To screen molecular chaperones similar to small heat shock proteins (sHsps), but without ${\alpha}$-crystalline domain, heat-stable proteins from Schizosaccharomyces pombe were analyzed by 2-dimensional electrophoresis and matrix assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry. Sixteen proteins were identified, and four recombinant proteins, including cofilin, NTF2, pyridoxin biosynthesis protein (Snz1) and Wos2 that has an ${\alpha}$-crystalline domain, were purified. Among these proteins, only Snz1 showed the anti-aggregation activity against thermal denaturation of citrate synthase. However, pre-heating of NTF2 and Wos2 at $70^{\circ}C$ for 30 min, efficiently prevented thermal aggregation of citrate synthase. These results indicate that Snz1 and NTF2 possess molecular chaperone activity similar to sHsps, even though there is no ${\alpha}$-crystalline domain in their sequences.
고순도 반도체 감마분광시스템을 이용하여 토양 시료를 파괴하지 않고 화학 전처리 단계가 필요없는 우라늄 방사능 분석 기술을 개발하였다. 본 논문에서 제시한 방법을 이용한 분석결과와 기존에 일반적으로 사용하는 알파분광분석법(Alpha Spectrometry)의 결과를 비교하였다. 비교결과 불확도 범위 내에서 비슷한 측정값을 보였다. 따라서 본 논문에서 제시한 방법은 토양시료의 우라늄 분석에 이용될 수 있을 것이다.
Novel membrane lipids containing the unusual very long chain fatty $acid{\alpha}{\omega}-1316-dimethyloctacosanedioate$, dimethyl. Ester (DME C30) was isolated and purified from thermophilic anaerobic eubacterium, Thermoanaerobacter ethanolicus. Structures of the lipids containing the bifunctional fatty acyl components were proposed by various analyses such as $^1H,\;^{13}C,\;^{31}P$ nuclear magnetic resonance (NMR), Fourier transform infrared(FTIR) spectroscopy, gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) and fast atom bombardment mass spectrometry (FAB/MS). Combined with the GC/MS, $^1H,\;and\;^{13}C$NMR data, we confirmed that the head groups of the lipids contained the glycerol and/or glucosamine molecules. $^{31}P$ NMR spectrum also showed that the lipids contained phosphate in a phosphodiester linkage. The proposed structures of these novel lipid components were the ones in which two head groups were linked by the membrane spanning fatty acyl component(DME C30)and regular chain fatty acids on glycerol moiety of each head group.
Energy minimization and conformational studies of molecular ions generated by ESI (electrospray ionization) tandem mass spectrometry (MS/MS) can be used for the discrimination of stereoisomeric permethylated and sodium cationized trisaccharides. Sets of fucose-containing trisaccharides having different internal and terminal linkages have been synthesized to analyze the reducing terminal linkage positions using BT and IT fusion approaches. A detailed investigation has been undertaken on the conformational behaviors of four trisaccharide fragments from human milk and blood group determinants of Type 1 and Type 2, namely Fuc($\alpha$1- 3)Gal($\beta$1-3)GalNAc and Fuc($\alpha$1-3)Gal($\beta$1-X)GlcNAc where X = 3, 4 and 6 using molecular modeling methods. Three dimensional rigid and adiabatic phi-psi-energy maps (Surfer program) describing the energy as a function of rotation around corresponding glycosidic linkages were calculated by SYBYL molecular modeling and MM4 force field programs conjunction with cleavage energies of ESI MS/MS for the side group orientations. This approach predicted conformational behaviors exhibited by isomer saccharides for future applications on biologically active glycoconjugates and to exploit a faster method of synthesizing a series of structural isomeric oligosaccharides.
꽃송이 버섯(S. crispa)을 80 % MeOH 수용액으로 추출하고, 추출물을 EtOAc, n-butyl alcohol 및 물 분획으로 나누었다. EtOAc 분획과 n-BuOH 분획에 대해 $SiO_2$ 및 ODS column chromatography를 반복적으로 실시하여 2종의 ergosterol peroxide를 분리, 정제하였다. infrared spectrometry, nuclear magnetic resonance 및 FAB-MS data를 해석, 화합물 1과 2를 ergosterol peroxide와 3-O-${\beta}$-D-glucopyranosyl ergosterol peroxide로 각각 구조동정 하였다. 두 화합물 모두 꽃송이 버섯으로부터는 이번 실험에서 처음으로 분리되었다.
He, Zhi-guo;Hu, Yue-Hua;Zhong, Hui;Hu, Wei-Xin;Xu, Jin
BMB Reports
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제38권3호
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pp.307-313
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2005
Thiobacillus ferrooxidans is one of the most important bacterium used in bioleaching, and can utilize $Fe^{2+}$ or sulphide as energy source. Growth curves for Thiobacillus ferrooxidans have been tested, which show lag, logarithmic, stationary and aging phases as seen in other bacteria. The logarithmic phases were from 10 to 32 hours for Thiobacillus ferrooxidans cultivated with $Fe^{2+}$ and from 4 to 12 days for Thiobacillus ferrooxidans cultivated with elemental sulphur. Differences of protein patterns of Thiobacillus ferrooxidans growing on elemental sulphur and $Fe^{2+}$ separately were investigated after cultivation at $30^{\circ}C$ by the analysis of two-dimensional gel electrophoresis (2-DE), matrix-assisted laser desorption/ ionization (MALDI)-Mass spectrometry and ESI-MS/MS. From the 7 identified protein spots, 11 spots were found more abundant when growing on elemental sulphur. By contrast 6 protein spots were found decreased at elemental cultivation condition. Among the proteins identified, cytochrome C have been previously identified as necessary elements of electron-transfering pathway for Thiobacillus ferrooxidans to oxidize $Fe^{2+}$; ATP synthase alpha chain and beta are expressed increased when Thiobacillus ferrooxidans cultivated with $Fe^{2+}$ as energy source. ATP synthase Beta chain is the catalytic subunit, and ATP synthase alpha chain is a regulatory subunit. The function of ATPase produces ATP from ADP in the presence of a proton gradient across the membrane.
