Nayyar, Brian Gagosh;Woodward, Steve;Mur, Luis A.J.;Akram, Abida;Arshad, Muhammad;Naqvi, S.M. Saqlan;Akhund, Shaista
The Plant Pathology Journal
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제33권6호
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pp.543-553
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2017
Sesame (Sesamum indicum) is an important oil seed crop of Asia. Yields can be negatively impacted by various factors, including disease, particularly those caused by fungi which create problems in both production and storage. Foliar diseases of sesame such as Alternaria leaf blight may cause significant yield losses, with reductions in plant health and seed quality. The work reported here determined the incidence of Alternaria species infecting sesame seeds grown in the Punjab, Pakistan. A total of 428 Alternaria isolates were obtained from 105 seed samples and grouped into 36 distinct taxonomic groups based on growth pattern and morphological characters. Isolation frequency and relative density of surface sterilized and non-surface sterilized seeds showed that three isolates (A13, A47 and A215) were the most common morphological groups present. These isolates were further identified using sequencing of the Internal Transcribed Spacer (ITS) region of ribosomal DNA (rDNA) and the Alternaria major allergen gene (Alt a 1). Whilst ITS of rDNA did not resolve the isolates into Alternaria species, the Alt a 1 sequences exhibited > 99% homology with Alternaria alternata (KP123850.1) in GenBank accessions. The pathogenicity and virulence of these isolates of Alternaria alternata was confirmed in inoculations of sesame plants resulting in typical symptoms of leaf blight disease. This work confirms the identity of a major source of sesame leaf blight in Pakistan which will aid in formulating effective disease management strategies.
최근 들깨잎 주산지인 부산시 강동지역과 경남 밀양지역 하우스내의 들깨잎에 가장자리가 검게 변하고 마르는 증상을 띄는 병해가 발생되고, 심하면 잎 전체가 고사하는 병이 발생되었다. 이런 병반으로부터 병원성이 강하고 분생포자 형성이 많은 SD1 균주를 분리하여 병원균의 형태 및 배양적 특성을 조사한 결과 PDA 평판배지에서 $25^{\circ}C$, 암조건으로 배양할 경우 균사생장이 가장 왕성하였으며, 분생포자 형성량은 V8A 평판배지에서 가장 많았다. 또한 SD1 균주의 균사생장 적온은 $25^{\circ}C$, 분생포자 형성 적온은 3$0^{\circ}C$였으며, 분생포자 현탁액에 첨가한 영양원에 따른 분생포자 발아율과 발아관의 신장은 10% 토마토쥬스에서 가장 양호하였는데 24시간 후 발아율은 거의 100%였으며, 36시간 후 발아관 길이는 535.2$\mu\textrm{m}$로 PDB보다 1.4배정도 길었다. 또한 SD1 균주의 병원성을 검정한 결과 10% 토마토쥬스를 첨가한 분생포자 현탁액으로 접종할 경우 자연 발병된 병징과 동일하였으며 발병율도 100%로서 PDB 분생포자 현탁액에서는 60%, 살균수에서는 전혀 발병되지 않았다. 본 균주는 균총 형태와 색깔, 광학현미경을 이용한 형태적 특성과 몇 가지 배지 등을 이용한 배양적 특성 및 병원성 검정 결과에 따라 Alternaria alternata로 동정되었으며, 들깨 잎마름병으로 명명하였다.
토양에서 분리된 A. alternata의 조효소액은 ammonium sulfate 염석, 투석 Sephadex G-100 column chromatography를 통하여 정제한 후 SDS-polyacrylamide gel 전기영동에 의해 단일 band의 ${\alpha}-amylase$를 얻었다. 이 효소의 물리화학적 특성을 분석한 결과는 다음과 같다. 1. 정제 효소의 최적 활성 pH는 5.0이었고 pH안정성 범위는 pH$3.6{\sim}7.0$으로 비교적 산성에서 안정성을 보이는 내산성 효소로 나타났다. 2. 효소의 최적 활성 온도는 $40^{\circ}C$, 열에 대한 안정성 범위는 $20{\sim}60^{\circ}C$로 나타났으며 $80^{\circ}C$에서 30분 열처리시 잔존 활성이 71%로 세균류와 거의 동일한 내열성을 보였다. 3. 본 효소는 $Mn^{2+},\;Zn^{2+}$ 및 $Sn^{2+}$의해 활성이 촉진되었으나 $Ba^{2+},\;Pb^{2+},\;Co^{2+},\;Ag^{1+}$에 의해 저해효과를 나타냈으며 또한 $Hg^{2+},\;Mn^{2+}$는 $10^{-3}M$ 및 $10^{-4}M$ 농도에서 저해작용을 나타냈다. 그러나 최대 활성 저해시 잔존 활성이 83%로 본 효소는 전반적으로 금속 이온의 영향을 크게 받지 않았다. 4. 본 효소의 soluble starch에 대한 $K_m$ 값은 $6.50{\times}10^{-2}$ M이었으며 1mM EDTA에 대한 $K_i$ 값은 $8{\times}10^{-2}M$로서 경쟁적 저해작용을 하였다.
