There are marked variations in the activity of lipoprotein lipase (LPL) among adipose depots. The aim of this study was to compare the mechanisms of 24 h of fasting on LPL regulation between epididymal (EPI) adipocytes and mesenteric (MES) adipocytes in rats. 1-Day fasting consistently decreased activities of heparin-releasable LPL, total extractable LPL and cellular LPL markedly in both EPI and MES fat pads. LPL activity in MES fat pads was relatively lower than in the EPI fat pads. Consistent with data on LPL activity, the levels of expression of LPL mRNA in both nutritional states were lower in MES than EPI adipose tissue and isolated adipocytes. The decreased LPL activity after 1 day of fasting in MES adipocytes was explained mainly by a 50% decrease in the relative abundance of LPL mRNA level and a parallel 50% decrease in relative rate of LPL synthesis. In contrast, fasting of 1 day in EPI adipocytes decreased total LPL activity by 47% but did not affect LPL mRNA level or relative rate of LPL synthesis. A decrease in overall protein synthesis contributed to the decreased LPL activity after 1 day fasting both in EPI and MES adipocytes. In MES adipocytes the decrease in LPL activity, LPL mRNA and LPL synthesis were comparable, but in EPI adipocytes the changes in LPL activity were substantially larger than the changes in LPL mRNA level and LPL synthesis. Therefore, fasting decreased fat cell size, LPL activity, LPL mRNA level and relative rate of LPL synthesis in rats, and these effects were more marked in the MES adipocytes. These results clearly demonstrate the regional variations in the metabolic response of adipose tissue and LPL functions to fasting.
Purpose: The most effective methods of harvesting, preparing, and injecting autologous fat grafts have been inconsistent and conflicting. With its limitation as resorption in fat grafting, handling various techniques affect adipocyte survival, and is crucial to optimizing its long-term survival. To improve graft survival, re-implantation of cryopreserved adipocytes was developed. In addition, adipocytes do not induce immune rejection in response to non-self lymphocytes in a mixed lymphocyte reaction. The purpose of this study is to analyze the changes in cryopreserved adipocytes so as to determine the most efficient long-term storage period, and to analyze the changes in cryopreserved allografted adipocytes so as to determine the efficacy of cryopreserved adipocytes allografting. Methods: Fat tissues were harvested from the inguinal and retroperitoneal fat pad of mice. After the centrifugation of the harvested fat tissues, they were disintegrated with collagenase. The adipocytes were obtained by centrifugation of the disintegrated fat tissues. The adipocytes were treated as follows: (1) They were examined for weight and then frozen at $-20^{\circ}C$(n=25). For four months, each five frozen samples were taken and examined for weight and histologic changes in the 1st week, the 1st month, the 2nd month, the 3rd month, and the 4th month, respectively. (2) The adipocytes were immediately frozen at $-20^{\circ}C$(n=125). For four months, five frozen samples were taken, and allografted in the same time period as above. Finally, for four months, five cryopreserved allografted adipocytes were taken and examined for histologic changes in the same time period as above. Results: (1) Significant weight changes and histologic findings with inflammatory and destructive changes were observed in the cryopreserved adipocytes in three months. (2) Significant fat necrotic changes in the histologic changes with Hematoxylin and eosin stain were observed in the cryopreserved allografted adipocytes since the first week, independent of the freezing period. Conclusion: The study results show that the adipocytes that were cryopreserved for more than three months underwent obvious weight reductions and necrotic changes, and the adipocytes that were allografted without freezing were viable for four months, but the cryopreserved allografted adipocytes had obvious necrotic changes since the first week regardless of the freezing period.
