Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.196-196
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2017
Oilseed crop Camelina (Camelina sativa L.) is a suitable for biodiesel production that has high adaptability under low-nutrient condition like marginal land and requires low-input cost for cultivation. Enhanced abiotic stress tolerance of Camelina is very important for oil production under the wide range of different climate. CsRCI2s (Rare Cold Inducible 2) are related proteins in various abiotic stresses that predicted to localized at plasma membrane (PM) and endoplasmic reticulum (ER). These proteins are consist of eight-family that can be divided into tail (CsRCI2D/E/F/G) and no-tail (CsRCI2A/B/E/H) type of C-terminal. However, it is still less understood the function of C-terminal tail. In this study, CsRCI2D/H genes were cloned through gateway cloning system that used pCB302-3 as destination vector. And we used agrobacterium-mediated transformation system for generation of overexpression (OX) transformants. Overexpression of target gene was confirmed using RT-PCR and segregation ratio on selection media. We analyzed physiological response in media and soil under abiotic stresses using CsRCI2D and CsRCI2H overexpression plant. To compare abiotic stresses tolerance, wild type and CsRCI2D/H OX line seeds were sown on agar plate treated with various NaCl and mannitol concentration for 7 days. In the test of growth rate under abiotic stress on media, CsRCI2H OX line showed similar to NaCl and mannitol stress. In the other hand, CsRCI2D OX line showed to be improved stress tolerance that especially increased in 200mM NaCl but was similar on mannitol media. In greenhouse, WT and CsRCI2D/H OX lines for physiological analysis and productivity under abiotic stresses were treated 100, 150, 200mM NaCl. Then it was measured various parameters such as leaf width and length, plant height, total seed weight, flower number, seed number. CsRCI2H OX line in greenhouse did not show any changes in physiological parameters but CsRCI2D OX line was improved both physiological response and productivity under NaCl stress. Among physiological parameters of CsRCI2D OX line under NaCl stress, leaf length and width were observed shorter than WT but it were slightly longer than WT in 200mM NaCl stress. Furthermore, total seed weight of CsRCI2D OX line under stress displayed to decrease than WT in normal condition, but it was gradually raised with increasing NaCl stress then more than WT relatively. These results suggested CsRCI2D might be contribute to improve abiotic stress tolerance. However, function of CsRCI2H is need to more detail study. In conclusion, overexpression of CsRCI2s family can generate various environmental stress tolerance plant and may improve crop productivity for bio-energy production.
This study was carried out to investigate the possibility of isolating the useful gene of soybean plant, anthocyanin, through NGS (Next Generation Sequencing) and molecular biology experiments. Lespedeza cuneata. G. don is a resource plant but has many useful materials. Especially, D-pinitol, which has anti-diabetic function, is contained in a large amount. However, the gene related to the biosynthesis of D-piniol has not been isolated in the non-spermatid. Lespedeza cuneata. G. don was treated with abiotic stress (drought), total RNA was extracted, and a library was constructed to perform NGS. In this way, the genes involved in D-pinitol biosynthesis were isolated and sequenced in silico. In order to support this, ononitol epimerase involved in D-pinitol amplification was identified using the Blast program and RT-PCR confirmed the increased gene expression in vitro, and the gene was isolated and identified by convergence study.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.78.2-79
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2003
