• 한국자원식물학회지
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• 제21권1호
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• pp.12-18
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• 2008

제주도에 자생하는 양치식물 25종을 대상으로 항산화활성, ACE 저해활성, APN 저해활성 및 $\alpha$-amylase 저해활성을 검색하였다. 항산화활성은 쇠고비와 일색고사리에서 비교적 높아서 항산화 음료로 애용되고 있는 차나무 잎보다도 더 높았다. ACE 저해활성과 APN 저해활성은 전체적으로 낮았으나, 쇠고비에서 각각 26.7%와 28.2%으로 비교적 높은 저해활성을 나타내었다. $\alpha$-Amylase 저해활성은 10종이 50% 이상의 높은 활성으로 보였으며, 그 중에서 쇠고비와 홍지네고사리의 저해활성이 특히 높았다. 이상의 결과로부터 쇠고비는 항산화활성뿐만 아니라 ACE 저해활성, APN 저해활성과 $\alpha$-amylase 저해활성 모두 다른 식물에 비해 높아 생리활성 물질의 분리 및 동정 등 식품소재 및 식물생약으로 이용하기 위한 후속 연구가 기대된다.

• 한국임상수의학회지
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• 제8권1호
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• pp.31-45
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• 1991

Present experiment was performed in order to establish the optimal reaction conditions for determination of urinary AAP and GRS activities and to investigate the applicability of urinary AAP and GRS in nephrotoxicity test in rat. The results were as follows ; 1. The optimal pH of phosphate buffer for determination of urinary AAP activity was 7.8. 2. The Michaelis constant of urinary AAP ranged from 0.8 to 1.0mmol/$\ell$ 3. The optimal wave length for determination of urinary GRS activity was 405nm. 4. The optimal pH of acetate buffer for determination of urinary GRS activity was 5.6. 5. The Michaelis constant of urinary GRS ranged from 0.65~0.79mmo1/$\ell$. 6. The AAP activities in gel-filtered samples were significantly higher than those in crude samples. Mean values of AAP activities in gel-filtered samples and crude samples were 29$\pm$20 and 20$\pm$13U/$\ell$, respectively. 7. There was not significant difference between gel-filtered samples and crude samples in urinary GRS activities. Mean values of GRS activities in gel-filtered samples and crude samples were 57$\pm$40 and 56$\pm$39U/$\ell$, respectively. 8. Limits of linearity of urinary AAP and GRS activities were 2.0 and 3.6U/$\ell$, respectively. 9. Within-run imprecisions of the assays, were acceptable, as the coefficients of the AAP activities ranged from 5.5 to 6.3% and those of GRS activities ranged from 1.4 to 6.2%, respectively. 10. Urinary AAP excretion was 675$\pm$227mu/24hrs.kg before administration of potassium dichromate, and increased significantly to 4246$\pm$2567mU/24hrs.kg within 24 hours after administration of potassium dichromate. 11. Urinary GRS excretion did not increase significantly after administration of potassim dichromate. 12. From these findings it is concluded that urinary AAP excretion is early and sensitive Indicator to detect kidney damage in nephrotoxicity experiment.

• Toxicological Research
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• 제14권3호
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• pp.365-370
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• 1998

