The document discusses the regeneration of Partisil/Partisphere ion-exchange columns in chromatography. It mentions that column efficiency can diminish with use due to the accumulation of sample and/or mobile phase impurities at the head of the column. This can lead to a change in back pressure, lower column efficiency, and sometimes a change in selectivity. The document outlines a procedure that may restore column performance. The document also provides everyday practices to enhance the lifetime of a column. These include using only high-purity HPLC solvents and buffers, using freshly prepared mobile phases and buffers, filtering mobile phases to remove particulates, using appropriate sample clean-up procedures, using a guard column or pre-column filter, and working within the pressure and flow rate limitations of the column. For the regeneration of Partisil/Partisphere SAX, SCX, WAX, and WCX columns, the document suggests passing 20 column volumes of various mobile phases through the column. These include a buffer wash, distilled water, an acid wash, a chelating wash, a methanol wash, and a buffer for separation. The document emphasizes that not all of these wash steps are required for every column clean-up and that some chromatographers require only a combination of certain steps.
Jatropha curcas L. (Physic nut) is a commercially important non-edible oil seed crop known for its use as an alternate source of biodiesel. In order to investigate the morphogenic potential of immature embryo, explants from four developmental stages were cultured on medium supplemented with combinations of auxins and cytokinins. It was found that the size of embryo is critical for the establishment of callus. Immature embryos (1.1-1.5 cm) obtained from the fruits 6 weeks after pollination showed a good response of morphogenic callus induction (85.7%) and subsequent plant regeneration (70%) with the maximum number of plantlets (4.7/explant) on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with IBA (0.5 $mg\;l^{-1}$) and BA (1.0 $mg\;l^{-1}$). The above medium when supplemented with growth adjuvants such as 100 $mg\;l^{-1}$ casein hydrolysate + 200 $mg\;l^{-1}$ L-glutamine + 8.0 $mg\;l^{-1}$$CuSO_4$ resulted in an even higher frequency of callus induction (100%). Plant regeneration (90%) with the maximum number of plantlets (10/explant) was achieved on MS medium supplemented with 500 $mg\;l^{-1}$ polyvinyl pyrrolidone + 30 $mg\;l^{-1}$ citric acid + 1 $mg\;l^{-1}$ BA + 0.5 $mg\;l^{-1}$ Kn + 0.25 $mg\;l^{-1}$ IBA. It was observed that plantlet regeneration could occur either through organogenesis of morphogenic callus or via multiplication of pre-existing meristem in immature embryos. The age of immature embryos and addition of a combination of growth adjuvants to the culture medium appear to be critical for obtaining high regeneration rates. Well-developed shoots rooted on half-halfstrength MS medium supplemented with 0.5 $mg\;l^{-1}$ IBA and 342 $mg\;l^{-1}$ trehalose. The rooted plants after acclimatization were successfully transferred to the field in different agro-climatic zones in India. This protocol has been successfully evaluated on five elite lines of J. curcas.
The recent trend of research and development on guided tissue regeneration focuses on the biodegradable membranes, which eliminate the need for subsequent surgical removal. They have demonstrated significant and equivalent clinical improvements to the ePTFE membranes. This study evaluate guided tissue regeneration wound healing in surgically induced intrabony periodontal defects following surgical treatment with a synthetic biodegradable membranes, made from a copolymer of glycolide and lactide, in 8 beagle dogs. After full thickeness flap reflection, exposed buccal bone of maxillary and mandibular canine and premolar was removed surgically mesiodistally and occlusoapically at $6mm{\times}6mm$ in size for preparation of periodontal defects. In experimental sites a customized barrier was formed and fitted to cover the defect. Flap was replaced slightly coronal to CEJ and sutured. Plaque control program was initiated and maintained until completion of the study. In 4, 8, 16 and 24 weeks after surgery, the animals were sacrificed and then undecalcified specimens were prepared for histologic evaluation. Histologic examination indicated significant periodontal regeneration characterized by new connective tissue attachment, cementum formation and bone formation. These membranes showed good biocompatibility throughout experiodontal period. The barriers had been completely resorbed with no apparent adverse effect on periodontal wound healing at 24 weeks. These results implicated that present synthetic biodegradable membrane facilitated guided tissue regeneration in periodontal defect.
