• 제목/요약/키워드: Acid phosphatase activity

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Cephalosporin C의 생변환을 위한 Trigonopsis variabilis의 D-amino Acid Oxidase 유전자의 클로닝 및 발현 (Cloning and Expression of D-amino Acid Oxidise from Trigonopsis variabilis for Cephalosporin C Biotransformation)

  • 이진형;정태완
    • KSBB Journal
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    • 제10권3호
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    • pp.264-270
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    • 1995
  • Trigonopsis variabilis는 버l타락탐 항생제인 cephalosporin C (ceph C)를 ${\alpha}$-keto-adipyl-7 a aminocephalosporanic acid(AKA-7 ACA)로 생변 환하는 강력한 D-amino acid oxidase 효소를 갖고 있다. 본 연구는 이 D-AAO 효소의 유전자를 추출하기 위하여 polymerase chain reaction (PCR)을 사용하였다. PCR 단편을 콜로닝하기 위하여 Taq D DNA polymerase, Klenow, T4 DNA polymerase I, Alkaline phosphatase Calf Intestinal와 T4 kinase 의 효소반응을 이용하여 4가지의 방법을 샤용한 결 과, blunt - end 의 PCR fragment 를 phosphory­l lation하고 blunt -end의 pUC18 plasmid를 dephos phorylation 한 후 ligation 한 것 이 가장 좋은 클로 닝 효율을 보였다. Ceph C에 대한 D-AAO 효소의 활성은 재조합 E. coli의 세포추출액과 permea bilized cells에서 모두 확인할 수 있었다.

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아보카도 과육, 과피 및 씨 추출물이 조골세포 분화 및 파골세포 형성에 미치는 영향 (Effects of Extracts from Sarcocarp, Peels, and Seeds of Avocado on Osteoblast Differentiation and Osteoclast Formation)

  • 김미진;임남경;유미희;김현정;이인선
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제40권7호
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    • pp.919-927
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    • 2011
  • 본 연구에서는 아보카도가 골 형성에 미치는 영향을 검토하고자 아보카도 과육, 과피 및 씨로 나누어 각각 메탄올 추출물을 제조하여 osteoblastic MC3T3-E1 cells을 이용한 골 형성능과 마우스 골수 세포로부터 유래된 파골세포를 이용한 골 흡수능을 측정하였다. 아보카도 과육 추출물을 제외한 과피 및 씨 추출물은 조골세포의 증식 및 ALP 활성을 증가시켰으며, 파골세포에 대해서는 아보카도 과육 및 과피추출물에서 세포독성 없이 TRAP 활성을 억제하는 것을 확인하였다. 또한 아보카도 과피의 핵산 분획은 조골세포의 증식 및 ALP 활성을 크게 증가시켰으며, 아보카도 과피 에틸아세테이트 분획은 파골세포의 분화지표인 TRAP 활성을 크게 억제하였다. 따라서 아보카도 과피는 조골세포의 증식과 파골세포의 억제에 관여할 수 있는 우수한 소재로 향후 골다공증의 치료제로서의 개발 가능성을 가진 천연물 소재로 생각된다.

원유에서 분리한 Lactobacillus fermentum 450의 생리적 특성과 면역활성 (Physiological Characteristics and Immunomodulation Activity of Lactobacillus fermentum 450 isolated from Raw Milk)

  • 한누리;박선영;임상동
    • Journal of Dairy Science and Biotechnology
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    • 제33권2호
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    • pp.93-102
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    • 2015
  • 본 연구는 원유로부터 면역증진 젖산균을 분리 및 동정하고, 이 균주의 생리적 특성을 규명하여 상업적으로의 이용가능성을 검토하고자 실시하였다. 이를 위해 Modified MRS 분별배지를 사용하여 노란색 집락을 형성하는 균주를 대상으로 면역활성이 높은 균주를 선발한 결과, D205 균주가 최종 선발되었다. D205 균주는 $IL-1{\alpha}$, $TNF-{\alpha}$, NO 값이 각각 2,500pg 이상/mL, 2,000 pg 이상/mL, $11.55{\pm}2.95{\mu}M$로 나타났으며, 동정결과 Lactobacillus fermentum으로 판명되었고, Lactobacillus fermentum 450으로 명명하였다. Lactobacillus fermentum 450의 최적 생장 온도는 $40^{\circ}C$이었으며, 답즙산과 산성의 pH에서 모두 우수한 생존력을나타내었다. 효소활성은 leucine arylamidase와 acid phosphatase가 비교적 높게 나타났다. 항생제 내성 실험 결과, kanamycin, neomycin, polymyxin B에 내성이 있는 반면 novobiocin에 감수성을 나타냈으며, Salmonella Typhimurium에 대해 63.86%의 억제 효과를 지니고 있으나, Escherichia coli와 Staphylococcus aureus에 대해서는 항균력이 거의 없는 것으로 나타났다.