Up until today, the key to contouring has been resumed in these two alternatives, either limiting the adipocyte storing capacity by modulating lipogenesis, or by stimulating lipolysis to eliminate adipocyte lipid content. Another interesting way could be the regulation of adipocyte differentiation. In this work, we have evaluated the effect of a brown algal extract of Sphacelaria scoparia (SSE) on the differentiation of pre-adipocytes into adipocytes. A pre-adipocyte line (3T3-L 1) was used. The differentiation was evaluated by the measure of produced lipids thanks to red oil coloration and spectrophotometry, and also by the expression of adipocyte differentiation markers: enzymes such as fatty acid synthase (FAS) and stearoyl CoA desaturase (SCD), or membrane proteins such as glucose transporters (GLUT -4) and fatty acid transporters (FAT) expressed on the surface of human adipocytes. These genes are under control of two transcription factors: CAAT-enhancer binding protein (c/EBP alpha) and sterol response element binding protein (SREBP1). All these markers were analysed at different stages of differentiation by RT -PCR. Sphacelaria extract (SSE) inhibits pre-adipocytes differentiating into adipocytes following a dose-dependant relation, using a kinetics similar to retinoic acid. It decreases the expression of mRNA specific to FAS, FAT, GLUT -4, SCD1, c/EBP alpha and SREBP1. Moreover, SSE regulated on collagen 1 and collagen 4 expression. A stimulation of collagen 1 was also measured in human skin fibroblasts. Thus, SSE performs as a genuine differentiation inhibitor and not only as a lipogenesis inhibitor, and could be used in slimming products.
Thyroid hormone(T3) stimulates hepatic lipogenesis by increasing expression of genes, indluding acetyl-CoA carboxylase and fatty acid synthase. S14 protein, which is thougth to be involved in lipid metabolism , appears to respond in parallel . Effect of T3 on lipogenesis in white and brown adipose tissue are less clear, and may be complicated by indirect effects of the hormone. We developed an adipocytes system where the indirect effects of thyroid hormone are abolished and direct effects of T3 on lipogenesis could be tested. Fat accumulation was mesured by Oil-Red O staining. Insulin clearly enhanced fat accumulation by 2-fold . Isobutylemethylxanthie(IBMX) apeared to inhibit insulin -stimulated fat accumulation. Dexamethasone increased insulin-stimulatedfat accumulation about 1.3-fold. confluent adipocytes were cultured in serum-free medium or medium containing 10% fetal calf serum or 10% fetal calf serum stripped of thyroid hormone and lipogenesis, assessed by the incorporation of 3H2O , was measured. Medium without serum or supplemented with T3-depleted serum did not amplify the stimulatory effect of T3 on lipogenesis compared to medium containing 10% fetal calf seru. Dexamethasone alone led to a decrease inlopogenesis of about 50 % in white adipocytes and 25% in brown adipocytes. However, dexamethasone amplified the lipogenic respnse to T3 by about 30% in whit eadipocytes and 60% in brown adipocytes. T3(1$\mu$M) stimulated lipogenesis and acetyl-CoA carboxylase and fatty acid syntase mRNA levels up to 2 -fold in both types of adipocytes. It seems that these adipocytes systems are as useful model to study the effects of hormones on lipogenic gene expression as well as lipogenesis.
