Electrochemical behavior of fluoroquinolone antibacterial agents on carbon paste electrode (CPE) were investigated by cyclic voltammetry and square wave adsorptive stripping voltammetry. The fluoroquinolone antibacterial agents tested in this study were Enrofloxacin (ENR), Norfloxacin (NOR), Ciprofloxacin (CIP), Ofloxacin (OFL) and Levofloxacin (LEV). In acetate buffer at pH 4.5, the oxidation peak potentials of the fluoroquinolone antibacterial agents of ENR, NOR, CIP, OFL, and LEV were 0.952 V, 1.052 V, 1.055 V, 0.983 V, and 0.990 V (vs. Ag/AgCl), respectively. And their oxidation peak currents from square wave adsorptive stripping voltammograms are proportional to the concentration of each antibacterial agent over the range from $0.2\;{\mu}M$ to $1\;{\mu}M$.
This study was carried out to establish the standard karyotype of Jeju horse by G-, C- and AgNOR-banding patterns. Blood samples were collected from 37 Jeju horses and 24 Thoroughbred that had been raised at the National Institute of Subtropical Agriculture in Jeju. The lymphocytes were cultured in vitro and then chromosomes prepared. The diploid chromosome number of Jeju horse is 64, which consists of 31 pairs of autosomes and X, Y sex chromosomes. The Jeju horse has 13 pairs of metacentric/submetacentric and 18 pairs of acrocentric autosomes. The X chromosome is the fifth largest submetacentric, while the Y chromosome is one of the smallest acrocentric chromosomes. The G-banding pattern of Jeju horse chromosomes showed a light band at centromeres in all autosomes, and also exhibited a typical and identical banding pattern in each homologous chromosome. Overall chromosomal morphology and positions of typical landmarks of the Jeju horse were virtually identical to those of International Committee for the Standardization of the Domestic Horse Karyotype. C-bands of Jeju horse chromosomes appeared on centromeres of almost all autosomes, but chromosome 8 showed a heterochromatin heteromorphism. The NORs in Jeju horse chromosomes showed polymorphic patterns within breed, individuals and cells. By the AgNOR staining, the NORs were located at the terminal of p-arm on chromosome 1 and near centromeres on the chromosome 26 and 31. The mean number of NORs per metaphase was 4.68 in Jeju horse.
Nucleolar organizer regions (NOR) are loops of ribosomal DNA(rDNA) which are transcribed by RNA polymerase I. They produce ultimately ribosome and protein. Thus they are believed to reflect nuclear activity. We applied silver colloid staining technique to human glioma to examine relationship between the mean number of Ag-NOR and histopathological grading. The mean number of Ag-NOR(${\pm}$ S.E of the mean)were $1.17{\pm}0.07$ in normal brain, $1.53{\pm}0.25$ in astrocytoma, $2.37{\pm}0.71$ in malignant astrocytoma, and $2.88{\pm}0.41$ in glioblastoma multiforme. And there was a statistically significant difference among these. The results show that Ag-NOR technique is a rather simple and rapid method and will become a helpful tool for estimation of the proliferative potential of glioma.
The purpose of this study was to determine the effect of high voltage pulsed current (HVPC) stimulation on proliferative activities of basal keratinocytes by measured nucleolar organizer region (NOR) expression and thickness of spinous layer in aged rat skin. Fifty-one weeks old twelve male Sprague-Dawley rats (300∼350g) were divided into control and HVPC stimulation groups. Each animal's hair on the back were removed. The HVPC stimulation group received an negative monophasic twin peak pulsed current stimulation with 50 V, while the control group was given the same treatment without electricity. The rats were sacrificed after 3 weeks. The biopsy specimens were fixed in formalin, embedded in paraffin and stained with hematoxyline-eosin and silver nitrate. The thickness of basal to granular layer of the epidennis were measured using a light microscope and computerized image analysis system. The number of argyrophilic nucleolar organizer region (AgNOR) were counted using a light microscope and computerized image analysis system and calculated as the mean number of AgNOR per nucleus in the basal keratinocyte. By using a Student's t-test, an increase in the thickness of basal-spinous layer (P<0.001) of epidermis can be observed in HVPC stimulation rats as compared with the control rats, whereas the thickness of the granular layer is not affected. A Student's t-test showed a significantly higher mean NOR number per nucleus of the basal keratinocyte in the HVPC stimulation rats than control rats (P<0.001). There was significantly positive correlation between the NOR number and the thickness of basal-spinous layer (r=0.80, P<0.05). These results suggest that the HVPC stimulation may increase the thickness of spinous layer in the epidennis due to increased proliferative activities of basal keratinocytes in epidennis in aged rat skin.
Colorectal cancer is a very prevalent diagnosed cancer. The current study was performed in order to examine the role of BRAE (Basella rubra aqueous extract) in regulating aberrant crypt foci (ACF) formation, cell proliferation and inhibition of apoptosis in a colon carcinogenesis model in male Wistar rats. Rats were randomly allocated into six groups. Group I served as control, and group II acted as a drug control administered BRAE (250mg/kg b.w.) orally for 30 weeks. Rats in group III-VI were given subcutaneous injections of DMH (25mg/kg b.w. weekly) for 15 weeks to initiate colon carcinogenesis. Those in group IV and VI were administered BRAE along with DMH injections. Rats in group V were administered with BRAE after cessation of DMH injection. After 30 weeks of experimental period colons were obtained from experimental groups and analyzed for ACF incidence, argyrophilic nucleolar organizing region-associated proteins (AgNOR) count, histopathological and immunohistochemical changes. Only in DMH exposed groups were ACF and AgNOR numbers increased. Administration of BRAE appreciably decreased the numbers of ACF and AgNOR in BRAE treated groups. Histopathological findings revealed a high level of dysplastic changes with decreased number of goblet cells found only in only DMH injected rats. Administration of BRAE in treated group rats reversed these changes. Expression markers for cell proliferation (PCNA and Ki67) were elevated in DMH treated rats, but reduced with BRAE treatement. This expression was reversed with apoptosis markers (p53 and Caspase-3). Thus the results results of the present study were found to be significant and confirmed the potential efficacy of BRAE against colon carcinogenesis.
