• 한국식품과학회지
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• 제25권6호
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• pp.689-693
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• 1993

${\alpha}-galactosidase$는 raffinose와 stachyose 등의 ${\alpha}-galactoside$ 결합을 분해하는 효소이다. Raffinose와 stachyose는 특히 두류에 다량 존재하는데 이들 당은 섭취후 복부팽만감의 원인 물질로 발표되었는가 하면 한편으로는 비피더스균 증식인자로 최근에 보고된 바 있기 때문에 이들 당의 인체 건강에 대한 재평가가 요구되고 있다. 본 연구에서는 이에 대한 기초 자료로 사용하기 위하여 한국인으로부터 분리된 Bifidobacterium sp. Int-57이 생산하는 ${\alpha}-galactosidase$의 효소 특성을 조사하였다. Bifidobacterium sp. Int-57은 여러 종류의 다른 장내 세균에 비하여 높은 ${\alpha}-galactosidase$ 활성을-보유하고 있고 raffinose에 의하여 효소 생산이 증진되었다. 세포의 음파 파쇄후 DEAE-celluose와 Sepharose 6B gell filtration을 거쳐 부분정제한 효소를 사용하여 PNP-${\alpha}-galactosidase$에 대한 작용을 분석한 결과 최적 pH는 7.0, 최적온도는 $40^{\circ}C$ 였고 금속이온을 5mM 농도로 처리하였을 때 효소활성을 $CoCl_{2}$는 33%, $CuCl_{2}$는 21% 저해하였다. 또한 얻어진 효소는 실제 기질로써 raffinose와 stachyose를 잘 분해하는 것으로 나타났다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제26권4호
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• pp.552-557
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• 2013

Partially purified ${\alpha}$-galactosidase from Bacillus sp. LX-1 was non-covalently immobilized on a reversibly soluble-insoluble polymer, Eudragit L-100, and an immobilization efficiency of 0.93 was obtained. The optimum pH of the free and immobilized enzyme was 6.5 to 7.0 and 7.0, respectively, while there was no change in optimum temperature between the free and immobilized ${\alpha}$-galactosidase. The immobilized ${\alpha}$-galactosidase was reutilized six times without significant loss in activity. The immobilized enzyme showed good storage stability at $37^{\circ}C$, retaining about 50% of its initial activity even after 18 d at this temperature, while the free enzyme was completely inactivated. The immobilization of ${\alpha}$-galactosidase from Bacillus sp. LX-1 on Eudragit L-100 may be a promising strategy for removal of ${\alpha}$-galacto-oligosaccharides such as raffinose and stachyose from soybean meal and other legume in feed industry.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제44권2호
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• pp.53-58
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• 2001

Glycosidase activities in the grape flesh (Marguerite) were assayed, and the order of activity was marked as follows: ${\alpha}$-D-galactosidase>${\alpha}$-D-mannosidase>${\alpha}$-D-glucosidase>${\beta}$-D-galactosidase>${\beta}$-D-glucosidase. Of these glycosidases, ${\alpha}$- and ${\beta}$-D-galactosidases were prominently expressed by the treatment of gibberellic acid, resulting in 56 and 238% increase of activity, respectively. Most of ${\alpha}$-D-galactosidase was found in the flesh texture, and the activity increase by gibberellic acid occurred mostly in this tissue. The increase in ${\alpha}$-D-galactosidase activity was dependent on the concentration of gibberellic acid treated, showing a positive correlation. Gibberellic acid affected the content of total protein in the grape flesh, 49% increase by 75 ppm treatment. Above this concentration, higher gibberellic acid level did not influence the protein expression. Specific activity of the ${\alpha}$-D-galactosidase still increased, showing 24% increase in activity. Grape flesh subjected by gibberellic acid (100 ppm) resulted in the increased activity against a natural substrate, stachyose, showing 55% increase in activity from the grapes treated with 100 ppm of gibberellic acid. Other natural substrates, such as melibiose and raffinose, were also considerably hydrolyzed, and the extent was similar to that of stachyose hydrolysis. During postharvest storage, ${\alpha}$-D-galactosidase activity in the grape flesh increased by 51% after 20 days and then declined slowly.

