• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제28권2호
• /
• pp.71-78
• /
• 1990

세포내 cAMP의 농도 변화가 Toxoplasma의 성장 및 증식에 미치는 영향을 검토하기 위하여 끽접 cAMP와 cAMP의 analogue를 첨가하거나 간접적으로 세포내 cAMP의 합성이나 분해를 담당한 효소들의 활성을 변화시 킴으로써 CAMP의 농도를 조절하여 그 효과를 측정하였다. HL-60세포를 숙주 세포로 사용하여 동수의 Toxoplasma를 첨가하여 배양하였으며, 처리 효과는 배양 세포계에서 Toxoplnsma에만 특이하게 표지되는 $^3H-uracil$과 Toxoplasma및 HL-60세포에 공통으로 표지되는 $^3H-thymidine$을 각각 매 12시간마다 2시간씩 배양하여 그 표지량을 측정하여 비교 분석하였다. 직접 cAMP와 cAMP의 analogue인 dbcAMP 및 br-cAMP를 첨가하였을 때, 각각 특이한 농도에서, 즉 1 mM, 0.5~5mM 및 0.1mM에서 Toxoplasma의 성장 및 증식을 향상시켰다. 이때, 성장 및 증식을 유도하는 시기 및 그 증가도에서도 차이가 있는 것으로 나타났다. 이 결과들은 세포내 cAMP의 농도를 증가시키도록 cAMP의 합성 및 분해에 관여하는 효소들의 황성을 변화 시켰을 때에도 같은 양상으로 나타났다. cAMP의 합성 효소인 adenylate cyclase의 활성제인 pNHppG, cAMP의 분해 효소인 cAMP phosphodiesterase의 활성제인 A23187과 imidazole 및 억제제인 IBMX, compound 48/80 및 theophylline을 각각 처리하였는데, 세포내 cAMP의 농도가 증가되었을 대에는 Toxoplasmn의 성장 및 증식 을 향상시켰으나, cAMP의 농도를 감소시켰을 때에는 억제하였다. 이 때 배양계에 독성을 일으키는 농도 이하에서 농도 의존성의 경향을 보였으며, 유도 시기 및 그 증가도에는 차이가 있었다. 따라서 세포 내에서 향상된 수준의 cAMP가 어떤 기전을 활성화시키며, 그 결과 세포질에서의 Toxcplasma의 성장 및 증식을 자극하게 된다는 것을 시사하였다.

• 생명과학회지
• /
• 제13권5호
• /
• pp.751-755
• /
• 2003

Cyclic AMP receptor proteins(CRP) activate many genes in Escherichia coli by binding of cAMP with not fully known mechanism. CRP existed as apo-CRP in the absence of cAMP, $CRP;(cAMP)_2$$_2$ at low(micromolar) cAMP concentration, or $CRP;(cAMP)_4$ at high(millimolar) concentration of cAMP. This study is designed to measure the thermal stability of S83G CRP, which substituted glycine for serine at amino acid 83 position, with CD spectrapolarimeter at 222nm by the constant elevation of temperature from $20^{\circ]C\; to\; 90^{\circ}C\; at\; 1^{\circ}C/min$. The non-linear regression analysis showed that melting temperatures were 68.4, 72.0, and $82.3^{\circ}C$ for no cAMP, 0.1mM cAMP, and 5mM cAMP, respectively. Result showed the strong thermal stability of CRP by binding of additional cAMP molecules to region between the hinge region and helix-turn-helix(HTH) motif at 5mM cAMP concentration.

