Park, Sang-Woo;Park, Su-Jeong;Han, Se-Jong;Lee, Jin-Won;Kim, Dong-Shik;Kim, Ji-Heung;Kim, Byung-Woo;Lee, Jee-Won;Sim, Sang-Jun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.7
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pp.1208-1212
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2007
Production of extracellular epothilone B, one of the potent anticancer agents, by free and immobilized Sorangium cellulosum was studied using the repeated batch culture process. The concentration of alginate used in immobilization was directly related to the mass transfer rate of nutrients, mechanical stability, and the epothilone B production yield. With the optimized 3% (w/v) calcium alginate carrier, a prolonged repeated batch culture was investigated for the 5 repeated batches for 24 days. The maximum productivity of epothilone B obtained from the alginate-immobilized cells was 5.03 mg/l/day, which is 3 times higher than that of free cells (1.68 mg/l/day).
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.31
no.2
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pp.147-152
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2009
In this study, the applicability of alginate-immobilized Pseudomonas putida mt-2 KG1206 on the environments, contaminated with toluene analogs was conducted. Genetically engineered strain KG1206 produces light by direct (m-toluate, benzoate) and indirect (toluene, xylenes) inducers. The protocol for the alginate-immobilization was determined in terms of the cell to alginate ratio, solution, proper number of alginate beads, and other conditions. Maximum bioluminescences of five chemicals by immobilized strain were generally observed in following orders: m-toluate > p-xylene > toluene > o-xylene > m-xylene. In relationship between bioluminescence activity and inducer reduction, initial m-toluate (5 mM) in solution was removed approximately 48% of initial at 5 h exposure, showing continuous decrease of inducer chemical in solution. These results of study with alginate-immobilized beads would be useful, especially, for biomonitoring of contaminated environments with specific compounds, such as petroleum hydrocarbon compounds including toluene analogs.
The biosorptlon perFormances of copper were Investigated by the immobilized biomass of nonliving marine brown algae Undaria pinnatifida by each of the Ca-alginate method(Ca-ALG), Ba-alginate method(Ba-ALG), polyethylene glycol method(PEG), and carrageenan method (CARR). The copper removal performance increased but the copper uptake decreased as the biomass amount was increased. However, the copper uptake by the immobilized biomass increased with increasing initial copper concentration. Among the immobilization methods, the copper uptake decreased in the following sequence: Ca-ALG > Ba-ALG > PEG > CARR. The pattern of copper uptake by the immobilized biomass fitted the Langmuir isotherm better than the Freundlich isotherm. Desorption of deposited copper with 0.05 ~0.5M HCI, resulted in no changes of the copper uptake capacity of the immobilized biomass by the immobilization methods except for PEG, through five subsequent biosorptioydesorption cycles. There was no damage to the immobilized biomass which retained its macroscopic appearance in repeated copper uptake/elution cycles.
Plant cell immobilization can protect plant cells from shear forces and increase the stability of gene. An additional advantage of immobilization is the easiness for performing continuous culture with cell recycling. Therefore plant cell immobilization can overcome the limitations of plant cell applications. In addition, target protein should be selected from pharmaceutical proteins to get rid of low expression level problem. The enhanced production of human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (hGM-CSF) was investigated in immobilized Nicotiana tabacum suspension cell cultures. When the cells were immobilized in polyurethane foam, specific production of hGM-CSF was higher than that in alginate bead immobilization. Optimum continuous culture condition was the addition of 60 g/L sucrose in growth media with exchanging media every 6 day. Under the same condition, specific hGM-CSF production was 7 times higher in a 500-mL spinner flask than that in 100-mL Erlenmeyer flasks. Therefore, development of an effective immobilization process would be possible when the advantage of easy cell recycling was used. Consequently, enhanced production of target proteins could be possible in immobilized continuous cultures when the advantages of immobilization were applied.
The optimal conditions and properties for the immobilization of marine bacterium Pseudomonas aeruginosa BYK-2 have been determined. For the high productioon of biosurfactant, Na-alginate, PVA, modified PVA were used as a carrier. The optimal emulsifying activity on immobilized Pseudomonas aeruginosa BYK-2 showed 1036Unit (about 2.2g/L biosurfactant) in Basal salt medium(B.S.M.) at $25^{\circ}C$, 100rpm. Ca-alginate was selected the optimal bead among PVA, modified PVA and Ca-alginate. The optimal cell load in alginate bead was 10 gCWW/100g carrier. As the results of incubation of immobilized 5g Ca-alginate bead (conditions; 3% alginate, bead diameter: 2.3mm, 10% cell load) in 50m1 production medium, The emulsifying activity of 1407Unit, about 3.0g/L biosurfactant was obtained from immobilized cell after cultivation of 92hr at $25^{\circ}C$, 100rpm.