To evaluate the renal toxicity of the antitumor agent, p-{N,N,-Bis(2-chloroethyl)amino}-4-phenyl acetyl-amino-2,6-piperidinedione(CK-15), rats were treated with CK-15 (acute: 50mg/kg. i.p., single and subacute: 5mg/kg, i.p., daily for 7 days). The changes in the body weight, water consumption, kidney weights and urine volume after and during the treatment were observed. The concentrations of urinary creatinine and portein, the activities of N-acetyl-${\beta}$-D-glucosaminidase (NAG), alanine aminopeptidase (AAP), ${\gamma}$-glutamyl transpeptidase (${\gamma}$-GT) and lactate dehydrogenase (LDH) in 24hr urine were also determined. The body weight, water consumption, and urine volume were decreased after the acute and subacute administration. However the weights of kidney were not changed after the treatments. The excretion of creatinine was significantly decreased 1 day after acute administration but, returned to the control value. In subactute administration, the excretion of creatinine was gradually decreased. However, the protein excretion did not changed in both treatment. Those indicate that CK-15 might decrease the metabolic rate of muscle. THe urinary activities of NAG, AAP, ${\gamma}$-GT, and LDH were significantly affected bythe drug treatment. The urinary activities of NAG, AAP and ${\gamma}$-GT were significantly increased 1 day after the acute administration and then returned to the control value. However, the urinary activities of LDH were not changed in acute treatment. In subacute treatment, although the urinary activities of NAG were not changed, those of AAP and ${\gamma}$-GT were significantly increased 2.3 times at 3 days during the subacute administration. Also the urinary activities of LDH were significantly increased at 7 day after the administration. These results indicate that the high and subacute administration might induce a damage in the kidney cells. Furthermore the present results suggest that the toxic effects of CK-15 might be due to the accumulation of the metabolites.

• 한국균학회지
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• 제14권2호
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• pp.93-99
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• 1986

영지(靈芝)버섯(Ganoderma lucidum (Fr.) Karst.)의 16개 균주간(菌株關) 특성을 전기영동법(電氣泳動法)을 사용(使用)하여 단백질(蛋白質) pattern과 esterase, LAP의 동립효소(同位酵素) pattern에 의해 비교(比較) 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 자실체(子實體)의 esterase의 band pattern은 각(各) 균주간(菌株間) 특정 band의 유 무(有 無)와 위치(位置) 등에 의해 분류(分類) 할 수 있었으며 자실체(子實體)의 형태(形態)가 유사한 것은 band pattern에서도 유사하였다. 2. 동일균주(同一菌株)에서 편각(扁角)과 녹각형태(鹿角形態)로 형성(形成)된 자실체(子實體)의 esterase band pattern은 서로 동일(同一)한 pattern을 보였다. 3. 균주간(菌株間) 유연관계인 유사도 지수는 12.5%에서 100%의 변이 폭을 보였다. 특히 6과 7번의 두 균주간(菌株間)과 13,14,15,16번의 4균주간(菌株間)은 유사도지수가 100%이므로 유전적(遺傳的)으로 동일(同一)한 균(菌)이라 사료(思料)된다. 4. 균사(菌絲)의 단백질(蛋白質)과 esterase의 band pattern은 자실체(子實體)의 pattern과는 달랐으며 자실체(子實體)에서 동일(同一)한 pattern을 보였던 균주간(菌株間)에서도 균주간(菌株間) 특성을 가장 잘 보여 주었으므로 영지(靈芝)버섯 분류(分類)에는 균사(菌絲)의 esterase pattern이 가장 적합하다.

• 한국균학회지
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• 제16권4호
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• pp.235-241
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• 1988

Ganoerma lucidum의 인공재배(人工栽培)로 얻은 자실체(子實體)의 형태적(形態摘) 특성(特性)을 기초(基礎)로 계통(系統)을 분류(分類)하고 전기영동특성(電氣泳動特性)과의 관련성(關聯性)을 검토하였다. 영지균은 버섯의 형태(形態)와 윤문(輪紋)의 유무에 따라 4계통(系統)으로 분류(分類)되었으며 그중 편각 윤문형(輪紋形)이 가장 많았고 전형적 녹각형은 소수였다. 자실체(子實體)의 모양 즉 편각과 녹각, 갓 표면(表面)의 윤문(輪紋) 유무(有無)는 유전성(遺傳性)이었다. 영지균사(菌絲) 및 자실체(子實體)의 전기영동(電氣泳動)에 의한 단백질(蛋白質), Peroxidase, Esterase 및 Leucine Amino Peptidase Isozyme Pattern을 조사(調査)한 결과(結果) 한국자생영지균(韓國自生靈芝菌)은 유전형질(遺傳形質)에 다양성(多樣性)을 보였다. 그중 Esterase Isozyme Pattern은 편각과 녹각간에 차이가 컸고 동(同) 계통(系統)간에는 높은 유사도(類似度)를 보여 계통분류(系統分類) 결과(結果)와 일치하였다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제35권6호
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• pp.479-484
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• 1992

