Low yield of a thermostable pectinesterase(TSPE) from citrus fruits has made its detailed study extremely tedious and difficult; therefore, maximizing TSPE extraction is desirable. It is assumed that TSPE is bound to the cell components via ionic linkage and covalent bonds. Therefore, in this study, variations in extraction time, pH, NaCl concentration and commercial enzyme preparations were used to increase the yield of TSPE from Valencia orange. The largest recovery of TSPE, obtained by heating extracted pectinesterase(PE) at $70^{\circ}C\;for\;5{\sim}10$ minute, was achieved using actate buffer(pH 4.14) with 1 M NaCl and 0.2% $Cytolase^{TM}$ 104(a mixture of cellulase, hemicellulase and pectinase; Genecor, Inc). The two aquous phase partitioning with 5.0% Triton X-114 could be used as a tool for separation of thermolabile pectinesterase(TLPE) and TSPE from crude PE. Also, water extraction and $0{\sim}0.3$ ammonium sulfate fractionation could be used for removing non-pectinesterase protein.
Kim, Eun-Kyung;Jeong, Eun-Kyung;Han, Sang-Beom;Jung, Jee-H.;Hong, Jong-Ki
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.32
no.10
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pp.3597-3602
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2011
A simple and rapid analytical method was developed for the determination of eight isoquinoline alkaloids in Corydalis species. Eight isoquinoline alkaloids, including 2 aporphine alkaloids (isocorydine and glaucine) and 6 protoberberine alkaloids (coptisine, palmatine, berberine, canadine, corydaline, and tetrahydrocoptisine) were used as chemical markers which have a various biological activity and determined for quality control of Corydalis (C.) species (C. ternata, C. yanhusuo, and C. decumbens). To evaluate the quality of these herbal medicines, LC chromatographic separation of alkaloids were preferentially investigated on reversed-phase C18 column with pH variation and composition of mobile phase. In addition, the separation of these alkaloids in herbal extracts was found to be significantly affected on mobile phase composition using gradient elution. Especially for C. yanhusuo extract, berberine was seriously interfered with other alkaloid extracted from sample matrix when mobile phase composition was not optimized. As results, these compounds were successfully separated within 28 min using 10 mM ammonium acetate containing 0.2% triethylamine (adjusted at pH 5.0) as a mobile phase with gradient elution. On the basis of optimized HPLC conditions, 23 different Corydalis species samples were analyzed for the determination of alkaloid levels. In addition, principal component analysis (PCA) combined with the chromatographic data could be successfully classified the different geographic origin samples.
A pot experiment was conducted to find out suitable method in determining the rate of phosphorus application. Soybean was planted under optimum moisture condition. The soils used in this experiment were cultivated and non-cultivated mineral soils, and volcanic ash soils. The results were summarized as follows: 1. Phosphorus adsorption maximum(PAM) was the good parameters to determine phosphorus adsorption capacity of all tested soils. 2. Phosporus adsorption maximum was increased with the content of ammonium acetate extractable aluminum, and the organic matter effects on PAM was considerably high in volcanic ash soils. 3. Requirement of phosphorus for maximum yields were in the range of 30~35% of PAM for tested soils. 4. PAM was considered as a suitable criteria to determine the rate of the phosphorus application and it was also considered to be more attractive than phosphorus absorption coefficient.
Aspergillus nidulans, a homothalic ascomycete, has a complete sexual reproductive cycle as well as an asexual one. Both sexual and asexual development are known to be genetically programmed, but are also strongly affected by environmental factors including nutrients, light, temperature and osmolarity. We have examined these factors to define favored conditions for fruiting body (cleistothecium) formation. In general, fruiting body formation was enhanced where carbon and nitrogen sources were sufficient. Limitation of C-source caused predominant asexual development while inhibiting sexual development. When higher concentrations of glucose were supplied, more cleistothecia were formed. Other carbon sources including lactose, galactose and glycerol made the fungus develop cleistothecia very well, whereas acetate caused asexual sporulation only. Organic nitrogen sources like casein hydrolysate and glycine, and an increase in nitrate or ammonium concentration also enhanced sexual development. In addition to nutrient effects, low levels of aerobic respiration, caused either by platesealing or treatment with various chemicals, favored sexual development. Carbon limitation, light exposure and a high concentration of salts promoted asexual development preferentially, suggesting that stress conditions may drive the cell to develop asexual sporulation while comfortable and wellnourished growth conditions favored sexual development.