Pae, Hyung-Chul;Kim, Su-Kyoung;Park, Jin-Young;Song, Young Woo;Cha, Jae-Kook;Paik, Jeong-Won;Choi, Seong-Ho
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.49
no.6
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pp.366-381
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2019
Purpose: The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of conventional sandblasted, large-grit, acid-etched (SLA) surface coated with a pH buffering solution based on surface wettability, blood protein adhesion, osteoblast affinity, and platelet adhesion and activation. Methods: Titanium discs and implants with conventional SLA surface (SA), SLA surface in an aqueous calcium chloride solution (CA), and SLA surface with a pH buffering agent (SOI) were prepared. The wetting velocity was measured by the number of threads wetted by blood over an interval of time. Serum albumin adsorption was tested using the bicinchoninic acid assay and by measuring fluorescence intensity. Osteoblast activity assays (osteoblast adhesion, proliferation, differentiation, mineralization, and migration) were also performed, and platelet adhesion and activation assays were conducted. Results: In both the wetting velocity test and the serum albumin adsorption assay, the SOI surface displayed a significantly higher wetting velocity than the SA surface (P=0.000 and P=0.000, respectively). In the osteoblast adhesion, proliferation, differentiation, and mineralization tests, the mean values for SOI were all higher than those for SA and CA. On the osteoblast migration, platelet adhesion, and activation tests, SOI also showed significantly higher values than SA (P=0.040, P=0.000, and P=0.000, respectively). Conclusions: SOI exhibited higher hydrophilicity and affinity for proteins, cells, and platelets than SA. Within the limits of this study, it may be concluded that coating an implant with a pH buffering agent can induce the attachment of platelets, proteins, and cells to the implant surface. Further studies should be conducted to directly compare SOI with other conventional surfaces with regard to its safety and effectiveness in clinical settings.
Protoplasts of P. cornucopiae were reverted to normal hyphal growth and reversion frequency was $0.04{\sim}19%$. The complete medium stabilized with 0.6 M sucrose was most effective for regeneration of protoplasts. When hypertonic mushroom complete medium not containing agar was overlaid, regeneration frequency of protoplasts was the highest rate among the others of topagar. The protoplast reversion frequency and mycelial growth of P. cornucopiae were increased when various amino acids, nucleic acid components and vitamin compound were added to the hypertonic minimal medium. The relation between sources increasing reversion frequency and sources accelerating mycelial growth was similar in amino acids and nucleic acid components but it was different in vitamins. The protoplast reversion frequency showed the highest rate when all sources were added to the regeneration minimal medium. Microscopically, regeneration patterns of protoplasts showed formation of a bud-like structure, direct germination, yeast-like cell chain of the protoplast, and the production of both direct germ tube and yeast-like cell chain from a protoplast.
Kim Do-Hyun;Lee Dong-Gi;Lee Sang-Hoon;Woo Hyun-Sook;Lee Ki-Won;Choi Myung-Suk;Lee Byung-Hyun
Journal of Plant Biotechnology
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v.32
no.3
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pp.187-193
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2005
In an effort to optimize tissue culture conditions for genetic transformation of tall fescue (Festuca arundinacea Schreb.), an efficient plant regeneration system from seed-derived calli was established. MS medium containing 6 mg/L 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) and 0.1 mg/L benzyladenine (BA) were optimal for embryogenic callus formation from mature seed and had a strong effect on successive plant regeneration. The plant regeneration frequency above 50% was observed when embryogenic calli induced in this medium were transferred to N6 medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D and 3 mg/L BA. Among several basic media, MS and N6 medium were optimal for callus induction and plant regeneration, respectively. 'Kentucky-31' showed to have high frequencies of embryogenic callus induction and plant regeneration up to 58.3 and 50%, respectively. Addition of sucrose to the regeneration medium as a carbon source increased regeneration frequency up to 55%. A short tissue culture period and high-frequency regeneration system established in this study will be useful for molecular breeding of tall fescue through genetic transformation.
The effects of retinoic acid (RA) on the regenerating limbs of Korean newt (Hynobius leechii) larvae have been studied. Intraperitoneal injection of RA at 4 days post-amputation caused the proximalization of regenerate structures in the proximodistal (PD) axis of the limbs amputated through either the distal zeugopodium or the distal stylopodium. The mean level of proximalization (MLP) increased as a dose-dependent manner, and the MLP was also dependent on the level of amputation at a given dose of RA. At the dose of 150 $\mu$ g/g body wt., MLP's in either amputation level reached close to a peak value, and an increasing number of inhibition of regeneration or duplication in the transverse plane occurred at the dose of 200 $\mu$ g/ g body wt. and above. The changes induced by RA treatment suggest that positional values in the cells of the regenerating limbs have been modified in the three cardinal axes including PD and transverse axes in a graded mode. Furthermore, from the comparison of data in two different amputation levels, it can be speculated that the sensitivity of cells to RA effect along the PD axis might not be linear.