Pepper defensin ( CADEFl) clone was isolated from cDNA library constructed from pepper leaves infected with avirulent strain Bv5-4a of Xanthomonu campestris pv. vesicatoria. The deduced amino acid sequence of CADEFl is 82-64% identical to that of other plant defensins. Putative protein encoded by CADEFl gene consists of 78 amino acids and 8 conserved cysteine residues to form four structure-stabilizing disulfide bridges. Transcription of the CADEF1 gene was earlier and stronger induced by X campestris pv. vesicatoria infection in the incompatible than in the compatible interaction. CADEF1 mRNA was constitutively expressed in stem, root and green fruit of pepper. Transcripts of CADEFl gene drastically accumulated in pepper leaf tissues treated With Salicylic acid (SA), methyl jasmonate (MeJA), abscisic acid (ABA), hydrogen Peroxide (H$_2$O$_2$), benzothiadiazole (BTH) and DL-${\beta}$-amino-n-butyric acid (BABA). In situ hybridization results revealed that CADEF1 mRNA was localized in the phloem areas of vascular bundles in leaf tissues treated with exogenous SA, MeJA and ABA. Strong accumulation of CADEF1 mRNA occurred in pepper leaves in response to wounding, high salinity and drought stress. These results suggest that bacterial pathogen infection, abiotic elicitors and some environmental stresses may play a significant role in signal transduction pathway for CADEF1 gene expression.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.78.1-78
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2003
An osmotin-like protein (CAOSMl) gene was isolated from pepper leaves infected with the avirulent strain Bv5-4a of Xmthomonas campestris pv. vesicatoria. The cDNA encodes a polypeptide of 250 amino acids with a molecular mass of 27, 361 Da. Its amino acid sequence is highly homologous to various osmotin-like proteins from other plant species. The CAOSMl gene expression was organ- and tissue-specifically regulated In pepper plants. The CAOSMl mRNA was intensely localized in the endodermis area of root tissue and in the phloem cells of vascular bundles of red fruit tissue, but not in leaf, stem, and green fruit tissues of healthy pepper plants. Infection by X. c. pv vesintoria, Colletotrichum coccodes, or Phytopkhora capsici iinduced CAOSMl transcription in the leaf or stem tissues. Expression of the CAOSMl gene was somewhat higher in the incompatible than the compatible interactions of pathogens with pepper. The CAOSMl mRNA was prevalently localized in the phloem cells of the vascular bundle of leaf tissues infected by C. coccodes. The CAOSMl gene was activated in leaf tissues by treatment with ethylene, methyl jasmonate, high salinity, cold acclimation and mechanical wounding, but not by abscisic acid (ABA) and drought. These results indicate that the pepper CAOSMl protein functions in response to Pathogens and some abiotic stresses in pepper plants
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2018.10a
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pp.100-100
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2018
Zoysia japonica Steud.(Zj) is a typical warm-season Korean lawn grass, which is used in many places such as river banks, roadside and soccer fields in Korea. Recently, it has also been used in school yards and the Saemangeum reclaimed land to reduce water pollution. Although the cultivated area of turfgrass is steadily increasing worldwide, it grows fast requiring frequent mowing and is difficult to grow in shady areas and the cold region. Therefore this study aims searching for useful gene(s) to develop abiotic stress tolerant and dwarf zoysiagrass. We isolated Ycf4 gene based on the sequence from Oryza sativa Japonica through RT-PCR and RACE PCR. Ultimately, open reading frame (ORF) of ZjYcf4 was 558bp long, encoding a protein of 186 amino acid residues. NCBI blast results showed that the ZjYcf4 protein is evolutionarily closely related to Ycf4 protein from Zoysia macrantha and Setaria italica (100% and 98%, respectively). To determine whether ZjYcf4 was involved in environmental stress in wild-type zoysiagrass, expression patterns of the gene were analyzed by real-time PCR under salt, cold and dark conditions. They were analyzed after each stress treatment for 3 hours. In salt and cold stresses, the expression was higher compared to control (3-fold and 1.5-fold, respectively), although there was a 1.6-fold decrease in expression under dark stress treatment. As reported previously, we suggest that ZjYcf4 gene affects abiotic stress such as salt, cold and dark.