KIM Sung-Koo;SEO Jae-Koan;LEE Jong-Seok;KONG In-Soo;SUH Keun-Hack
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.30
no.5
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pp.816-822
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1997
The immobilization of a microorganism has been rapidly progressed with the development of biotechnology in recent years. Although it has been used as a tool to isolate products from biological media in various areas, it has not yet been practiced in the treatment of waste water. In this paper, we suggest a possibility to apply the immobilization technique In the recirculating aquaculture system. We examined the ability of $NH_4^+$ removal by nitrifier consortium immobilized in $Ba^{++}-alginate$, k-carrageenan and agar bead at the concentration of 50 g/L, respectively. In order to use the immobilized nitrifier consortium as media in the fludized bed reactor, the strength of bead was measured. $Ba^{++}-alginate$ as a support material showed higher strength of bead. Also, the nitrifier consortium immobilized in $Ba^{++}-alginate$ showed higher nitrification activity that could remove 20 mg/L ammonium ion than those immobilized in other two support materials, carrageenan and agar. The immobilized nitrifier consortium showed better nitrification activity than free nitrifier consortium.
Photobacterium phosphoreum was used in order to study response to heavy metal including $HgCl_2$, $CdCl_2$, $MnSO_4$ and $ZnSO_4$ in view of developing monitoring system for toxic substances. The concentrations of heavy metal causing 50% reduction($EC_{50}$) in bioluminescence intensity were determined with both free and immobilized P. phosphoreum. The bioluminescence responses were examined at various concentrations of heavy metal after 10, 20 and 30 min of exposure. The linear correlation between Gamma values and concentrations of heavy metal was obtained and $EC_{50}$ was calculated from the linear correlation. The significant inhibitory concentrations for bioluminescence emission were found to be 0.05mg/L for $HgCl_2$, 25mg/L for $CdCl_2$, 50mg/L for $MnSO_4$ and 12.5mg/L for $ZnSO_4$, respectively. The free cell and disc type were shown to be more sensitive to heavy metal than cells mixed with Na-alginate or immobilized on Sr-alginate. However, the linear regression curves were derived from the Sr-alginate immobilized cells indicating the immobilization method is a useful tool for monitoring of heavy metal under more stable condition of bioluminescence.
Photobacterium phosphoreum was used for the study of bioluminescence response to toxic substances including phenol, As2O3, SoO2, and CrO3 in view of developing monitoring system. measurement of inhibition of bioluminescence in P. phosphoreum has been proposed as a sensitive and raped procedure to monitor toxic substances. The concentration of toxic substance causing 50% light reduction(EC50) in bioluminescence intensity was determined with free and immobilized P. phosphoreum, The minimum inhibitory concentrations (MICs) for bioluminescence emission were found to be 400ppm for As2O3, 800ppm for phenol, 60ppm for SeO2 and 60ppm for CrO3 , respectively. The linear correlation between Gamma value and the concentration of toxic substances was obtained and EC50 wa calculated from the linear correlation. The free cells were shown to be more sensitive to toxic substances than cells immobilized on Sr-alginate and Ca-alginate. However, the linear regression curves were derived from the Sr-alginate immobilized cells indicating the immobilization method in s useful tool for monitoring of toxic substances under the more stable condition of bioluminescence.
It was investigated the biosorption performances of copper by the immobilized biomass of nonliving marine brown alge h. fusiformis by each of the Ca-alginate method(Ca-ALG), Ba-alginate method(Ba-ALG), polyethylene glycol method(PEG), and carrageenan method (CARR). The copper removal performance increased but the copper uptake decreased as the biomass amount was increased. However, the copper uptake by the immobilized biomass increased with increasing initial copper concentration. The copper uptake by the immobilized biomass of the immobilization method decreased in the following sequence; Ca-ALG>Ba-ALG>PEG>CARR among the immoblization emthods. The copper uptake by the immobilized biomass followed the Langmuir isotherm better than the Freundlich isotherm.
Primary hepatocytes of small animals such as rat and rabbit were often used for the study of extracorporeal liver support systems. Freshly isolated rat hepatocytes form spheroids within tow days when cultivated as suspension in spinner vessels. These spheroids showed enhanced liver specific functions and more differentiated morphology compared to hepatocytes cultured as monolayers However, shear stress caused by continuous agitation deteriorated spheroids gradually. In this work we immobilized spheroids to prolong liver specific activities. First, hepatocyte spheroids were suspended in collagen solution containing calcium chloride and then dropped into alginate solution. A thin layer of calcium alginate was formed around the droplet and then was removed after the inner collagen was gelled by treatment of sodium citrate buffer. Spheroids embedded in collagen-gel bead maintained liver specific functions such as albumin secretion rate longer than hepatocyte spheroids exposed to shear stress. Therefore, we suggest that this immobilization technique may offer an effective long-term hepatocyte cultivation and facilitase the development of a bioartificial liver support device.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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