenic bacteria with red pepper powder. at CAP0, Experimental cumulative methane yield (ECMY) and Experimental bio-energy production (EBEP) were 0.17 L $CH_4/g$$VS_{fed}$ and 1,465 cal/g $VS_{fed}$ individually as the highest value during 31 days.
Lee, S.S.;Shin, K.J.;Kim, W.Y.;Ha, J.K.;Han, In K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.12
no.6
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pp.988-1001
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1999
The rumen ecosystem is increasingly being recognized as a promising source of superior polysaccharide-degrading enzymes. They contain a wide array of novel enzymes at the levels of specific activities of 1,184, 1,069, 119, 390, 327 and $946{\mu}mol$ Reducing sugar release/min/mg protein for endoglucanase, xylanase, polygalactouronase, amylase, glucanase and arabinase, respectively. These enzymes are mainly located in the surface of rumen microbes. However, glycoside-degrading enzymes (e.g. glucosidase, fucosidase, xylosidase and arabinofuranosidase, etc.) are mainly located in the rumen fluid, when detected enzyme activities according to the ruminal compartments (e.g. enzymes in whole rumen contents, feed-associated enzymes, microbial cell-associated enzymes, and enzymes in the rumen fluid). Ruminal fungi are the primary contributors to high production of novel enzymes; the bacteria and protozoa also have important functions, but less central roles. The enzyme activities of bacteria, protozoa and fungi were detected 32.26, 19.21 and 47.60 mol glucose release/min/mL mediem for cellulose; 42.56, 14.96 and 64.93 mmol xylose release/min/mL medium after 48h incubation, respectively. The polysachharide-degrading enzyme activity of ruminal anaerobic fungi (e.g. Neocallimastix patriciarum and Piromyces communis, etc.) was much higher approximately 3~6 times than that of aerobic fungi (e.g. Tricoderma reesei, T. viridae and Aspergillus oryzae, etc.) used widely in industrial process. Therefore, the rumen ecosystem could be a growing source of novel enzymes having a tremendous potential for industrial applications.
Suanu, Leh-Togi Zobeashia S.;Abiodun, Aransiola S.;Josiah, Ijah U.J.;Peter, Abioye O.
Advances in environmental research
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v.7
no.2
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pp.73-85
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2018
The anaerobically digestion and agricultural application of organic wastes was conducted using food wastes and cow dung. Twenty kilograms each of the feed stocks was added into two 30 liters-capacity batch digesters. The anaerobic digestion was carried out within a temperature range of $25-31^{\circ}C$ for a retention time of 51 days. The results showed a cumulative gas yield of 5.0 bars for food waste and no gas production for cow dung within the retention time. Bacteria such as Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris and Clostridium sp were isolated. Fungi isolated included Aspergillus niger, Aspergillus nidulan, Trichophyton rubrum and Epidermophyton flocossum. The non-dispersive infrared (NDIR) analysis of the biogas produced confirmed that the gas consisted of $CH_4$, $CO_2$ and $H_2$. Statistical analysis revealed there was no significant correlation between temperature and biogas produced from the organic wastes (r= 0.177, p = 0.483).The organic wastes from the biogas production process stimulated maize growth when compared to control (soil without organic waste) and indicated maximum height. The study therefore reveals that food waste as potential substrates for biogas production has a moderate bio-fertilizer potential for improving plant growth and yield when added to soil.
To improve the soil condition for no-tillage organic pepper cultivation, four different green manure crops were cultivated. Fertilizer supply was depended on the biomass of the cultivated green manure crops, nitrogen supplies were 314kg in Vicia villosa and 341kg $ha^{-1}$ in Vicia angustifolia. In the microbial community analyzed by phospholipid fatty acid (PLFA) method, soil microbe populations were different among the green manure crops and fungi group was increased at Vicia angustifloia and Vicia villosa. The biological ratio indexes of fatty acids in the soils, the ratio of Gram-negative to Gram-positive bacterial PLFA and Ratio of aerobes to anaerobes were high at Vicia hirsute and Vicia tetrasperma suggesting the enrich of the aerobic conditions. The ratio of saturated to unsaturated fatty acids increased at Vicia angustifloia and Vicia villosa suggesting anaerobic conditions. Abundant biomass and uncomposted organic matter, the ratio of fungi to bacteria was increased at Vicia angustifloia and Vicia villosa.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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