한국독성학회 2001년도 International Symposium on Dietary and Medicinal Antimutgens and Anticarcinogens
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pp.103-104
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2001
Introduction: Bambara groundnut (Vigna subterranean) commonly eaten in Central and Southern Africa region where the incidence of gastric and liver cancer is high because of the consumption of contaminated food by mycotoxins, has been investigated for antitumorigenic activitly using the classical Ames test with some modifications.(omitted)
본 연구는 더덕의 돌연변이원성, 항돌연변이원성, 세포독성, 항종양 효과를 조사하기 위해서 수행되었다. 더덕을 70% 에탄올로 추출하여 추출용매에 따라 핵산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올과 물 층으로 분획하였다. Ames test assay, SRB assay와 sarcoma-180 세포를 이용한 항종양 실험을 실시하였다. Ames test 결과, 더덕 에탄올 추출물은 돌연변이원성을 나타내지 않았다. 더덕 에틸아세테이트분획물은(200 ${\mu}g$/plate) 4NQO에 대하여 S. Typhimurium TA98과 TA100에서 각각 72.1% 및 67.0%의 억제율을 나타내었으며, MNNG에 대한 S. Typhimurium TA100은 69.6%의 억제율을 나타내었다. 더덕 추출물 및 분획물의 암세포성장 억제효과를 살펴보기 위해 인간 자궁경부암세포(HeLa), 인간 간암세포(HepG2), 인간 유방암세포(MCF-7), 인간 폐암세포(A549) 및 인간 신장정상세포(293)를 사용하였다. 더덕 에틸아세테이트 분획물을 1 mg/mL의 농도로 처리하였을 때 각각 74.5%(HeLa), 70.7%(MCF-7) 및 80.3%(A549)의 가장 높은 억제활성을 나타내었다. 반면에 인간 정상 신장세포(293)에서는 2$\sim$31%의 세포독성을 나타내었다. In vivo에서 더덕 추출물 및 분획물의 항암 효과를 검토하기 위하여 Balb/c 마우스에 sarcoma-180 종양세포로 고형암을 유발시켰다. 그 결과 더덕 에틸아세테이트 분획물의 최고농도 50 mg/kg에서 56.4%의 고형암 성장 억제 효과를 나타내었고, 이는 다른 추출물 및 분획물 중에서 가장 높은 억제율이었다.
본 연구는 잔대의 돌연변이원성, 항돌연변이원성, 세포독성, 항종양 효과를 조사하기 위해서 수행되었다. 잔대를 70% 에탄올로 추출하여 추출용매에 따라 핵산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올과 물층으로 분획하였다. Ames test, SRB assay와 종양 억제실험 방법을 사용하여 실험하였다. Ames test결과, 잔대 에탄올 추출물과 그 분획물들은 돌연변이원성을 나타내지 않았을 뿐만 아니라, MNNG와 4NQO로 돌연변이를 일으켰을 때 높은 항돌연변이 효과를 나타내었다. 잔대 에틸아세테이트 분획물은 S. Typhimurium TA98를 4NQO로 돌연변이를 유도하였을 때 66.5%의 억제율을 나타내었으며, S. Typhimurium TA100에서 MNNG와 4NQO로 돌연변이를 유도했을 때는 83.3%와 75.1%의 억제율을 나타내었다. 잔대 추출물 및 그 분획물들의 암세포 성장 억제효과를 살펴보기 위해 인간 자궁암세포 (HeLa), 인간 간암세포(Hep3B), 인간 유방암세포(MCF-7), 인간 위암세포(AGS), 인간 폐암세포(A549)와 인간 신장정상세포(293)를 사용하였다. 잔대 에틸아세테이트 분획물을 1 mg/mL를 처리하였을 때 각각 79.9%(HeLa), 74.9% (Hep3B), 66.0%(MCF-7), 71.0%(AGS)와 74.3%(A549)의 가장 높은 억제활성을 나타내었다. 반면에 인간 정상 신장세포에서는 $3{\sim}36%$의 세포독성을 나타내었다. In vivo에서 잔대 추출물의 항암효과를 시험하기 위하여 Balb/c 마우스에 sarcoma-180 종양세포로 고형암을 유발시켰다. 그 결과 잔대 에틸아세테이트 층의 최고농도 50 mg/kg에서 37.2%의 고형암 성장 억제효과를 나타내었고, 이는 모든 처리군 중가장 높은 억제율이었다.