The ultimate objective of periodontal treatment is to stop disease progression and to regenerate destroyed periodontal tissues and thereby regain normal function. Growth factors are naturally found polypetides which stimulate many cellular activities pertaining to wound healing by acting as signal molecule in controlling cell movement, proliferation, and matrix production. Platelet derived growth factor (PDGF) is 28,000-35,000 Da molecular weight dimeric protein with 2 long positively charged polypeptide chains connected by sulfide bonds. The purpose of this study is to evaluate histologically the initial guided tissue regeneration in a periodontal defect f a beagle dog treated with a biodegradable membrane formed with polylactic acid (poly-L-lactic acid) and polyglycolic acid loaded with 200ng/$cm^2$ platelet derived growth factor. 2 beagle dogs were used in he experiment. $5mm{\times}6mm$ alveolar bone defect was formed in upper and lower canines and third premolars and a reference notch was placed. PDGF-BB non-containing membrane was used as control. Each defect was randomly assigned to the test roup or the control group. The dogs were sacrificed 3 weeks after membrane placement. Toluidine blue and multiple staining was done for histological analysis. In the 3 week specimen in the control group, no new one formation could be seen. Small amount f bone resorption below the notch could be seen. In the notch, loose connective tissue with infiltration of inflammatory cells could be seen. Also thin discontinuous new cementum could be seen and the membrane still retained its structure. Where PDGF-BB containing membrane was used, new bone formation could be seen in the notch at weeks and also continuous thin cementum could be seen. PDL cells were observed between new bone and new cementum and some were attached to bone and cementum. These results suggest that new bone and cementum formation seen when PDGF-BB loaded membrane was used was due to inhibition of downgrowth of epithelial cells and also due to continuous release of the growth factor. Further study on the resorption characteristics of the membrane nd the release characteristics of the PDGF-BB is necessary. Also, development of a membrane easier to use clinically is necessary.
Jo, You-Young;Kweon, HaeYong;Lee, Kwang-Gill;Lee, Heui-Sam;Chon, Jeong-Woo
Journal of Sericultural and Entomological Science
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v.50
no.1
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pp.15-19
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2012
A number of researcher have studied biomaterials for cartilage regeneration and are now proceeding. Silk protein was attempted for use as biomedical materials by many researchers because it is natural polymer with biocompatibility and excellent mechanical strength. In this study, we want to know a possibility of silk protein on the cartilage regeneration. We isolated chondrocytes from nasal cartilage and confirmed optimal culture condition of the cells. To observe the effects of silk fibroin on chondrogenesis, we added silk fibroin solutions to the culture medium of chondrocyte and detected gene expression levels related chondrogenesis such as col2, col10. The chondrocytes showed optimal growth when they were cultured in DMEM medium supplemented with 10% FBS 100 ${\cdot}{\ddot{I}}$M ascorbic acid. The levels of col2 gene expression were increased in non-autoclaved silk fibroin, but decreased in autoclaved one. Also the gene expression levels of col10 were increased in silk fibroin, particulary at 3D culture. Based on the results of this study, we had seen the possibility of silk fibroin for cartilage regeneration. In future studies, we should know more clearly the relationship between cartilage regeneration and the silk protein.
The optimum regeneration conditions for the regeneration of three way spent catalysts (TWCs), which were taken from automobiles with different driving conditions, were investigated to evaluate the suitability as alternative catalysts for removing VOCs. The spent catalysts were washed with five different acids ($HNO_3$, $H_2SO_4$, $C_2H_2O_4$, $C_6H_8O_7$, and $H_3PO_4$) to remove contaminants and examine the optimum conditions for recovering the catalytic activity. The physicochemical properties of spent and its regenerated TWCs were evaluated by using nitrogen adsorption-desorption isotherms, XRD, and ICP. The relative atomic ratios of contaminants and platinum group metals (PGMs) of the spent TWCs were greatly dependent on the placed positions. The main contaminants formed were lubricant oil additives and metallic components. Also, the regeneration treatment increased the PGMs ratio, BET surface area, and average pore diameter of TWCs. The catalytic activity results indicated that the spent TWCs have the possibility for removing VOCs. Moreover, the employed acid treatments greatly enhanced the catalytic activity of the spent TWCs. Especially, nitric and oxalic acids provided the most improvement in the catalytic behavior. The catalytic activities of the regenerated TWCs were significantly influenced by the containing platinum ratios rather than the removal ratios of contaminants and the changes in the structural properties offered by the acid treatments.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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