Rosa Mistica C. Ignacio;Carla R. Gibbs;Eun-Sook Lee;Deok-Soo Son
IMMUNE NETWORK
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제16권3호
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pp.189-194
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2016
Obesity is characterized as an accumulation of adipose tissue mass represented by chronic, low-grade inflammation. Obesity-derived inflammation involves chemokines as important regulators contributing to the pathophysiology of obesity-related diseases such as cardiovascular disease, diabetes and some cancers. The obesity-driven chemokine network is poorly understood. Here, we identified the profiles of chemokine signature between human preadipocytes and adipocytes, using PCR arrays and qRT-PCR. Both preadipocytes and adipocytes showed absent or low levels in chemokine receptors in spite of some changes. On the other hand, the chemokine levels of CCL2, CCL7-8, CCL11, CXCL1-3, CXCL6 and CXCL10-11 were dominantly expressed in preadipocytes compared to adipocytes. Interestingly, CXCL14 was the most dominant chemokine expressed in adipocytes compared to preadipocytes. Moreover, there is significantly higher protein level of CXCL14 in conditioned media from adipocytes. In addition, we analyzed the data of the chemokine signatures in adipocytes obtained from healthy lean and obese postmenopausal women based on Gene Expression Omnibus (GEO) dataset. Adipocytes from obese individuals had significantly higher levels in chemokine signature as follows: CCL2, CCL13, CCL18-19, CCL23, CCL26, CXCL1, CXCL3 and CXCL14, as compared to those from lean ones. Also, among the chemokine networks, CXCL14 appeared to be the highest levels in adipocytes from both lean and obese women. Taken together, these results identify CXCL14 as an important chemokine induced during adipogenesis, requiring further research elucidating its potential therapeutic benefits in obesity.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Carnosic acid (CA), found in rosemary (Rosemarinus officinalis) leaves, is known to exhibit anti-obesity and anti-inflammatory activities. However, whether its anti-inflammatory potency can contribute to the amelioration of obesity has not been elucidated. The aim of the current study was to investigate the effect of CA on Toll-like receptor 4 (TLR4) pathways in the presence of lipopolysaccharide (LPS) in 3T3-L1 adipocytes. MATERIALS/METHODS: 3T3-L1 adipocytes were treated with CA ($0-20{\mu}M$) for 1 h, followed by treatment with LPS for 30 min; mRNA expression of adipokines and protein expression of TLR4-related molecules were then measured. RESULTS: LPS-stimulated 3T3-L1 adipocytes showed elevated mRNA expression of tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin-6, and monocyte chemoattractant protein-1, and CA significantly inhibited the expression of these adipokine genes. LPS-induced up regulation of TLR4, myeloid differentiation factor 88, TNF receptor-associated factor 6, and nuclear factor-${\kappa}B$, as well as phosphorylated extracellular receptor-activated kinase were also suppressed by pre-treatment of 3T3-L1 adipocytes with CA. CONCLUSIONS: Results of this study suggest that CA directly inhibits TLR4-MyD88-dependent signaling pathways and decreases the inflammatory response in adipocytes.
전통적인 한방약물로 이용되는 인삼(사포닌 Re)과 의이인 추출물을 분화단계별 지방세포에 $100\;{\mu}g/ml$ 씩 12일간 이틀에 한번씩 각각의 물질을 처리하였다. 비만지표 유전자로 알려져 있는 여러 유전자의 발현양을 mRNA와 단백질 수준에서 조사하였다. 완전성숙 지방세포에서 약물의 처리에 따라 $TNF-{\alpha}$ 발현이 비처리 세포에 비해 현저히 억제되었고, lipoprotein lipase는 mRNA와 단백질수준에서 그 발현 양이 증가하였다. 약물처리 세포에서 leptin과 resistin의 유전자 발현은 비처리세포에 비해 유의적인 감소되었다. 이러한 결과는 인삼 사포닌 뿐 아니라 의이인 추출액에서도 유사한 영향이 관찰되어 특히, 곡물인 의이인 추출액이 인삼 사포닌과 거의 비슷한 항비만 활성을 나타내어 장복으로 인한 세포독성을 최소화하면서 지방세포에 긍정적 영향을 미칠 뿐 아니라 인슐린 저항성 개선 효과도 기대되어진다. 향후 대사성 질환과 밀접한 관련이 있는 비만 관리 향상에 이용 할 수 있을 것으로 사료되어진다. 따라서 이 결과들을 바탕으로 동물실험을 통한 더 자세한 조절기능의 확인과 특히, 의이인 추출액에서의 생리활성물질에 대해서도 많은 체계적인 분석과 관련연구가 필요 할 것으로 사료된다.