강원도 산지의 뽕나무의 잎, 줄기, 뿌리를 건조하여 100% EtOH와 물로 추출하여 얻은 추출물 및 EtOH추출물로부터 용매별 분획물들을 NIH/3T3에 대한 세포독성, comet assay를 이용한 DNA damage손상으로부터 유전 독성, in vitro micronucleus assay를 이용한 유전독성, Ames test를 이용한 돌연변이 유발을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1) 각 시료들의 NIH/3T3에 대한 세포독성은 0.5mg/ml 농도에서 약 80%의 생육활성을 나타냈다. 2)뽕나무 잎의 1차 추출물들은 comet assay에서 양성 대조구 대비 약 40% 정도의 유전독성을 보였다. 뽕잎의 EtOH 추출물에서 분획한 분획물 시료중 수용성 분획은 거의 독성이 나타나지 않았으나, hexan의 0.25mg/ml 농도의 분획물이 약 50%정도를 보였으며 다른 시료들은 이 보다 약한 독성을 보였다. 또한 뽕나무 줄기의 분획물 시료들 중에서 0.5mg/ml 농도의 chloroform 분획물이 양성 대조구 대비 가장 강한 50%의 유전독성을 보인것 외에 다른 시료들은 그보다 약한 독성을 보였다. 3) In vitro micronucleus assay를 이용한 유전독성은 재료의 1차 추출물은 거의 유전독성이 나타나지 않았고 EtOH 추출물의 재분획물인 시료중에서 0.5mg/ml의 농도의 hexan 및 chloroform 분획물은 MN의 발생 빈도가 음성대조구에 비하여 약 2배의 증가로 나타났다 또 뽕나무 줄기의 분획물 시료들에서 0.5mg/ml의 hekan, chloroform 및 EtOAc 분획물에서 MN이 관찰 되었으나 그중 chloroform 분획물 시료에서 더 많은 MN 발생을 보였다. 4) Ames test를 이용한 돌연변이 실험결과 뽕나무 잎 1차 추출물들은 0.25mg/ml의 농도에서 TA98에 대하여 거의 돌연변이 현상이 없었고, EtOH 추출물로부터 재 분획한 BuOH 및 chloroform분 획물에서는 강한 돌연변이 현상이, 또 5mg/ml의 hekan 분획물에서는 더욱 강한 돌연변이 현상이 관찰되었다. TA100 strain에 대하여는 각 재료의 1차 추출물이나 분획들의 낮은 농도 (1.25mg/ml)에서는 돌연변이 현상이 매우 약하거나 거의 없었고, 0.25mg/ml의 1차 추출물들에서는 매우 약한 돌연변이가 나타났으나 이들의 EtOAc 분획물은 다소 강한 돌연변이 유발성이 관찰 되었다. 그러나 수용성 분획물은 두 균주에 대하여 전혀 돌연변이 유발성을 보이지 않았다. 5) 뽕나무 줄기로부터 조제한 시료중 수용성 분획물과 EtOAc분획물은 IA98에서 전혀 돌연변이 유발성이 없었으나 0.25mg/ml 농도외 물 추출물, EtOH 춘출물, hexan 및 chloroffrm분획물들이 약 40%증가한 복귀변이 콜로니가 관찰되었고, 이보다 농도를 증가시킨 물 추출물 및 BuOH 분획물에서도 같은 수준의 복귀변이 콜로니가 관찰 된 결과로부터 돌연변이 유발성이 있음이 확인되었다 TA100에 대하여 뽕나무 줄기의 수용성 분획물은 전혀 돌연변이가 나타나지 않았고, 0.25mg/ml의 물 추출물, EtOH추출물, hexan 및 BuOH분획물들이 약 10%증가한 약한 돌연변이가 관찰되었다. 그러나 농도를 5 mg/ml로 한 EtOAc 분획물은 26의 돌연변이 유발성을 보였다. 이상의 결과로 부터 뽕나무를 이용한 식용 제품생산을 고려할 때 추출물들의 제조와 선택을 가름하는 자료로서의 활용이 기대되며 앞으로 in vivo test 등 더욱 연구할 필요가 있을 것으로 사료된다.
Brining property and antimutagenic effects of organically cultivaged Chinese cabbage kimchi (OC kimchi) and common Chinese cabbage imchi (CC kimchi) were studied. The salt absorption rate of leaves was faster than that of stems of the Chinese cabbages. Due to the large portion of leaf in organic Chinese cabbage, organic Chinese cabbage(OC) was much faster in terms of salt absorption rate than common Chinese cabbage(CC). The antimutagenic effects of methanol extracts of CC kimchi and OC kimchi were studied against aflatoxin B1(AFB1) using Ames test on Samonella typhimurium TA 100 and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) using SOS chromotest. Methanol extract from 6 -day fermented OC kimchi at 15 $^{\circ}C$ showed 80% inhibition rate against the indirect mutage, aflatoxin B1 induced mutagenicit where as that from 6-day fermented CC kimchi at 15 $^{\circ}C$ showed 54% inhibition rate in the Ames test. Methanol extracts from 6-day fermented CC kimchi and OC kimchi showed 27 % and 58 % inhibition rate against direct mutagen , N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine induced mutagenicity, respectively in SOS chormotest, thus OC kimchi exhibited higher antimutagenic activity than kimchi.