2002년 8월부터 11월까지 전국 27개 지역에서 희나리 고추를 포함하고 있는 태양초 시료 40군을 수집하여 총 197주의 곰팡이를 분리하였다. 이 곰팡이들을 고체배지상에서의 번식속도, 분생포자의 모양 및 배양특성의 특성에 따라 6개의 group오로 나누었고 각 group에서 대표가 되는 30 균주를 임의로 선택하여 18S rRNA gene 염기서열을 분석하여 동정하였다. 희나리 곰팡이 중 에서 Colletotrichum 속 곰팡이가 66.5% (131/197)를 차지하여 가장 많이 분리되었고, 기타 Diaporthe phaseolorum var. sojae (28주, 14.2%), Alternaria alternata (17주, 8.6%), Botryosphaeria ribis (9주, 4.6%) Aspergillus oryzae var. oryzae (3주 1.5%) 및 Fusarium incarnatum (9주, 4.6%)이 동정되었다. 각 group에서 임의적으로 한 균주씩을 선택하여 현미에 배양한 뒤 쥐(rat)에 투여시험한 결과 A. alternata를 접종한 사료를 먹인 실험동물이 2주내에 모두 죽었으며 다른 곰팡이를 배양한 사료에는 특이한 영향이 없었다. A. alternata 곰팡이를 현미와 고추즙에 배양하여 주요 독소들을 분석한 결과 17주의 곰팡이 중 8주가 현미와 고추즙에서 많은 양 (현미: $488{\sim}1572\;{\mu}g/g$, 고추즙: $115{\sim}1050\;{\mu}g/g$)의 tenuazonic acid (TeA)를 생성하였다. alternariol(AOH)독소와 alternariol monomethyl ether (AME)는 현미에 배양했을 때만 흔적량 내지 소량씩이 관찰되었다. Alternaria 독소 중 altenuene는 현미와 고추즙 배지 모두에서 검출되지 않았다.
국내에서 분리한 20종의 Alternaria 277개 균주를 사용하여 Alternaria 진균소독인 altenuene(ALT), altertoxin-I(ATX-I) 및 tenuazonic acid(TA)의 in vitro에서의 생성능과 그 분포를 조사하였다. 각 사용균주를 200g의 살균된 쌀배지에 접종하여 $25^{\circ}C$에서 3주간 배양하였다. Alternaria 배양체들을 methanol로 추출하고 용매분획과 TLC 및 HPLC분석을 통하여 순화하였다. A. alternata와 그와 형태적으로 유사한 A. kikuchiana, A. longipes 및 A. mail는 비록 종간 및 종내의 균주간에 생성량의 차이는 매우 다양하였지만 TA를 비롯한 5종의 진균독소를 모두 생성하였다. A sesami와 A. sesamicola는 4종의 진균독소(AOH, AME, ALT, ATX-I)를 생성하였고 A. cucumerina, A. dauci, A. macrospora, A. porri, A. solani, A. tagetica와 A. zinniae와 같은 대형분생포자와 긴 beak를 형성하는 7종의 Alternaria균들은 AOH와 AME만을 생성하였다. A. brassicicola, A. helianthi, A. panax, A. radicina 및 A. raphani등 5종의 Alternaria는 5종의 진균 독소를 모두 생성하지 않았다.
Seed-borne fungi of some maize cultivars/lines grown during the months from May to September of 2001, collected from Dongguk University farm, Go Young City, IL Sang Gu, Korea were detected by blotter method. In all six fungi namely Alternaria alternata(Fr.) Keissler, Aspergillus niger Van Tiegh, Fusarium moniliforme Sheldon, Fusarium sp., Penicillium sp. and Ustilago zeae Unger. were found to associated with maize seeds. Prevalence of seed-borne fungi also varied. The highest percentages of seed-borne fungi were recorded with Fusarium moniliforme and the lowest in Penicillium sp. Transmission of all seed-borne pathogens from seeds to seedlings were also detected by test tube seedling symptom test. Among the seed-borne fungi, Alternaria alternata, Fusarium moniliforme and Fusarium sp. produced distinct seed rot and seedling infection symptoms. All the transmitted seed-borne fungi might be caused primary source of infection to the maize crop.
Species of the genus Orobanche are parasitic flowering plants, holoparasites, which cling to the roots of green plants. Their tiny seeds (200 x $250\mu\textrm{m}$) germinate in response to chemical stimuli produced by host and some non-host plants. Successful contact with their host leads to development of haustoria for obtaining water and food. The shoots above the ground expose flowers and disseminate seeds. Several samples of Orobanche ramosa, O. crenata, O. cernua, and O. egyptiaca were collected from different localities in Jordan. These samples showed one of the following disease symptoms: dry rot at the base of the stem; general deterioration and expanded lesion from base upward; soft tissue maceration of stem; and black rot of flower parts with incomplete maturation of the ovary and seeds. Isolation from diseased stems and seeds was made on three different mycological media. Several fungi were isolated, mainly, Fusarium spp., Alternaria alternata, Rhizoctonia sp., Dendrophora sp., Chaetomium sp., and an ascomycetus fungus with a perithecium. Pathogenicity tests showed that Fusarium spp. and Alternaria alternata attacked healthy living tissue of Orobanche spikes. These fungi caused lesions of black soft rot and complete deterioration within 5-7 days. They also attacked Orobanche seeds, arresting their germination and causing maceration of non-germinated and germinated seeds after 5-7 days of incubation. Meanwhile, Dendrophora sp. and Chaetomium sp. caused limited lesion at first, but were able to colonize the tissue as it aged and senesced. This study showed the presence of a potential endogenous pathogenic fungi in Jordan, which can be investigated as a biological control for Orobanche.