• 한국정보과학회논문지:시스템및이론
• /
• 제29권11호
• /
• pp.622-633
• /
• 2002

패스워드를 이용한 인증 및 키교환 알고리즘은 뛰어난 편의성의 장점을 지니지만 사람이 기억할 수 있는 패스워드는 한계가 있어서 엔트로피(entropy)가 낮다. 패스워드의 편의성을 유지하면서 이러한 단점을 극복하기 외해 낮은온 엔트로피의 패스워드를 이용하여 안전한 인증 및 키교환을 수행하는 AMP(Authentication and key agreement via Memorable Password) 프로토콜이 제안되었다. AMP 프로토콜은 이산대수문제(Discrete Logarithm Problem)에 기반한 Diffie-Hellman을 이용하여 프로토콜을 완성하였다. 그러나 본 논문에서는 AMP를 더욱 효율적으로 수행하기 위해 타원곡선 암호화를 AMP에 적용한다. 즉, 이산대수문제 대신에 타원곡선이산대수문제(Elliptic Curve Discrete Logarithm Problem)에 기반한 EC-AMP(Elliptic Curve-AMP) 프로토콜을 제안하고 구현을 통해 높은 성능을 입증한다. EC-AMP는 AMP와 마찬가지로 랜덤 오라클(random oracle) 모델에서 여러 가지 공격에 대해 안전하므로 인증 및 키 교환이 필요한 네트워크 환경에 패스워드를 이용함으로 얻을 수 있는 편의성과 타원곡선이산대수문제가 제공하는 안전성을 동시에 보장할 수 있다.

• 한국동물학회지
• /
• 제18권4호
• /
• pp.221-229
• /
• 1975

근 소포체의 ATPase 활성과 Ca 능동수송에 대한 cAMP의 영향을 밝히고저 토끼를 재료로 하여 그 골격근에서 근 소포체를 원심분리로 추출하고, 이 근 소포체 절편의 ATPase 활성과 Ca 축적능을 측정하면서, 반응액내에 각종 농도( 1 $\times$ $10^{-7}$ M ~ 1 $\times$ $10^{-3}$ M)의 cAMP를 가하여 그 영향을 측정하였다. 근 소포체의 ATPase 활성에는 cAMP 의 영향은 없다. cAMP의 유도체인 DBcAMP도 역시 아무런 영향을 미치지 않는다. 따라서 이 효소활성은 cAMP의 조절작용을 받지 않는다. 근 소포체의 Ca 축적능은 cAMP에 의하여 감소된다. cAMP의 유도체인 DBcAMPdp 의해서도 이 Ca 축적능은 약간의 저해를 받는다. 따라서 Ca 축적능은 ATPase 활성에 의지하되 cAMP의 조절작용을 받는 것으로 판단된다.

• 한국동물학회지
• /
• 제34권2호
• /
• pp.181-187
• /
• 1991

양서류 여포를 배양할 때 외부에서 cAMP를 첨가하면 호르몬에 의한 난자의 성숙이 억제된다는 많은 보고가 있었다. 그러나 실제 외부의 cAMP가 여포내로 들어간다는 보고는 아직 없다. 본 연구에서는 배양액내의 cAMP가 여포내로 침투해 들어가는 현상과 들어간 cAMP의 분해과정을 radioimmunoassay로 조사하였다. 개구리 여포를 배양하면서 배양액에 난자의 성숙을 억제하는 농도의cAMP(2.5 mM)를 첨가한 후 일정시간 간격으로 여포내 축척된 cAMP의 농도를 조사한 결과 2시간에서 이미 기본수준(여포당 약 3 p mole)의 수십배로 증가하였다.(여포당 90 p mole). cAMP를 포함한 배양액에서 6시간 배양 후 보통 배양액으로 옮겨 배양하면서 일정 시간마다 여포내 cAMP의 농도를 측정한 결과 6시간 내에 cAMP농도가 여포당 160 p mole에서 약 10 p mole로 급격히 낮아졌다. 그러나 18시간 후에도 기본 수준으로까지 내려가지는 않았다. 이러한 cAMP의 감소과정이 progesterone이나 isobuty methylxanthine (IBMX)에 크게 영향을 받지 않았다. 배양중인 여포를 forskolin(9 u m)으로 자극했을 때에는 기본 수준의 약 3배정도로 cAMP의 농도가 증가하였다. 본 결과는 배양액내의 cAMP가 여포내로 투과해 들어가고 이들은 곧 여포에 의해 분해된다는 것을 시사하고 있다.