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유기물 연용이 감자재배 비화산회토양의 화학성과 효소활성에 미치는 영향 (Effect of Consecutive Application of Organic Matter on Soil Chemical Properties and Enzyme Activity in Potato Cultivation Soil)

  • 좌재호;문경환;서형호;최경산;김성철
    • 한국토양비료학회지
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    • 제44권5호
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    • pp.801-807
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    • 2011
  • 유기물 연용이 감자재배 토양의 토양화학성과 효소활성에 미치는 영향을 평가하고자 비화산 암갈색 토양에서 1년 2기작으로 3 작기 동안 감자재배를 하였다. 유기물은 작기당 유기질비료와 음식물퇴비는 $2,000kg\;10a^{-1}$, 돈분퇴비는 2,000, 4,000, and $6,000kg\;10a^{-1}$을 기준으로 시용하였다. 토양 pH는 3 작기 후 모든 처리구에서 높았다. PMC 시용량이 많을수록 토양 pH, 토양질소, 유효인산, 치환성 양이온 (칼륨, 칼슘 및 마그네슘), Zn, Cu 함량이 증가하였다. 토양 탈수소효소활성은 PMC 시용량이 많고 작기가 증가할수록 대조구 보다 3작기 후는 PMC 4톤구가 2배 이상 높았으며, PMC>FWC>NPK+PMC>MOF 순으로 증가하였다. 토양인산효소활성은 PMC 6톤구에서 가장 높았다. 3작기 동안 유기물 처리구의 Zn함량이 증가함에 따라 탈수소효소 활성이 직선적으로 증가하였으며 MOF구 $R^2$=0.427, FWC 구 $R^2$=0.427, PMC구 $R^2$=0.411 (p<0.01)의 상관관계를 나타냈다.

손상된 말초신경의 재생에 미치는 전자침의 효과 (Effect of Electroacupuncture on the Regeneration of Injured Peripheral Nerve)

  • 등영건;김동희;캉송젠
    • Applied Microscopy
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    • 제32권1호
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    • pp.1-8
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    • 2002
  • 손상된 말초신경이 정상상태로 회복되는데 침이 어떤 영향을 미치는지 확인하기 위하여 좌골신경을 인위적으로 손상시킨 후 침을 처리한 군 (AG)과 자연적으로 치유된 군 (CG)의 좌골신경내의 유발전위 증가율, 척수내 효소활성도의 변화 및 좌골신경의 미세구조를 비교.관찰하였다. 유발전위 증가율은 CG에서보다 AG에서 높았고, acid phosphatase 활성도는 1CG와 2AG에서 높게 나타났으나 시간이 경과함에 따라 정상상태로 회복되는 경향을 보였다. 손상된 좌골신경의 미세구조적 변화는 CG보다 AG에서 높은 회복율을 나타내었으며 단지 AG에서만 좌골신경 주위에 지방조직이 발달되어있는 것이 관찰되었다. 이상과 같이 손상된 말초신경이 정상상태로 회복되는 속도는 전자침을 처리한 군에서 높았으며, 특히 다른 치료기간보다 초기시기에서 침의 효과가 매우 높다는 것이 확인되었다.

Effects of Amino Acids, Carbohydrates and Phosphorus Sources on Growth and Alkaline Phosphatase Activity of the Marine Cyanobacterium Anabaena sp. Strain CA

  • Singh, Jeet Bahadur;Vyas, Deepak;Kumar, Har Darshan
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제7권2호
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    • pp.127-131
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    • 1997
  • Alkaline phosphatase (APase) was found to be inducible in Anabaena sp. strain CA Growth was less than control in presence of most amino acids except glycine and serine, but most amino acids enhanced APase activity. Highest APase activity was recorded in tyrosine supplemented culture followed by hydroxyproline, cystein, valine and glutamic acid. Threonine supplemented material showed lowest APase level (1.8 nmol/mg protein/min). Lactose, glucose, sodium pyruvate and succinate stimulated growth but not APase activity. APase activity was high in the presence of sucrose, mellibiose, mannitol, arabinose, maltose and sorbose, even though the growth in these supplements was less than in control. Organic phosphate sources supported good growth of the organism. Best growth occurred in presence of inorganic phosphate, adenosine diphosphate, fructose 1,6-diphosphate or ribulose 1,5-diphosphate, followed by other phosphorus sources tested. APase activity in presence of any of the organic phosphate sources was 3 to 5 fold low as compared to phosphate limited culture. Also, there was no APase activity in cultures grown on inorganic phosphate. These data indicate that most amino acids and a few carbohydrates (sucrose, mellibiose, arabinose and sorbose) are suitable for APase production. Lactose, glucose, pyruvate or succinate may be used as a carbon source during photoheterotrophic growth of the cyanobacterium. Glycine and serine are preferred nitrogen sources for its growth. Phosphate repressible APase activity has been found in Anabaena sp. strain CA.