Genome wide transcription analysis in response to stresses is essential to provide the basis of effective engineering strategies to improve stress tolerance in crop plants. In order to perform transcriptome analysis in Brassica rapa, we constructed a B. rapa oligo microarray, KBGP-24K, using sequence information from approximately 24,000 unigenes and analyzed cold ($4^{\circ}C$), salt (250 mM NaCl), and drought (air-dry) treated B. rapa plants. Among the B. rapa unigenes represented on the microarray, 417 (1.7%), 202 (0.8%), and 738 (3.1%) were identified as responsive genes that were differently expressed 5-fold or more at least once during a 48-h treatment with cold, salt, and drought, respectively. These results were confirmed by RT-PCR analysis. In the abiotic stress responsive genes identified, we found 56 transcription factor genes and 60 commonly responsive genes. It suggests that various transcriptional regulatory mechanisms and common signaling pathway are working together under the abiotic stresses in B. rapa. In conclusion, our new developed 24K oligo microarray will be a useful tool for transcriptome profiling and this work will provide valuable insight in the response to abiotic stress in B. rapa.
The phytohormone abscisic acid (ABA) plays an important role in the adaptive response of plants to abiotic stresses. ABA also regulates many important processes, including seed dormancy, germination, inhibition of cell division, and stomatal closure. OsABF2 (Oryza sativa ABRE binding factor2) is one of the bZIP type transcription factors, which are involved in abiotic stress response and ABA signaling in rice. Expression of OsABF2 is induced by ABA and various stress treatments. Findings show that survival rates of OsABF2 over-expressing Arabidopsis lines were increased under drought, salt, and heat stress conditions. The germination ratio of OsABF2 over-expressing Arabidopsis lines was decreased in the presence of ABA. Results indicate that OsABF2 over-expressing Arabidopsis lines have enhanced abiotic stress tolerance and have increased ABA sensitivity.
Rho-related GTPase of plants (ROP) plays an important role in plant growth and development as a signaling protein. Plant RopGEFs are recently identified ROP activator proteins in Arabidopsis. In this study, we cloned 14 RopGEFs in Arabidopsis and characterized their expression patterns in response to abiotic stresses. Fourteen RopGEF genes were categorized into three groups based on their amino acid homologies and molecular sizes. Most RopGEFs were expressed predominantly in flower but some RopGEFs displayed a tissue-specific expression pattern. RopGEF1, 4, 5, and 11 were expressed in all tissues including root and leaves whereas RopGEF7, 8, 9, and 13 were expressed only in flowers. The transcript levels of 14 RopGEFs were changed significantly depending upon abiotic stresses such as cold, heat, drought and salts. RopGEF5 transcription was up-regulated by salt and drought treatment but down-regulated by heat. RopGEF14 transcript level was also increased by salt but decreased by heat stress. The transcript levels of RopGEF1, 7, 9, and 12 were enhanced in response to heat stress but showed no changes in response to cold stresses. Drought stress activated Group 3 RopGEFs such as RopGEF5 and 7. Taken together, 14 RopGEFs are responding to the abiotic stresses individually or as a group.
Forages are the backbone of sustainable agriculture. They includes a wide variety of plant species ranging from grasses, such as tall fescue and bermudagrass, to herbaceous legumes, such as alfalfa and white clover. Abiotic stresses, especially salinity, drought, temperature extremes, high photon irradiance, and levels of inorganic solutes, are the limiting factors in the growth and productivity of major cultivated forage crops. Given the great complexity of forage species and the associated difficulties encountered in traditional breeding methods, the potential from molecular breeding in improving forage crops has been recognized. Plant engineering strategies for abiotic stress tolerance largely rely on the gene expression for enzymes involved in pathways leading to the synthesis of functional and structural metabolites, proteins that confer stress tolerance, or proteins in signaling and regulatory pathways. Genetic engineering allows researchers to control timing, tissue-specificity, and expression level for optimal function of the introduced genes. Thus, the use of either a constitutive or stress-inducible promoter may be useful in certain cases. In this review, we summarize the recent progress made towards the development of transgenic forage plants with improved tolerance to abiotic stresses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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