• Journal of Ginseng Research
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• 제24권2호
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• pp.89-93
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• 2000

6년생 고려인삼근(panax ginseng C.A. Meyer)중 수종의 exo-O-glycosylhydrolase 활성을 중심부와 주피부로 나누어 생육시기별로 조사하였다. $\alpha$-D-galactosidase, $\beta$-D-galactosidase, $\alpha$-L-man-nosidase , N-acetyl-$\beta$-D-giucosarninidase, $\alpha$-D-galactosidase, $\alpha$-L-arabinosidase와 $\beta$-D-fucosidase는 중심부와 주피부에서 모두 활성이 있으나 $\beta$-L-mannosidase, $\alpha$-D-xylosidase, $\beta$-D-xylosidase, $\alpha$-D-rhamnosidase와 $\beta$-D-glucosidase의 효소활성은 검색되지 않았다. $\beta$-D-galactosidase의 활성은 연중 높게 유지되었고 $\alpha$-L-mannosidase의 활성도 높은 경향이었다. 인삼근중 탄수화물 대사효소의 활성은 생육시기와 환경조건 및 부위에 따라 매우 다른 양상을 나타내었다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제27권5호
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• pp.700-705
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• 2014

A 12-week feeding trial was conducted with 87 g rainbow trout to evaluate the effects on growth performances, feed efficiency and nutrient digestibility of adding ${\beta}$-mannanase and ${\alpha}$-galactosidase enzymes, solely or in combination. Seven diets were prepared by adding ${\beta}$-mannanase, ${\alpha}$-galactosidase and mixed enzyme at two different levels (1 g/kg and 2 g/kg) to control diet (without enzyme) including soybean meal. Mixed enzymes (1 g/kg, 2 g/kg) were prepared by adding ${\beta}$-mannanase and ${\alpha}$-galactosidase at the same doses (0.5+0.5 g/kg and 1+1 g/kg). At the end of the experiment, addition of ${\beta}$-mannanase, ${\alpha}$-galactosidase and mixed enzyme to diet containing 44% soybean meal had no significant effects on growth performance and gain:feed (p>0.05). In addition, adding ${\beta}$-mannanase, ${\alpha}$-galactosidase and mixed enzyme in different rations to trout diets had no affect on nutrient digestibility and body composition (p>0.05).

• 한국식품과학회지
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• 제28권5호
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• pp.987-993
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• 1996

본 연구에서는 Bifidobacterium을 우유와 두유에 접종하여 $37^{\circ}C$에서 발효 특성, 적정 발효 기간 및 효율적인 증식을 위한 생육 인자를 찾고자 하였다. 이를 위하여 pH, 산도, glucose함량, 생균수, ${\alpha}-galactosidase$활성 그리고 ${\beta}-galactosidase$활성 변화를 조사하였다. $37^{\circ}C$에서 일반 발효 특성을 측정했을 때 48시간동안 우유의 발효는 pH의 감소와 산 생성의 증가는 현저한 반면, 세포 증식을 24시간동안 증가하였으나 남은 24시간동안은 감소를 보였다. 또한 효소 반응은 ${\beta}-galactosidase$ 활성이 높은 반면, ${\alpha}-galactosidase$는 비교적 낮았으며 glucose 함량은 세포 증식기에 높았다. 두유의 경우는 우유에 비해 pH의 감소가 큰 반면 적정산도 증가는 비슷하였다. 세포 증식은 발효 2일동안 이루어졌으며, ${\alpha}-,\;{\beta}-galactosidase$ 모두 활성이 높게 나타났고, glucose 함량도 1일 동안 지속적인 증가를 나타냈다. 또한 적정 발효기간은 발효유는 24-36시간, 발효 두유는 약 24시간이 바람직한 것으로 나타났다. Bifidobacterium의 성장 촉진 인자의 영향을 발효 시간에 따른 pH와 생균수 변화로 조사한 결과, 두유에서는 fucosyllactose, 그리고 우유에서는 발효 초기에 L-cysteine·HCl, 발효 진행중에는 fucosyllactose가 효과적인 생육 인자로 작용하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제17권9호
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• pp.1430-1436
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• 2007

[ ${\alpha}$ ]-Galactosidase was immobilized in a mixture of k-carrageenan and locust bean gum. The properties of the free and immobilized enzyme were then determined. The optimum pH for both the soluble and immobilized enzyme was 4.8. The optimum temperature for the soluble enzymes was $50^{\circ}C$, whereas that for the immobilized enzyme was $55^{\circ}C$. The immobilized enzyme was used in batch, repeated batch, and continuous modes to degrade the raffinose-family sugars present in soymilk. Two hours of incubation with the free and immobilized ${\alpha}$-galactosidases resulted in an 80% and 68% reduction in the raffinose oligo saccharides in the soymilk, respectively. In the repeated batch, a 73% reduction was obtained in the fourth cycle. A fluidized bed reactor was also designed to treat soymilk continuously and the performance of the immobilized ${\alpha}$-galactosidase tested at different flow rates, resulting in a 90% reduction of raffinose-family oligosaccharides in the soymilk at a flow rate 40 ml/h. Therefore, the present study demonstrated that immobilized ${\alpha}$-galactosidase in a continuous mode is efficient for reducing the oligosaccharides present in soymilk, which may be of considerable interest for industrial application.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제39권3호
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• pp.245-251
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• 2011