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Cloning, Expression, and Characterization of a Hyperalkaline Phosphatase from the Thermophilic Bacterium Thermus sp. T351

  • Choi Jeong-Jin;Park Jong-Woo;Shim Hye-Kyung;Lee Suk-Chan;Kwon Moo-Sik;Yang Joo-Sung;Hwang Heon;Kwon Suk-Tae
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제16권2호
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    • pp.272-279
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    • 2006
  • The gene encoding Thermus sp. T351 alkaline phosphatase (T351 APase) was cloned and sequenced. The gene consisted of 1,503 bp coding for a protein with 500 amino acid residues including a signal peptide. The deduced amino acid sequence of T351 APase showed relatively low similarity to other Thermus APases. The T351 APase gene was expressed under the control of the T7lac promoter on the expression vector pET-22b(+) in Escherichia coli BL21 (DE3). The expressed enzyme was purified by heat treatment, and $UNO^{TM}$ Q and $HiTrap^{TM}$ Heparin HP column chromatographies. The purified enzyme exhibited high activity at extremely alkaline pHs, reaching a maximum at pH 12.0. The optimum temperature of the enzyme was $80^{\circ}C$, and the half-life at $85^{\circ}C$ was approximately 103 min. The enzyme activity was found to be dependent on metal ions: the addition of $Mg^{2+}$ and $CO^{2+}$ increased the activity, whereas EDTA inhibited it. With p-nitrophenyl phosphate as the substrate, T351 APase had a Michaelis constant ($K_{m}$) of $3.9{\times}10^{-5}M$. The enzyme catalyzed the hydrolysis of a wide variety of phosphorylated compounds.

Long-term effects of ZnO nanoparticles on exoenzyme activities in planted soils

  • Kwak, Jin Il;Yoon, Sung-Ji;An, Youn-Joo
    • Environmental Engineering Research
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    • 제22권2호
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    • pp.224-229
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    • 2017
  • Zinc oxide nanoparticles (ZnO NPs) have been used as additives in a variety of consumer products. While these particles may enter the environment, only a limited number of studies have investigated the effects of ZnO NPs on soil exoenzymes. Here, we investigate the long-term effects of ZnO NPs at concentrations of 50 and 500 mg/kg on the activities of six soil exoenzymes in planted soils: Dehydrogenase, fluorescein diacetate (FDA) hydrolase, urease, acid phosphatase, arylsulfatase, and ${\beta}-glucosidase$. Significant effects were observed at one or more time points for all enzymes except for FDA hydrolase. These effects included both decreases and increases in enzyme activity. Our results suggest that ZnO NP treatments of 50 and 500 mg/kg can adversely affect soil enzymes, particularly acid phosphatase and urease, and thus, these data may have implications for phosphorous and nitrogen cycles in the soil.

Bacillus thuringiensis의 주입에 따른 담배나방의 혈림프 단백질, 가수분해효소 및 무기이온의 변화 (Changes in Haemolymph Proteins, Hydrolases, and Inorganic tons of Heliothis assulta Injected with Bacillus thuringiensis)

  • 유종명;조시형;황석연;이형철
    • 한국연초학회지
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    • 제16권1호
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    • pp.90-96
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    • 1994
  • Changes in haemolymph proteins, hydrolases such as esterase(EST), acid phosphatase(ACP) and alkaline phosphatase(ALP) , and inorganic ion(Na+, K+ and Cl- ) contents were induced by the injection of Bacillus thuringiengis into haemocoel of the last instar larva of Heliothis assulta. Protein concentration of haemolymph was increased until 24 hrs after injection, and decreased thereafter. Among the 8 basic protein bands identified through acid - polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE), 2 bands(bands a and b) became stronger by the bacterial infection. Activities of EST and ALP increased until 12 hrs after injection and then fell down, whereas ACP activity was decreased continuously with time after injection. Contents of inorganic ions were all increased by the bacterial injection, showing slow rate of increase in the chloride ion, but rapid in the sodium and potassium ions.

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