Glycated hemoglobin ($HbA_{1c}$) has been commonly used to screen and diagnose for patients with diabetes mellitus. Here the accelerated procedure of microwave-assisted sample treatment from acid hydrolysis to enzyme digestion followed by isotope dilution liquid chromatography-tandem mass spectrometry (ID-LC-MS/MS) was optimized and applied to measure $HbA_{1c}$ in an effort to speed up analysis time. First, two signature peptides of $HbA_{1c}$ and hemoglobin $A_0$ were certified with amino acid analysis by setting optimized acid hydrolysis conditions to $150^{\circ}C$, 1.5 h and $10{\mu}M$ sample concentration in 8 M hydrochloric acid. Consequently, the accurate certified peptides above were used as calibration standards to implement the proteolytic procedure with endoproteinase Glu-C at $37^{\circ}C$, 700 W for 6 h. Compared to the traditional method, the microwave heating not only shortened dramatically sample preparation time, but also afforded comparable recovery yields. The optimized protocol and analytical conditions in this study are suitable for a primary reference method of $HbA_{1c}$ quantification with full SI-traceability and other similar proteins in complex biological samples.
본 연구는 담수 퇴적물 중 유기물의 척도가 되는 화학적산소요구량, 염양염류인 총질소와 총인 및 금속류인 철과 망간에 대해 국내 외 분석법을 적용하여 분석을 실시함으로서 각 분석법간의 상관성을 파악하고 그 적용성을 알아보고자 하였다. 화학적산소요구량은 국내 해양환경공정시험방법과 일본의 위생시험법을 적용하였는데 두 방법 모두 측정범위가 넓고, 생물학적산소요구량이나 유기물질과 상관관계가 좋은 과망간산칼륨법을 이용하고 있기 때문에 분석법간 편차가 크지 않음을 확인하였다. 총질소와 총인의 경우 국내 식품공전에 의한 시험법과 일본의 위생시험법을 적용하여 분석을 실시하였다. 총질소는 두 방법 모두 중화 적정법이지만 시료 분해 및 증류 과정의 차이에 의해 일본의 위생시험법에 의한 분석 값이 약간 낮은 경향을 보였다. 총인의 경우 두 방법 모두 질산과 과염소산에 의한 분해 후 값을 측정하는 방법으로 비슷한 결과를 보였다. 철과 망간과 같은 금속류의 실험은 크게 용출방법과 산분해법을 실시하였다. 용출법에서 얻은 결과값은 산분해한 값에 비하여 적은 값을 나타내었는데 그 이유는 용출조건보다 산분해 조건에서 금속류가 더 잘 녹아나오기 때문이다.
In vitro true digestibility of cup-plant (Silphium perfoliatum L.) is higher than other alternative forages and comparative to alfalfa (Medicago sativa L.) even at the high neutral detergent fiber (NDF) concentration. This study was conducted to determine whether the digestion kinetic parameters of cup-plant could explain high in vitro true digestibility of cup-plant at the several NDF levels. Cup-plant and alfalfa were both collected in Arlington and Lancaster, Wisconsin to meet the NDF content within 40 to 50% range. The collected samples were incubated with rumen juice to investigate the digestion kinetics at 3, 6, 9, 14, 20, 28, 36, 48, and 72 h. Kinetics was estimated by the model $R=D_0\;e-k(t-L)+U$ where R is residue remaining at time t, and $D_0$ is digestible fraction, k is digestion rate constant, L is discrete lag time, and U is indigestible fraction. Parameters of the model were estimated by the direct nonlinear least squares (DNLS) method. Digestion rate and potential extent of digestion were not statistically different in either forage. However, alfalfa had shorter lag time (p<0.05). The indigestible fraction increased with maturation in alfalfa and in cup-plant (p<0.05). The ratio of indigestible fraction to acid detergent lignin (ADL) was higher in cup-plant than in alfalfa (p<0.05). From the results, alfalfa is probably digested more rapidly than cup-plant, however, cup-plant maintains higher digestibility with maturation due to a relatively slower increase of indigestible fraction in NDF.
The retrofitting of a thickening unit process is widely considered in municipal wastewater treatment plants in Korea to enhance the anaerobic digestion efficiency. The authors examined the effect of feed concentration (2-34.1 g VS/L) and feed to microorganism (F/M) ratio (0.50-1.35 g VS/g VS) on anaerobic batch digestion of sewage sludge. Methane yield over 90 mL $CH_4/g$$VS_{feed}$ was found at a feed concentration in the range of 12-26 g VS/L and a F/M ratio below 0.6 g VS/g VS. A high F/M ratio decreased methane yield and rate with oragnic acid accumulation. As sudden increase of sewage sludge concentration prior to anaerobic digestion would jeopardize the digester performance due to the rasied F/M ratio, gradual increase of the sludge feed concentration or an additional biomass retention in the digester is recommended.