• Animal cells and systems
• /
• 제2권1호
• /
• pp.99-106
• /
• 1998

In this study, we have examined the role of cAMP in gap junctional communication (GJC) in preimplantation mouse embryos. GJC was monitored by Lucifer Yellow (LY) injected into one blastomere of compacted embryos. The speed of GJC was defined as the time taken for the last blastomere of the embryo to become visibly fluorescent. The median time for 8-cell embrvos (140 sec) was similar to that for 16-cell (135 sec). To determine whether cAMP and cAMP-dependent protein kinase (PKA) are involved in the regulation of GJC, the effects of PKA inhibitor (H8) and cAMP analogues (Rp-cAMP and 8-Br-cAMP) on dye transfer between blastomeres of compacted embryos were examined. Some of the embryos treated with either H8 or Rp-cAMP failed to transfer LY to all blastomeres within 10 min. In contrast, 8-Br-cAMP speeded up fluorescent dye transfer. The median time to fill all blastomeres with LY was 140 sec in untreated controls and 90 sec in siblings treated with 8-Br-cAMP. Inhibition of PKA by H8 or Rp-cAMP induced delay or arrest in embryo development after compaction, but the increase of intracellular cAMP showed no effect. These findings suggest that GJC in preimplantation mouse embryos is regulated by cAMP-PKA pathway and transient interference by PKA inhibitors induces the developmental delay beyond compaction.

• 약학회지
• /
• 제51권1호
• /
• pp.35-43
• /
• 2007

To investigate the immunomodulatory roles of cyclic AMP (CAMP) on macrophage- and T lymphocyte-mediated immune responses, CAMP elevating agents were employed and carefully re-examined under the activation conditions of the cells. Various inhibitors tested dose-dependently blocked tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ production with IC$_{50}$ values ranged from 0.04 to 300 ${\mu}$M. Of the inhibitors, cAMP-elevating agents showed lower cytotoxicity assessed by lactate dehydrogenase (LDH) release, suggesting less toxic and more selective. In particular co-treatment of dbcAMP with a protein kinase C inhibitor staurosporine displayed the synergistic inhibition of TNF-${\alpha}$ production. The modulatory effect of dbcAMP on TNF-${\alpha}$ and nitric oxide (NO) was significantly affected by treatment time of dbcAMP. Thus, post-treatment of dbcAMP (three hours before LPS) abrogated dbcAMP's inhibitory activity and rather enhanced TNF-${\alpha}$ level up to 60%. In contrast, additional NO production was shown at the co-treatment of dbcAMP with LPS. Unlike simultaneous treatment of phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and interferon (IFN)-${\gamma}$co-treatment, the combination of dbcAMP with other NO-inducing stimuli did not show drastic overproduction of NO. cAMP elevating agents also diminished splenocyte proliferation stimulated by concanavalin (Con) A, phytohemaglutinin A (PHA) and lipopolysaccharide (LPS). In addition, dbcAMP but not rolipram strongly suppressed CD8$^+$ T cells (CTLL-2). Finally, cAMP elevating agents were differentially involved in regulating CD98-mediated cell-cell adhesion. Thus, dbcAMP and rolipram significantly enhanced the cell-cell adhesion, whereas forskolin blocked. Therefore, our results suggest that CAMP elevating agents participate in various immune responses mediated by macrophages and T cells with a different fashion depending on cellular environments and activation signals.