Cheddar 치즈의 숙성기간을 단축시키고 flavor를 증진시킬 목적으로 단백분해력이 있는 Micrococcus sp. LL3를 Cheddar 치즈에 첨가하기 위하여 본 균의 균체생산을 위한 최적배양 온도와 pH 및 배양시간에 따른 casein의 분해형태를 관찰하였다. 본 균주의 생육을 위한 최적 배양온도는 $30^{\circ}C$, 단백분해 효과의 최적 배양온도는 $37^{\circ}C$이었으며, 초기 배양 pH 7.0에서 균의 생육과 단백분해 효과가 가장 좋았다. 배양기간 중 정지기 초기의 세포에서 aminopeptidase의 효소활성이 가장 높았으며, 본 효소의 열 안정성이 높아 $50^{\circ}C$에서 20분간 열처리 후에도 높은 효소활성을 보였다. Casein의 분해속도는 배양 24에서 36시간에서 가장 높았으며, 전기영동을 통한 casein hydrolysis patterns는 ${\alpha}-casein $뿐만 아니라 ${\beta}-casein$도 본 균주에 의해 완전히 분해되었다. 특히 본 균주는 ${\beta}-casein$의 분해력이 더욱 우수하였다.

• 한국습지학회지
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• 제7권2호
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• pp.37-52
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• 2005

갯벌환경에 대한 이해의 증진과 가치산정에 필요한 자료 생산의 측면에서 강화도 남단의 모래갯벌과 펄갯벌의 세균수와 활성의 수직분포를 비교하였다. 평균적으로 펄갯벌의 세균수와 활성이 모래갯벌에 비해 더 높은 값을 보였다. 모래갯벌의 세균수는 조사기간동안 펄갯벌과 비슷한 수준으로 증가하였는데 이는 펄성분의 증가에 따른 환경조건의 변화가 원인인 것으로 생각된다. 강화도 펄갯벌의 세균수와 활성은 맹그로브지역에 버금가는 높은 수준이었으며 모래갯벌의 세균수와 활성도 외국의 갯벌에 비교해서는 높은 수준을 보였다. 세균수는 퇴적토의 깊이에 따른 차이가 명확하지 않았으나 효소활성, 세균생산력은 깊이 3~5 cm 이내에서 급격히 감소하였다. 이는 퇴적토 깊이의 증가에 따라 수분함량이 감소하며 용존상태로 공급되는 유기물의 양도 감소하는 것이 원인인 것으로 생각된다. 한편, 펄갯벌의 세균수와 활성이 미소 일차생산자의 분포와 큰 상관관계를 보이지 않은 반면 모래갯벌에서는 미소 일차생산자의 분포가 세균수와 활성을 조절하는 요인인 것으로 나타났는데 이는 펄갯벌의 경우 주변에 서식하는 칠면초군락으로부터 공급되는 유기물의 영향을 받기 때문인 것으로 사료된다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제28권12호
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• pp.2303-2309
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• 2007