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Adipogenesis is part of the cell differentiation process in which undifferentiated fibroblasts (pre-adipocytes) become mature adipocytes with the accumulation of lipid droplets and subsequent cell morphological changes. Several transcription factors and food components have been suggested to be involved in adipogenesis. The aim of this study was to determine whether mulberry leaf ethanol extract (MLEE) affects adipogenesis in 3T3-L1 adipocytes. MATERIALS/METHODS: The 3T3-L1 adipocytes were treated with different doses of MLEE for 8 days starting 2 days post-confluence. Cell viability, fat accumulation, and adipogenesis-related factors including CCAAT-enhancer-binding protein alpha ($C/EBP{\alpha}$), peroxisome proliferator-activated receptor gamma ($PPAR{\gamma}$), $PPAR{\gamma}$ coactivator 1 alpha (PGC-$1{\alpha}$), fatty acid synthase (FAS), and adiponectin were analyzed. RESULTS: Results showed that MLEE treatments at 10, 25, 50, and $100{\mu}g/ml$ had no effect on cell morphology and viability. Without evident toxicity, all MLEE treated cells had lower fat accumulation compared with control as shown by lower absorbances of Oil Red O stain. MLEE at 50 and $100{\mu}g/ml$ significantly reduced protein levels of $PPAR{\gamma}$, PGC-$1{\alpha}$, FAS, and adiponectin in differentiated adipocytes. Furthermore, protein level of $C/EBP{\alpha}$ was significantly decreased by the treatment of $100{\mu}g/ml$ MLEE. CONCLUSION: These results demonstrate that MLEE treatment has an anti-adipogenic effect in differentiated adipocytes without toxicity, suggesting its potential as an anti-obesity therapeutic.
Objectives: This experimental study was designed to investig:ue the effects of Oryungsan-gagampang on leptin and leptin receptor levels and differentiation of 3T3-L1 adipocyte. Methods: After 3T3-L1 adipocytes were incubated with various concentrations of Oryungsan-gagampang and Reductil(r) for 7 days, leptin and leptin receptor levels in 3T3-Ll adipocytes were measured by ELISA. To elucidate the mechanism of inhibitory effects of Oryungsan-gagampang on obesity, the 3T3-L1 adipocytes after oil red 0 staining were taken by digital photo system. Results: 1. Oryungsan-gagampang $1,000{\mu}g/ml$ significantly increased leptin levels in 3T3-L1 adipocytes in comparison with the control group (p<0.05), and Oryungsan-gagampang 0.1 10, $1,000{\mu}g/ml$ significantly increased leptin receptor levels in 3T3-L1 adipocytes in comparison with the control group (p<0.05). 2. Oryungsan-gagampang inhibited of differentiation of 3T3-L1 adipocytes. Conclusions: Oryungsan-gagampang showed significant effects on inhibiting differentiation of 3T3-Ll adipocytes, and increasing leptin levels and leptin receptor levels in 3T3-L1 adipocytes. Therefore, Oryungsan-gagampang could be used to treat obesity, but further studies are required.
High-pungency red pepper and capsaicin modulate circulating hormone levels and induce lipolysis in adipose tissue in vivo. This study was designed to investigate the lipolytic activity of adipocytes by high-pungency red pepper extract in vitro. High-pungency red pepper (var. Chungyang) powder showed 126.1 mg% of capsaicinoid which was 3 x higher than low-pungency red pepper powder (var. Daemyung). To study the effects of high-pungency red pepper extract on lipolytic activity, preadipocytes were separated from the epidermal fat of 14 day-old rats, induced to differentiate into adipocytes and were treated with red pepper extracts. The amount of glycerol released from adipocytes into the culture medium was analysed to measure lipolytic activity. Glycerol release from adipocytes was increased in a dose-dependent manner with high-pungency red pepper extract treatment. However, there was no significant change in the glycerol release when adipocytes were treated with low-pungency red pepper extract. To investigate whether lipolysis by high-pungency red pepper extract is caused by capsaicin, glycerol release was detected after the treatment of adipocytes with capsaicin. Glycerol release was significantly increased by capsaicin. These results suggest that high-pungency red pepper extract might have a direct lipolytic activity in adipocytes that is mediated by capsaicin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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