Lipase (EC 3.1.1.3) in the culture filtrate of Streptomyces coelicolor A3(2) was active on ${\alpha}$-naphthyl-butyrate as well as on various triacylglycerols with different lengths of acyl chains. The extracellular lipase was purified 15-fold by ammonium sulfate fractionation, Sephadex G-100, DEAE-Cellulose and Phenyl-Sepharose CL4B column chromatography with overall yield of 16%. It showed an molecular weight of 34.7 kDa by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The enzyme activity with tributyrin as substrate was optimal at pH 8.0~9.0 and at $37^{\circ}C$. The enzyme activity decreased when the chain length of acyl group of triacyglycerol increased. A-factor, a hormone-like regulator of Streptomyces differentiation inhibited the lipase activity, which might corelate with the low enzyme activity in early exponential growth phase.
Physicochemical properties, intestinal microbial growth, and inhibitory effects of alcohol-insoluble polysaccharide (AIP) extracted from cucumber peel were investigated. AIP was composed of 14.54% crude protein, 1.04% crude lipid, 13.74 % crude ash, 9.1% soluble dietary fiber, and 41.2% insoluble dietary fiber. AIP showed low bulk density (0.18 g/mL) and water-holding capacity (6.39 g/g), and high oil-holding capacity (3.96 g/g). Pectic substance fractions [water-soluble pectic substance (WSP), ethylenediaminetetraacetic acid-soluble pectic substance (ESP), and alkali-soluble pectic substances (ASP)] and hemicellulose fractions [1 M KOH-soluble hemicellulose (KHP1) and 4 M KOH-soluble hemicellulose (KHP4)] were obtained from sequential chemical fractionation of AIP. WSP showed higher total sugar contents than total uronic acid contents, whereas opposite results were observed in ESP and ASP. Molecular weight distributions of three pectic substance fractions were in order of ASP>ESP>WSP. Ion exchange chromatogram pattern of WSP was different from those of ESP and ASP. Major component of WSP was fraction eluted by 0.05 M ammonium acetate buffer, whereas that of ESP and ASP was fraction eluted by 0.2 M NaOH. WSP and ASP showed growth-promoting activities against Lactobacillus brevis, Bifidobacterium bifidum, and B. longum, whereas B. bifidum and B. longum for ESP. KHP1 and KHP4 fractions had significant growth-promoting activities against B. bifidum.
Mineralogical and chemical characterization of some domestic bentonites, such as quantitative XRD analysis, chemical leaching experiments, pH and CEC determinations, were done without any separation procedures to understand their relationships among mineral composition, characteristics, and cation exchange properties. XRD quantification results based on Rietveld method reveal that the bentonites contain totally more than 25 wt% of impurities, such as zeolites, opal-CT, and feldspars, in addition to montmorillonite ranging 30~75 wt%. Cation exchange properties of the zeolitic bentonites are deeply affected by the content of zeolites identified as clinoptilolite-heulandite series. Clinoptilolite is common in the silicic bentonites with lighter color. and occurs closely in association with opal-CT. Ca is mostly the dominant exchangeable cation, but some zeolitic bentonites have K as a major exchangeable cation, The values of cation exchange capacity (CEC) determined by Methylene Blue method are comparatively low and have roughly a linear relationship with the montmorillonite content of the bentonite, though the correlated data tend to be rather dispersed. Compared to this, the CEC determined by Ammonium Acetate method, i.e.‘Total CEC’, has much higher values (50~115 meq/100 g). The differences between those CEC values are much greater in zeolitic bentonites, which obviously indicates the CEC increase affected by zeolite. Other impurities such as opal-CT and feldspars seem to affect insignificantly on the CEC of bentonites. When dispersed in distilled water, the pH of bentonites roughly tends to increase up to 9.3 with increasing the alkali abundance, especially Na, in exchangeable cation composition. However, some bentonites exhibit lower pH (5~6) so as to regard as ‘acid clay’. This may be due to the presence of $H^{+}$ in part as an exchangeable cation in the layer site of montmorillonite. All the works of this study ultimately suggest that an assesment of domestic bentonites in grade and quality should be accomplished through the quantitative XRD analysis and the ‘Total CEC’measurement.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.42
no.7
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pp.1125-1132
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2013