Expressed protein ligation (EPL) technique, joining recombinantly expressed proteins to polypeptides, has been widely adopted for addressing various biological questions and for drug discovery. However, joining two recombinant proteins together is sometimes difficult when proteins are expressed insoluble and unrefoldable, because ligation-active proteins via intein-fusion are obtainable when they are folded correctly. We overcame this limitation coexpressing target protein with additional methionine aminopeptidase (MAP) which enhances removal of the initiation methionine of recombinantly expressed protein. Our approach demonstrated that two domains of 46 kDa 5-Enolpyruvylshikimate-3-phosphate (EPSP) synthase, a target of herbicide glyphosate, were successfully joined by native chemical ligation, although its C-terminal domain was expressed as an inclusion body. The intein-fused N-terminal fragment of EPSP synthase (EPSPSN, residues 1-237) was expressed and the ligation-active thioester tagged N-terminal fragment (EPSPSN-thioester) was purified using a chitin affinity chromatography and mercapto-ethanesulphonate (MESNA) as intein thiolysis reagent. Its Cterminal fragment (EPSPSC, residues Met237-238CYS-427), expressed as an inclusion body, was prepared from an additional MAP-expressing strain. Protein ligation was initiated by mixing ~1 mM of EPSPSN-thioester with ~2 mM of EPSPSCCYS (residues 238CYS-427). Also we found that addition of 2% thiophenol increased the ligation efficiency via thiol exchange. The ligation efficiency was ~85%. The ligated full-length EPSP synthase was dissolved in 6 M GdHCl and refolded. Circular dichroism (CD) and enzyme activity assay of the purified protein showed that the ligated enzyme has distinct secondary structure and ~115% specific activity compared to those of wild-type EPSP synthase. This work demonstrates rare example of EPL between two recombinantly expressed proteins and also provides hands-on protein engineering protocol for large proteins.

• 미생물학회지
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• 제31권1호
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• pp.93-98
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• 1993

수계생태계에서 유기물질의 순환을 이해하기 위하여 팔당호에서 종속영양 활성도와 세균세포의 효소활성의 계절절 변화를 연구하였다. 팔당호 I 의 glucose 전환시간은 수층, 퇴적토에서 2-1,300 시간, 17-170 시간, protein hydrolysate 는 5-900 시간, 15-240 시간, acetic acid 는 4-350 시간, 15-230 시간으로 계절적인 변화를 나타냈다. Glucose, protein hydrolysate, acetate 각각의 호흡율은 수층에서 23-32%, 38-41%, 22-28%로 나타났고 퇴적토에서는 34%, 61% and 41% 로 나타났다. 이 결과로 3가지 유기물질 종류 모두가 수층보다 퇴적토에서는 높은 율로 호흡됨을 알 수 있었다. 한편 세균의 $\alpha$-glucosidase, $\beta$-glucosidase, N-acetyl-$\beta$-D-glucosaminidase, aminopeptidase 활성력을 살펴본 결과 수층에서는 효소 각각에 대해 32-44%, 31-32%, 18-34% 61-67% 의 범위를 나타내었고 퇴적토에서는 34%, 40%, 23% 65%로 나타났다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제27권2호
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• pp.251-261
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• 2017

Initially, we screened 18 Aspergillus sojae-like strains from Aspergillus spp. isolated from meju (Korean traditional fermented soybean brick) according to their morphological characteristics. Because members of Aspergillus section Flavi are often incorrectly identified because of their phylogenetic similarity, we re-identified these strains at the morphological and molecular genetic levels. Fourteen strains were finally identified as A. sojae. The isolates produced protease and ${\alpha}-amylase$ with ranges of 2.66-10.64 and 21.53-106.73 unit/g-initial dry substrate (U/g-IDS), respectively, which were equivalent to those of the koji (starter mold) strains employed to produce Japanese soy sauce. Among the isolates and Japanese koji strains, strains SMF 127 and SMF 131 had the highest leucine aminopeptidase (LAP) activities at 6.00 and 6.06 U/g-IDS, respectively. LAP plays an important role in flavor development because of the production of low-molecular-weight peptides that affect the taste and decrease bitterness. SMF 127 and SMF 131 appeared to be non-aflatoxigenic because of a termination point mutation in aflR and the lack of the polyketide synthase gene found in other A. sojae strains. In addition, SMF 127 and SMF 131 were not cyclopiazonic acid (CPA) producers because of the deletion of maoA, dmaT, and pks/nrps, which are involved in CPA biosynthesis. Therefore, A. sojae strains such as SMF 127 and SMF 131, which have high protease and LAP activities and are free of safety issues, can be considered good starters for soybean fermentations, such as in the production of the Korean fermented soybean products meju, doenjang, and ganjang.