Mortierella sp. 유래 효소 정제는 CM-sephadex C-50 column chromatography와 Sephadex G-100 column에 의해 수행하여 SDS-전기영동에서 단일밴드를 확인하였고 분자량은 57kDa로 결정되었다. melibiose, raffinose 및 stachyose의 세 종류의 기질에 대한 특이성에서는 Mortierella sp. 유래 정제 ${\alpha}$-galactosidase는 세 종류 기질의 비환원말단에 위치하고 있는 galactose를 모두 유리하는 특이성이 있음을 확인하였다. Bacillus sp. 유래의 $Gal^3Man_4$에 대해서 반응초기 3시간부터 가수분해가 진행되어 반응말기에서는 galactose, mannotetraose 그리고 분해되지 않고 일부 남아있는 $Gal^3Man_4$의 spot이 출현된 반면, 중합도 7의 $Gal^{2,3}Man_5$에 대해서는 반응초기부터 말기까지 전혀 특이성이 없음을 시사하였다. Trichoderma harzianum 유래의 $Gal^2Man_3$에 대해서는 반응초기 3시간부터 가수분해가 진행되어 일부 galactose와 mannotriose spot이 출현되고 있는 반면, 중합도 7의 $Gal^2Man_6$에 대해서는 Bacillus sp. 유래의 중합도 7의 $Gal^{2,3}Man_5$와 동일하게 galactose를 절단하는 능력이 없는 특이성을 보이고 있다. Xylogone sphaerospora 유래의 $Gal^2Man_3$는 Trichoderma harzianum 유래의 중합도 4와 동일한 구조로서 가수분해 시간 경과에 따른 반응말기에서 역시 galactose, mannotriose 및 잔존하는 $Gal^2Man_3$ spot이 출현하고 있는 반면 중합도 6인 $Gal^2Man_5$에 대해서는 mannopentaose의 환원말단부터 2번 mannose에 결합하고 있는 galactose에 대해서는 역시 특이성을 나타내지 않아 반응 초기부터 말기까지 가수분해 pattern에 대한 변화를 보이지 않고 있다.

• 미생물학회지
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• 제40권4호
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• pp.328-333
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• 2004

[ ${\alpha}$ ]-갈락토올리고 당인 melibiose, raffinose와 stachyose의 ${\alpha}-1,6$으로 결합된 D-galactosyl 잔기를 완전히 가수분해하는 것으로 확인된 Bacillus licheniformis YB-42의 ${\alpha}-galactosidase$는 사멸기에 도달하였을 때 배양상등액에서 최대활성을 보였다. ${\alpha}$-갈락토올리고 당의 가수분해 정도를 TLC와 환원당 생성량으로 분석한 결과, ${\alpha}-galactosidase$는 melibiose, raffinose, stachyose 순서로 가수분해 활성이 높았다. 반응산물인 당을 첨가하여 반응하였을 때 첨가 된 반응산물에 따라 가수분해 활성의 저해정도가 다르게 나타났으며, galactose에 의한 저해도가 가장 높았다. 첨가된 당의 농도 (20 mM)가 기질과 동일할 때는 가수분해 활성의 저해도가 미미하였으며 5배 농도로 첨가하였을 때도 가수분해 활성의 저해정도가 높지 않았다. 한편 소량의 효소로melibiose를 가수분해 하였을 때 반응초기에 TLC 상에서 기질보다 이동도가 낮은 물질이 생성되었으며, 이로보아 B. licheniformis YB-42의 ${\alpha}-galactosidase$는 당 전이활성을 갖는 것으로 여겨진다. 또한 대두분 추출액을 ${\alpha}-galactosidase$로 처리한 후 최종 반응산물을 분석한 결과, 대두분에 존재하는 raffinose와 stachyose가 완전히 가수분해 되었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권4호
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• pp.863-867
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• 2004

$\alpha$-Galactosidase from A. oryzae DR-5 was induced in the presence of melibiose, raffinose, galactose, and locust bean galactomannan. The enzyme was purified to homogeneity by precipitation with acetone followed by ion-exchange chromatography using DEAE-Sephacel. The purified enzyme showed a single band in both nondenaturing-PAGE and SDS-PAGE. The enzyme was a glycoprotein in nature by activity staining. The molecular weight of the purified enzyme was 93-95 kDa by SDS-PAGE. The enzyme exhibited the optimum pH and temperature at 4.7 and $60^\circ{C}$, respectively. $\alpha$-Galactosidase activity was strongly inhibited by $Ag^{2+}, Hg^{2+}, Cu^{2+}$, and galactose. EDTA, 1,10-phenanthraline, and PMSF did not inhibit the enzyme activity, whereas N-bromosuccinimide completely inhibited enzyme activity. Investigation by TLC showed complete hydrolysis of stachyose and raffinose in soymilk in 3 h at pH 5.0 and $50^\circ{C}$.