Kim, Min-Ji;Bae, Nan-Yong;Bark, Si-Woo;Kim, Koth-Bong-Woo-Ri;Park, Ji-Hye;Park, Sun-Hee;Ahn, Dong-Hyun
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.48
no.6
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pp.888-897
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2015
The anti-inflammatory effect of alginate oligosaccharides on LPS-induced RAW 264.7 cells was investigated at different time points (0-60 h). The alginate oligosaccharides were produced by an alginate-degrading enzyme from Shewanella oneidensis PKA1008. The alginate oligosaccharides decreased the production of nitric oxide and proinflammatory cytokines [tumor necrosis factor-${\alpha}$, interleukin (IL)-$1{\beta}$, and IL-6] in a dose-dependent manner. The alginate oligosaccharides showed peak anti-inflammatory activity after 36 h of incubation; at that time point, reduced protein expression of NF-${\kappa}B$ p65, iNOS, and COX-2 was detected. Furthermore, the alginate oligosaccharide treatment reduced the formation of ear edema at 36 h compared to samples examined at 0 h when the oligosaccharides were administered at 50 and 250 mg/kg body weight, as well as dermal thickness and mast cell numbers in a histological analysis. These results suggest that alginate oligosaccharides are a promising anti-inflammatory agent.
Alginate lyase from Streptomyces violaceoruber was purified by DEAE sephacel chromatography and SP sepharose chromatography. The specific activity of the purified enzyme was 14.6 units/mg protein, representing a 40.6-fold purification of the crude extract. The final preparation thus obtained showed a single band on Tricine-SDS polyacrylamide gel electrophoresis whose molecular weight was determined to be 23.3 kDa. The polyMG block of sodium alginate was hydrolyzed by the purified alginate lyase and then separated by activated carbon column chromatography and bio gel P-2 gel filtration. The main hydrolysates were composed of hetero type M/G-oligosaccharides with the degrees of polymerization (D.P.) being 6 and 8. To investigate the effects of hetero type M/G-oligosaccharides from the sodium alginate on the growth of some intestinal bacteria, cells were cultivated individually on the modified-MRS medium containing D.P. 6 and 8 M/G-oligosaccharides. B. longumgrew 4.25-fold and 6.44-fold more effectively by the treatment of D.P. 6 and 8 M/G-oligosaccharides compared with those of standard MRS medium. In addition, B. bifidumgrew 3.3-fold and 5.4-fold more effectively by the treatment of D.P. 6 and 8 M/G-oligosaccharides. In conclusion, D.P. 8 was more effective than D.P. 6 hetero M/G-oligosaccharides as regards the growth of Bifidobacteriumspp. and Lactobacillus spp.
This study was carried out to prepare the depolymerized alginates by physical treatment processing with organic acids. The applied physical treatment methods were autoclaving, microwaving, and ultrasonicating, Among several physical depolymerization methods, autoclaving treatment was the most effective for hydrolyzing the alginate to low molecular compounds such as oligosaccharides. Citrate was most effective catalyst in hydrolyzing alginate to some oligosaccharides among organic acids. An acceptable autoclaving conditions for hydrolyzing alginate to oligosaccharides were to treat at $110^{\circ}C$ for 90 min and $120^{\circ}C$ for 60 min, respectively. The maximum depolymerization percentage produced by autoclaving was $56.8\%$. The depolymerized alginates prepared by autoclaving at $110^{\circ}C\;and\;120^{\circ}C$ has oligosaccharides of $3\~4 $and $7\~8$ species, respectively. The optimum condition for alginate oligosaccarides was autoclaving treatment with $0.5\%$ citrate solution at $120^{\circ}C$ for 90 min.
For the purpose of production of oligosaccharides from alginates, a bacterium was isolated from seaweed, and then an enzyme which degraded alginates was obtained from the bacterium. A specific activity of the enzyme was shown in G-rich block and Na-alginate (Wako Co.) as a result of reaction between the enzyme and six types of alginates (G-rich block, M-rich block and 4 commercial Na-alginate). Degradation products were prepared from the Na-alginate (Wako Co.) by the enzyme. The oligosaccharides were fractioned by Sephadex G-25 and Bio-gel P-2 and identified on a thin layer chromatography (TLC). Degree of polymerization (DP) of the oligosaccharides was shown from 2.6 to 7.5.