The seed-borne mycoflora of sorghum and foxtail millet collected from different growing areas in South Korea were isolated and taxonomically identified using dry inspection, standard blotter and the agar plate method. We investigated the in vitro and in vitro germination rates of disinfected and non-disinfected seeds of sorghum and foxtail millet using sterilized and unsterilized soil. The percent recovery of seed-borne mycoflora from the seed components of sorghum and foxtail millet seeds was determined and an infection experiment using the dominant species was evaluated for seedling emergence and mortality. A higher number of seed-borne fungi was observed in sorghum compared to that of foxtail millet. Eighteen fungal genera with 34 fungal species were identified from the seeds of sorghum and 13 genera with 22 species were identified from the seeds of foxtail millet. Five dominant species such as Alternaria alternata, Aspergillus flavus, Curvularia lunata, Fusarium moniliforme and Phoma sp. were recorded as seed-borne mycoflora in sorghum and 4 dominant species (Alternaria alternata, Aspergillus flavus, Curvularia lunata, Fusarium moniliforme) were observed in foxtail millet. The in vitro and in vitro germination rates were higher using disinfected seeds and sterilized soil. More seed-borne fungi were recovered from the pericarp compared to the endosperm and seed embryo. The percent recovery of seed-borne fungi ranged from 2.22% to 60.0%, and Alternaria alternata, Curvularia lunata and 4 species of Fusarium were isolated from the endosperm and embryo of sorghum and foxtail millet. Inoculation of the dominant seed-borne fungi showed considerable mortality of seedlings. All the transmitted seed-borne fungi might well be a primary source of infection of sorghum and foxtail millet crops.
감귤저장 방법의 개선과 감귤 껍질의 효율적인 활용을 위해서 시판 중인 농약제제와 감귤정유의 감귤부패 관련 사상균에 대한 살균 작용을 조사하였다. Alternaria alternata, Rhizopus sp., Botrytis cinerea, Monilia candida, Penicillium italicum, Penicillium digitatum 등 6종의 사상균에 대한 시판 합성 농약제제 11종의 생육저해 효과를 조사한 결과, mancozeb 또는 fluazinam을 함유한 제제의 활성 범위가 가장 넓었고, conazole 계통의 화합물이 중간 정도의 활성 범위를 나타내었으며, iprodione, benomyl, azoxtrobin 또는 thiophanate을 함유한 제제의 항균활성 범위가 가장 좁은 것으로 나타났다. 농약제제의 생육저해 효과는 대상 균주에 따라 달랐으며, Penicillium italicum과 Alternaria alternata는 각종 살균제의 처리에 대한 생존력이 비교적 강하였다. 감귤정유를 상기 6개 균주의 포자와 각각 접촉시켰을 때는 그 어느 균주의 생존 포자도 검출되지 않았으며, 감귤정유의 살균력은 paper disk법과 현미경 관찰로도 증명되었다. 이는 감귤정유가 광범위한 살균력을 지니고 있음을 제시한다. 따라서 감귤 정유를 감귤저장에 활용하는 방법을 검토할 필요가 있다.
Various kinds of leaf spots and blights were found in kiwifruit (Actinidia deliciosa) orchards on 2006 in Korea. Disease incidences were quite variable between open-field and rain-proof shelter. Rate of diseased leaves was recorded as about 70% at open-field orchards in late season but use of rain-proof vinyl shelters alleviated the disease incidences by 20%. Angular leaf spots appeared at early infection stage on June and several other symptoms were also recognized as the disease developed afterward. On September, brown leaf blights were the most frequent, followed by grayish brown ring spots, silvering gray leaf blights, zonate leaf blights, dark brown ring spots and angular leaf spots at open-field orchards. Four fungal species were frequently isolated from the disease symptoms. Phomopsis sp. was the most predominant fungus associated with the leaf spot and blight symptoms on kiwifruit, followed by Glomerella cingulata, Alternaria alternata and Pestalo-tiopsis sp. Phomopsis sp. was commonly isolated from angular leaf spots, silvering gray leaf blights, and zonate brown leaf blights. G. cingulata, A. alternata and Pestalotiopsis sp. were isolated from grayish brown ring spots (anthracnose), brown ring spots and zonate dark brown leaf blights. Typical symptoms appeared on the wounded and unwounded leaves, which were inoculated by each of Phomopsis sp., G. cingulata, and Pestalotiopsis sp., but A. alternata caused symptoms only on the wounded leaves.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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