Various lactic acid bacteria were isolated from Korean Kimchi in order to study their antimutagenic substances. Ames test using Salmonella typhimurium TA98 and TA100 showed the strain KLAB21 to have the highest antimutagenic activity among the 230 isolated strains against MNNG (N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine), NPD (4-nitro-O-phenylenediamine), NQO (4-nitrosoquinoline-1-oxide) and AFB1 (aflatoxin B1). The strain was identified as Lactobacillus plantarum based on its morphological, cultural and physiological characteristics. Antimutagenic activity of L. plantarum KLAB21 was found in culture supernatant suggesting the bacterium secrete antimutagenic substance in the media. No mutagenic activity was found in the culture supernatant. The isolated strain L. plantarum KLAB21 showed much higher antimutagenic activity than L. plantarum IAM1261 which is being used industrially for fermented milk production. The antimutagenic activity of L.plantarum KLAB21 was reconfirmed by the spore-rec assay using spores of Bacillus subtilis H17($Rec^+$) and M45($Rec^-$).
It is previously reported that 6-paradol can induce prolonged analgesia in experimental animals. In order to investigate the mutagenicity of 6-paradol, Ames Samonella/microsome plate assay was carried out with Salmonella typhimurium strains, TA 98, TA 100, TA 1535 and TA 1538, 6-Paradol was nonmutagenic in Salmonella typhimurium with and without rat liver microsomal activation. The rec assay with Bacillus substilis strains H 17 $rec^+$ and M 45 $rec^+$ was carried out ot test 6-paradol and other compounds (1-3 mg/disc) for DNA damaging activity, 6-Paradol was also nonmutagenic in DNA damaging activity. The relative size of the inhibition zone for 6-paradol was smaller than that of capsaicin. We have also determined the pathological effects of this compound on the various tissues of rats after administrating(i.p.) with increasing doses of 4, 8, 12, 16 mg/kg at 2 hour intervals and found no significant changes in terms of histology.
Taihu Lake is a major water source for part of Yangtze Delta, which is one of the most urbanized and economically prosperous areas in China. In last couple of decades, some parts of the lake were highly polluted due to eutrophication. This study analyzed dioxin-like potential and mutagenic potential in surface water samples from Taihu Lake. The samples were prepared by XAD-2 resin procedure. A batch of biological assays, including dioxin-like potential microassay with the rat hepatocyte cell line H411E, and Ames test was employed in the research. Results showed that jour water samples have high content of dioxin-like biological potential, the highest activity TEQ to 2,3,7,8-TCDD was 48 pg/ι in sample 1. The mutagenic effect with reading-frame shifting mechanism was confirmed in 3 of 4 samples. The effective sewage treatment facilities and reliable monitoring surveillance system are urgently needed for this area.
The antimutagenic activity of polysaccharides extracted from soybeans fermented with Agrocybe cylindracea (AC) or Phellinus igniarius (PI) against 2-amino-3,8-dimethylimidaxo[4,5-f]quinoxaline (MeIQx) was examined using a Salmonella/Ames test and host-mediated assay in mice. The polysaccharides from the soybeans fermented with A. Cylindracea and P. igniarius inhibited the mutagenic acitivity of the cooked food mutagen, MeIQx, by 31.2% and 35.3%, respectively. The polysaccharides also inhibited MeIQx genotoxicity in a dose-dependent manner in micel. These results suggest that the polysaccharides from soybeans fermented with A. cylindracea or P. igniarius exhibit antimutagenic properties against MeIQx in vitro and in vivo.
The mutagenicity of the river water of Nakdong river estuary was determined by Ames test using the blue rayon suspension method. Samples were collected from 10 sites in the estuary once in each season of 1998. The samples collected from the sites where industrial waste discharge on May were mutagenic, but the other samples were not mutagenic. The sample collected from the site 1 located near the industrial area (Hadan-dong) were highly mutagenic in the TA98 with (+S9) and without (-S9) mix as well as in the TA100 with (+S9) and without (-S9) S9 mix, suggesting that the river water of this site is polluted by direct and indirect mutagens of frame-shift type as well as direct and indirect mutagens of base-replacement type. The positive mutagenicity, although relatively low, was also detected in TA98 with (+S9) and without (-S9) S9 mix in the extract of the site 4 near the industrial area(Jangrim-dong), suggesting that the primary mutation type is frame-shift. The negative mutagenicity from July to December at the sites (1-4) near the industrial area seems to be affected by the low economic growth rate in 1998 in Korea. On the other hand, the negative mutagenicity in all extracts collected from the sites 5-10 near the residential area where living sewage discharge, suggests that the river water was not polluted by mutagens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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