Kim, Hyun Ji;Lee, Sung-Mok;Kim, Sung-Koo;Lee, Jae-Hwa
Applied Chemistry for Engineering
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v.23
no.1
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pp.100-104
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2012
Oligosaccharides production showed various biological activities in vivo like functional foods and industrial materials utilized available within many practical applications which have obtained from the degradation of alginate. Alginate is rich in the main component of seaweeds especially the brown algae. We investigated what degrading alginate from seaweeds to make alginate oligosaccharides can utilize in various fields using enzyme secreting Erwinia tasmaniensis. In this study, we observed an optimal culture condition of E. tasmaniensis, and characteristics of alginate lyase secreting E. tasmaniensis. These bacteria, E. tasmaniensis, were isolated from Nuruk. In this case, a suitable growth factor for E. tasmaniensis was culture it for 36 h in broth media on concentration of 1.0% (w/v) alginate. The enzyme showed the highest level of alginate lyase activity when cultured on broth media containing 1.0% (w/v) sodium alginate for 72 h. Optimal condition of pH, temperature and duration time for alginate lyase activity were found to be pH 6.0, $20^{\circ}C$ and 60 min, respectively.
To separate chitosanoligosaccharides easily by size exclusion, an coencapsulating technology of substrate and enzyme was developed. Chitosan and chitosanase were enveloped in this membrane and the product released to medium by size exclusion. The lower limit of the alginate concentration and the agitation speed were 0.5% and 40 rpm, respectively. Membrane thickness and capsules diameter were $10{\mu}m$ and approx. 3.0mm, 1.5mm, respectively. The molecular weight difference by concentration and cps of alginate were of little significance. And also, the molecular weight of distribution according to enzyme concentration was low concentration of enzyme produced high molecular weight of oligosaccharides. At 1.5mm size of capsule, product diffusion rate to outer part was higher than other capsules. The molecular weight distribution of the released oligosaccharides ranged from 1000 to 6000 Da.
This study investigated the characterization and functionality of Undaria pinnatifida root (UPT) extracts, degraded using a crude enzyme from Shewanella oneidensis PKA1008. To obtain the optimum degrading conditions, the UPT was mixed with alginate degrading enzymes from S. oneidensis PKA 1008 and was incubated at 30℃ for 0, 3, 6, 12, 24, and 48 h. The alginate degrading ability of these enzymes was then evaluated by measuring the reducing sugar, viscosity, pH and chromaticity. Enzymatic extract at 24 h revealed the highest alginate degrading ability and the lowest pH value. As the incubation time increased, the lightness (L ⁎) also decreased and was measured at its lowest value, 39.84, at 12 hours. The redness and yellowness increased gradually to 10.27 at 6 h and to 63.95 at 3 h, respectively. Moreover, the alginate oligosaccharides exhibited significant anti-inflammatory activity. These results indicate that a crude enzyme from S. oneidensis PKA 1008 can be used to enhance the polysaccharide degradation of UPT and the alginate oligosaccharides may also enhance the anti-inflammatory effect.
Kim, Geun-Hyub;Lee, Sung-Mok;Choi, Soo-Jeong;Lee, Jae-Hwa
KSBB Journal
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v.26
no.6
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pp.538-542
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2011
The research was purposed production of oligosaccharide from alginate hydrolysis the main composition in cell walls of sea weed. We was isolated 252 strains from sea water and mud flat, the highest alginate lyase activity was selected, and identified as Sanguibacter keddieii NC9 by 16S rDNA sequence analysis. In this study was select the sodium alginate concentration, pH, temperature for the production of alginate lyase activity. Alginate lyase activity was confirmed from plate assay with 10% cetylpyridinium chloride. The optimum culture conditions for the production of alginate lyase were sodium alginate 10 g/L, peptone 5 g/L, $40^{\circ}C$, pH 9 and 36 hours incubation time. Sanguibacter keddieii NC9, its alginate lyase would be useful for the production of bioenergy and biofunctional oligosaccharides from sea weed.
The effective diffusion coefficients of glucose, sucrose and fructo-oligosaccharides in Ca-alginate gel beads at high concentration of sucrose solutions were investigated at $50^{\circ}C$. A mathematical model for the kinetics of fructo-oligosaccharide production using immobilized cells was proposed and compared with experimental results varying the bead size, the substrate concentration and the bead ratio. Very low values of diffusion coefficients ranging $1.2-7.6\times10^{-7}\textrm{cm}^2$/sec were obtained, and the predicted results were in good agreement with experimental ones in all cases tested.
To easily separate chitosanoligosaccharides by size exclusion, an coencapsulating technology of substrate and enzyme was developed. The membrane was composed of alginate and a divalent cation such as calcium. Chitosan and chitosanase were enveloped in this membrane and the product released to medium by size exclusion. The capsule was stabilized in a 2% acetic acid solution (pH 5.0) containing 0.145 M CaCO$_3$. The leakage of substrate caused by the agitation speed was controlled by increasing alginate and CaCO$_3$concentrations. The lower limit of the alginate concentration and the agitation speed were 0.5% and 49rpm, respectively. Membrane thickness and capsule diameter were 10$\mu\textrm{m}$ and 2.5mm, respectively. By TLC analysis, the composition of chitosanoligosaccharides were mainly 3-6 mers. The molecular weight distribution of the released oligosaccharides ranged from 262 to 3624 Da by GPC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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