Objective : We recently reported that OMC-2010 has an immuno-modulatory effects via inhibiting tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ and interleukin (IL)-5. However, we did not find out which constituents play an important role in immuno-modulatory effect of OMC-2010. Thus, this study was performed to estimate the effects of constituents of OMC-2010 on cytokine production in mouse spleen cells, then ultimately reach to find out effective constituents regulating splenic cytokine production. Methods : Mouse spleen cells were pre-treated with water and ethanol extract of constituents of OMC-2010 such as Rehmannia glutinosa (RG), Pinellia ternata (PT), Citrus unshiu Markovich (CUM), Glycyrrhiza uralensis (GU), Platycodon grandiflorum (PG), Schisandra chinensis (SC). After 1 h, the cells were stimulated with lipopolysaccharide (LPS, 1 ${\mu}g/ml$) for 48 h. Then the cells were harvested for real-time reverse transcription polymerase chain reaction to detect cytokine productions. Results : The water extract of RG extract significantly inhibited the LPS-induced inTNF-${\alpha}$ and IL-5 mRNA expressions, but the water extract of PT, CUM, GU, PG, and SC did not. The ethanol extract of RG, PT, and SC significantly inhibited the LPS-induced TNF-${\alpha}$, and IL-5 mRNA expressions, but the ethanol extract of CUM, GU, and PG did not. Conclusions : Theses results could suggest that the water extract of RG and the ethanol extract of RG, PT, and SC inhibited the expression of TNF-${\alpha}$ and IL-5, which means that the possible candidate of OMC-2010 water extract's action might be RG, and ethanol extract's action might be RG, PR, and SC.
The volatile composition of Kiyomi peel oil cultivated in Korea was studied by using gas chromatography and gas chromatography-mass spectrometry. The peel oil from the Kiyomi fruit was prepared by using a cold-pressing extraction method. Among the 65 components quantified in Kiyomi oil, 25 terpene hydrocarbons and 40 oxygenated compounds were identified, with peak weight percentages measuring 94.5% and 4.9%, respectively. Limonene was the predominant compound (87.5%), followed by myrcene (2.4%), sabinene (0.9%), $\alpha$-pinene (0.8%), $\beta$-sinensal (0.8%), (Z)-$\beta$-farnesene (0.7%), neryl acetate (0.6%), valencene (0.5%), $\alpha$-farnesene (0.5%), and $\alpha$-sinensal (0.5%). A unique characteristic of the volatile profile of the Kiyomi oil was the proportion of aldehydes (2.7%), which resulted from the relative abundance of $\alpha$- and $\beta$-sinensal. Another unique characteristic of the Korean Kiyomi oil was its relative abundance of $\beta$-sinensal, (Z)-$\beta$-farnesene, neryl acetate, valencene, $\alpha$-sinensal and nootkatone. Valencene and $\alpha$- and $\beta$-sinensal were regarded as the influential components of Korean Kiyomi peel oil.
Human follicular fluid (HFF) is the in vivo microenvironment for oocyte maturation and includes a variety of proteins that could be involved in oocyte development and fertilization. We therefore used a proteomic approach to identify new HFF proteins. HFF from mature human follicles was obtained from five women following oocyte collection for in vitro fertilization (IVF). Ethanol-precipitated HFF run on two-dimensional gel electrophoresis (2DE) produced approximately 250 Coomassie brilliant blue-stained spots, 64 of which were identified using matrix-assisted laser desorption/ionization-mass spectrometry (MALDIMS). In this study, several proteins including complement factor H, inter-${\alpha}$ (globulin) inhibitor H4, inter-${\alpha}$-trypsin inhibitor heavy chain H4 precursor, human zinc-${\alpha}$-2-glycoprotein chain B, PRO2619, PRO02044, and complex-forming glycoprotein HC were new proteins that have not been previously reported in HFF using proteomic methods. Additionally, we identified alloalbumin venezia for the first time from trichloroacetic acid (TCA)-precipitated HFF. These HFF proteins could serve as new biomarkers for important human reproductive processes.
Chemical shift values of ${\alpha}$-proton of trans- and cis-methyl cinnamates are well correlated with ${\sigma}({\sigma}_1,\; {{\sigma}_R}^{\alpha})$, and (F, R) (r=0.999-0.879). It is observed that (1) the degree of variation of ${\delta}H_{\alpha}$ value by varying the substituents in trans-cinnamates is similar to that of cis-cinnamates $({\rho}_{trans}=0.296,\;{\rho}_{cis}=0.2840, (2) resonance contribution is larger in the trans-cinnamates than that in the cis-cinnamates, but inductive contribution is reversed, (3) for m-substitued derivatives, resonance contribution is very small compared to that for p-substituted derivatives.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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