Using the G-, C-, and NOR-banding techniques, a karyotyping for Korean Native Pig was performed. Blood samples were collected from 50 male Korean Native Pigs that had been bred at the National Livestock Research Institute and then blood cells were prepared from in vitro cultures followed by karyotyping; G-, C-, and NOR-banding patterns of metaphase chromosomes were analyzed. The karyotype of Korean Native Pig is 38, XX or XY which consists of 5 pairs of submetacentric chromosomes(Group I), 2 pairs of acrocentric chromosomes with short p-arm(Group II), 5 pairs of medium metacentric chromosomes(Group III), 6 pairs of acrocentric chromosomes(Group IV) and metacentric X and Y sex chromosomes. On GTG-banding, the Korean Native Pig exhibited a typical and identical banding pattern in each homologous chromosomes. Overall chromosomal morphology and positions of typical landmarks of the Korean Native Pig were virtually identical to those of Committee for the Standardized Karyotype of the Domestic Pig(CSKDP). However, numbers of G-bands of the Korean Native Pig chromosomes were more than those of CSKDP. In chromosomes 1, 3, 5, 6, 7, 8, 13, 14, 15, 16, 17, 18 and X, the Korean Native Pig exhibited more separated bands as compared with CSKDP. In C-banding patterns, although the quantity of heterochromatin was variable in each chromosome, most of the Korean Native Pig chromosomes had heterochromatic C-bands on centromeres. However, the heterochromatic C-band was constantly observed on the whole Y chromosome. In AgNOR staining, the NORs were located at centromeres on the chromosomes 8 and 10. The number of NORs per metaphase ranged from 2 to 4 giving a mean value of 2.13. The number of NORs were distributed on all chromosome pair 10 but not on chromosome 8. The sizes of NORs were also differed between homologous chromosomes 8. Numbers of NORs of Korean Native Pig were significantly higher than those of Yorkshire. The pattern of pig NORs was polymorphic in breeds, individuals and cells, especially on chromosome 8.
In the present study, we have evaluated cytotoxic effects, antitumor activities and metastasis inhibitory effects of Palsun brewing water in NIH 3T3 cells, human epitheloid carcinoma cells, and human skin melanoma cells. The light microscopic study showed morphological changes, AG-NOR (argyrophylic nucleolar organizer region) by silver chloride stain, and glycoprotein by PAS (periodic acid stain) reaction of the treated cells. Disruptions in cell organelles were determined by colorimetric methods; MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide) and SRB (sulforhodamine B protein) assays. These results suggest that Palsun Brewing Water retains no cytotoxic effects in NIH 3T3 cells and a growth-inhibitory activity in cancer cell lines.
Cytogenetic analysis was conducted to obtain basic information for chromosome manipulation of starry flounder Platichthys stellatus. Nuclear surface area and volume of erythrocyte were $7.60{\pm}0.93{\mu}m^2$ and $12.80{\pm}1.75{\mu}m^3$, respectively. The haploid DNA content of the species was 0.66 pg/haploid cell which correspond to 93% of olive flounder Paralichthys olivaceus. A karyotype analysis was also carried out with the species using conventional staining and Ag-NOR banding techniques. It was consisted of 48 acrocentric chromosomes and inter-sex or intra-individual polymorphism was not detected in all specimens analyzed. The NOR regions, appearing a terminal position of the short arm of the smallest acrocentric pairs.
The purpose of this study was to determined the effect of low-frequency electrical stimulation on the denervated gastrocnemius muscles of the albino rats, Sprague-Dawley. Fifteen Sprague-Dawley adult male albino rats were divided into non-treated (normal) group, denervated (control) group, denervated and electrical stimulated (experiments). The gastrocnemius muscles of the right leg were submaximally stimulated with 30 Hz electrical stimulation. After 4-week period, the animals were sacrificed, and muscle were removed, fixed by immersion, and processed for light and electron microscopy. The numbers of Ag-NOR increased significantly (p<0.001), but significant reductions of girth(p<0.01), wet muscle weight (p<0.001), high glycogen content fiber (p<0.01), and mitochondrial number (p<0.05) were found in denervated control group. In comparison with control group, significant increase of right leg girth (p<0.05), wet muscle weight (p<0.001), high glycogen content fiber (p<0.05), numbers of Ag-NOR(p<0.001), number of mitochondria (p<0.01), mitochondrial volume found in electrical stimulated experimental group. The results suggest that the electrical stimulation of the muscle partially prevented the denervated atrophy in the rat gastrocnemius muscles.
In the present study, we have evaluated cytotoxic effects of Taraxaci Herba extract on human skin melanoma cells. The light microscopic study showed morphological changes AG-NOR (argyrophylic nucleolar organizer region) by silver chloride stain, and glycoprotein by PAS reaction of the treated cells. Disruptions in cell organelles were determined by SRB assay.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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