This study was conducted to investigate the effects of inoculum and carbon sources on anaerobic digestion characteristics. The treatments were combinations of inoculum (digestate of cattle manure and rumen fluid) with carbon sources (starch, cellulose, and xylan). Anaerobic digestion was performed in triplicate at $37^{\circ}C$ for 18 days at 100 rpm. Sampling was performed at 0, 1, 2, 3, 4, 5, 7, 9, 12, 15, and 18 days to measure pH, ammonia-N, volatile solids reduction, the cumulative methane content, and the cumulative methane production. There was a significant difference in methane content depending on the carbon source and there was a significant difference in pH, ammonia-N, methane production, and methane content depending on the inoculum (P < 0.05). The results of methane production were higher in the digestate of cattle manure treatment than in the rumen fluid treatment (P < 0.05). In this study, different digestive patterns depending on the type of carbon source could be used as basic research data to set the hydraulic residence time of anaerobic digestion facilities. In addition, the use of ruminal fluid as an inoculum may help accelerate the hydrolysis and acid production steps.
Purpose: The objective of this study was to investigate the high-efficiency anaerobic digestion of organic wastes with high fat content. Specifically, the analysis focused on biogas production performance with a focus on carbon number and the double bond count of the long-chain fatty acids (LCFAs), which are hydrolysis products of triglycerides. Methods: Experiments were performed under mesophilic anaerobic conditions with a feed-to-microorganism ratio (F/M) of 1.0. Biogas production performance was analyzed through biogas production patterns, lag-phase, and the time required for 90% biogas production (T90). Results: Biogas production increased when the content of unsaturated LCFAs (containing relatively large numbers of carbon atoms) increased. In substrate containing LCFAs with four or more double bonds, although the initial lag-phase in biogas production was shortened, development of a three-step lag-phase resulted in decreased biogas production. These results suggest that high rates of anaerobic digestion are possible when the LCFAs have high unsaturated fatty acid content with three or fewer double bonds. Conclusions: When various types of LCFAs are digested anaerobically, biogas production performance can be improved if the unsaturated fatty acid content and number of double bonds are optimized for maximum production.
양파 열수 추출물의 항산화능 및 인공소화 전과후의 항돌연변이 효과를 BHT와 ascorbic acid와 비교하여 조사하였다. 총 페놀 및 플라보노이드의 함량은 노란색 양파 추출물이 횐색 양파 추출물보다 많았으며, 양파 추출물의 과산화수소 소거능은 농도가 증가함에 따라 비례적으로 증가하였다. $\beta-carotene-linoleate\;system$에서 항산화능과 reducing power는 증가되었으나, BHT와 ascorbic acid보다는 낮았다. 양파열수 추출물의 인공소화 후에 IQ와 MNNG로 처리된 Salmonella typhimurium TA80과 TA100에 대하여 항돌연변이 효과가 나타났으며, 노란색 양파가 횐색 양파보다 높게 나타났다. 결론적으로 양파 추출물을 소화시키면 항산화 및 항돌연변이의 효과는 양파의 페놀과 플라보노이드의 성분 변화에 의한 것으로 판단된다.
The performance of elutriated acid fermentation with slurry-type piggery waste was investigated, especially to evaluate the effects of temperature and pre-treatment. In the first phase, the acid elutriation reactor with piggery waste after centrifugation operated at both mesophilic and thermophilic conditions to evaluate the effect of temperature. Solubilization yield($gVFAs/gSCOD_{prod.}$) and acidification rate($gVFAs/gSCOD_{prod.}$) in the thermophilic digestion were 0.45 and 0.55, which were higher than those of the mesophilic digestion, 0.25 and 0.45. In addition, the acid elutriation reactor at thermophilic temperature is more effective in removing e-coli. In the second phase, the acid elutriation reactor was fed with piggery waste before centrifugation. With piggery wastes before centrifugation, the solubilization yield and the acidificaton rate were 0.40 and 0.80, respectively, which were higher than the rates using piggery waste after centrifugation at both mesophilic and thermophilic conditions. The higher sludge volume reduction of 80% benefits sludge management. Furthermore, economical advantages can be achieved by removing the pre-treatment process, such as centrifugation. Consequently, the treatment with piggery waste before centrifugation proved to be effective. Also, the optimum temperature condition was estimated at mesophilic or thermophilic conditions, considering solubilization yields and acidification rates, though the system should be heated.
The evaluation of uncertainty in environmental elemental analysis can be difficult because of the wide variety of analytical sample and objectives. for the specification of measured, elemetal analysis need certain method and high pretreatment technique. The sample of Pb, Cd in paddy soil and sewage sludge were analyzed by same ICP-AES, but each using four different pretreatment technique ; 0.1N HCl extraction, AB-DTPA extraction and two Mixture Acid Digestion. The four technique gave comparable results for the analysis of lead and cadmium. Concentrations determined by Mixture Acid Digestion were more higher than those by 0.1NHCI extraction and AB-DTPA extraction.
Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) was used to demonstrate cross-linking of peptides induced by transglutaminase. The presence of ε-( Υ-glutamyl)lysine isopeptide cross-link in the acid hydrolysate of the cross-linking reaction mixture was also demonstrated by MALDI-TOF-MS without prior separation. MALDI-TOF-MS quickly provided peptide mass maps after pronase digestion of the cross-linked peptide adduct, which enabled us to monitor the hydrolytic sequence. Pronase appears to preferentially hydrolyze peptide bonds distant from the cross-link before hydrolyzing peptide bonds around the cross-link. The results suggest that pronase digestion followed by MALDI-TOF-MS could be used for determination of amino acid sequence around a modification site.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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