In the kimchi manufacturing process, the starter is cultured on a large-scale and needs to be supplied at a low price to kimchi factories. However, current high costs associated with the culture of lactic acid bacteria for the starter, have led to rising kimchi prices. To solve this problem, the development of a new medium for culturing lactic acid bacteria was studied. The base materials of a this novel medium consisted of Chinese cabbage extract, a carbon source, a nitrogen source, and inorganic salts. The optimal composition of this medium was determined to be 30% Chinese cabbage extract, 2% maltose, 0.25% yeast extract, and $2{\times}$ salt stock (2% sodium acetate trihydrate, 0.8% disodium hydrogen phosphate, 0.8% sodium citrate, 0.8% ammonium sulfate, 0.04% magnesium sulfate, 0.02% manganese sulfate). The newly developed medium was named MFL (medium for lactic acid bacteria). After culture for 24 hr at $30^{\circ}C$, the CFU/mL of Leuconostoc (Leuc.) citreum GR1 in MRS and MFL was $3.41{\times}10^9$ and $7.49{\times}10^9$, respectively. The number of cells in the MFL medium was 2.2 times higher than their number in the MRS media. In a scale-up process using this optimized medium, the fermentation conditions for Leuc. citreum GR1 were tested in a 2 L working volume using a 5 L jar fermentor at $30^{\circ}C$. At an impeller speed of 50 rpm (without pH control), the viable cell count was $8.60{\times}10^9$ CFU/mL. From studies on pH-stat control fermentation, the optimal pH and regulating agent was determined to be 6.8 and NaOH, respectively. At an impeller speed of 50 rpm with pH control, the viable cell count was $11.42{\times}10^9(1.14{\times}10^{10})$ CFU/mL after cultivation for 20 hr - a value was 3.34 times higher than that obtained using the MRS media in biomass production. This MFL media is expected to have economic advantages for the cultivation of Leuc. citreum GR1 as a starter for kimchi production.
An experiment on movements of copper in soils was conducted to evaluate the effectiveness of several soil extractants in predicting to be possibly the plant availability of copper in soils. Soil samples were taken six, from Las Virgines loam that the samples naturally included high contents of heavy metals near Los Angeles, Greenfield sandy loam and IDomino Loam that received 22.5, and $45.0mg.\;ha^{-1},\;yr^{-1}$ of composted sludge from Los Angeles from 1975 to 1983, respectively. Copper in soils were extracted with $4M\;HNO_3$, 0.1M HCl, 0.5M DTPA-0.1M TEA, 0.5M EDTA-0.1M $Ca(NO_3)_2$, and 1M ammonium acetate(pH 7), and analyzed by atomic absorption spectroscopy. The results were as follows: 1. The total copper contents in soil that received $45.0mg.\;ha^{-1},\;yr^{-1}$ of composted sludge were higher than that received $22.5mg.\;ha^{-1}.yr^{-1}$, regardless of soil samples. 2. The ratios of extractable copper contents with EDTA, DTPA, 0.1M HCl and 1M ammonium acetate to total copper contents extracted with 4M $HNO_3$ of long-term sludge applications were larger than those of natural, sludge-nontreated soils. 3. Statistically significant increase in total copper contents was found in the increasing values of multipling CEC, or OM% by R, ratio of extractable copper contents to those by 4M $HNO_3$ extraction as total copper contents in soils.
Park, Sung-Kwan;Hong, Yeun;Jung, Yong-Hyun;Lee, Chang-Hee;Yoon, Hae-Jung;Kim, So-Hee;Lee, Jong-Ok
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.33
no.1
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pp.33-39
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2001
To develop a method for separation process using Sep-pak $C_18$, simultaneous and systematic analysis of 8 permitted and 11 non-permitted synthetic food colors in Korea, optimization of analysis conditions for reverse phase ion-pair high performance liquid chromatography was carried out. For the best result of Sep-pak $C_18$ separation the pH of color standard mixture solution was $5{\sim}6$ and 0.1% HCl-methanol solution were set as eluent. The colors eluated from Sep-pak $C_18$ cartridge were determined and confirmed by high performance liquid chromatography with a photodiode array detector at 420 nm for yellow colors type, at 520 nm for red colors type, at 600 nm for blue and green colors type and at 254 nm for mixed colors. Conditions for HPLC analysis were as follows: column, Symmetry $C_18$ (5 m, 3.9 mm $i.d.{\times}150\;mm$); mobile phase, 0.025 M ammonium acetate (containing 0.01 M tetrabutylammonium bromide) : acetonitrile : methanol (65 : 25 : 10) and 0.025 M ammonium acetate(containing 0.01 M tetrabutylammonium bromide) : acetonitrile : methanol (40 : 50 : 10); flow rate, 1 mL/min. It takes 35 minutes for simultaneaus analysis and 18 minutes for systematic analysis. The detection limits range of each colors were $0.01{\sim}0.05\;{\mu}g/g$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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