• 한국동물학회지
• /
• 제18권1호
• /
• pp.19-26
• /
• 1975

自記放射法을 이용하여 dbcAMP와 theophylline이 未成熟卵子의 RNA合成에 미치는 영향을 관찰하였다. 培養中인 未成熟卵子의 RNA合成은 dbcAMP와 theophylline에 의하여 抑制를 받았다. dbcAMP나 theophylline은 培養液(modified Krebs-Ringer bicarbonate solution)內에 100 $\\mu$g/ml 정도 들어 있으며 핵막(germinal vesicle)의 붕괴 되지 못하고 그대로 存在하며 그동안의 RNA合成은 극히 억제된 채로 남아 있다. 그러나 培養을 시작하여 2$\\sim$3時間後, 즉 핵막붕괴가 끝난 다음에 이들 억제물질을 배양액에 添加하면 正常卵子와 같이 성숙분열이나 RNA合成이 억제 됨이 없이 진행된다. 24時間동안 dbcAMP나 theophylline으로 성숙이 억제 되었던 卵子도 이들 억제물질을 제거하면 즉시 成熟分裂이 진행되며 RNA合成도 正常的으로 일어난다. 이런 結果로 미루어 dbcAMP등의 RNA合成 抑制機作에 한 가지 가능성을 추측할 수 있다. 즉 dbcAMP나 theophylline의 처리에 의해 細胞質內 cAMP의 농도가 높아지고 이 cAMP는 핵막붕괴나 染色質의 응집에 관여하는 단백질 合成을 誘導할 mRNA合成을 억제하며 이 때문에 卵子는 핵을 보유한채 그대로 남아 있는 것이다.

• 대한약리학회지
• /
• 제26권2호
• /
• pp.127-133
• /
• 1990

세포막을 투과하는 cyclic AMP의 유도체인 Dibutyryl-cyclic AMP(db-cAMP)와 ad-enylate cyclase를 활성화시킴으로써 세포내에 CAMP를 증가시키는 Forskolin을 이용하여 토끼 대동맥평활근 이완작용의 기전을 검토하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Db-cAMP는 $1{\mu}M$ norepinephrine에 의한 지속성 수축을 농도의존적으로 억제하였으나 고농도의 K에 의한 수축은 억제하지 못하였다. 2. Forskolin은 $1{\mu}M$ norepinephrine에 의한 지속성 수축을 농도의존적으로 억제하였으며, 고통도의 K에 의한 수축보다 더 효과적으로 억제하였다. 3. Db-cAMP는 $1{\mu}M$ norepinephrine에 의한 $^{45}Ca$ 유입증가를 억제하였다. 4. Forskolin은 $1{\mu}M$ norepinephrine에 의한 $^{45}Ca$ 유입증가를 억제하였으며, 고농도의 K에 의한 $^{45}Ca$ 유입증가도 억제하였으나 유의차는 없었다. 5. Db-cAMP는 칼슘이온 제거용액에서 $l{\mu}M$ norepinephrine에 의한 일과성 수축을 농도의존적으로 억제하였다. 이상의 결과에서 cAMP는 수용체작동성 칼슘채널(ROCs)을 통한 칼슘이온의 유입을 억제함으로써 norepinephrine에 의한 수축을 억제하며, 고농도의 K수축 억제가 전위의존성칼슘채널(VGCs)을 통한 칼슘이온의 유입의 억제에 의한 것인지는 확실치 않다. 또한 cAMP는 norepinephrine에 의한 세포내 칼슘이온의 유리에 의한 일과성 수축도 억제한다.

• Mycobiology
• /
• 제38권1호
• /
• pp.26-32
• /
• 2010

The cyclic AMP (cAMP) pathway plays a major role in growth, sexual differentiation, and virulence factor synthesis of pathogenic fungi. In Cryptococcus neoformans, perturbation of the cAMP pathway, such as a deletion in the gene encoding adenylyl cyclase (CAC1), causes defects in the production of virulence factors, including capsule and melanin production, as well as mating. Previously, we performed a comparative transcriptome analysis of the Ras- and cAMP- pathway mutants, which revealed 163 potential cAMP-regulated genes (38 genes at a 2-fold cutoff). The present study characterized the role of one of the cAMP pathway-dependent genes (serotype A identification number CNAG_ 06576.2). The expression patterns were confirmed by Northern blot analysis and the gene was designated cAMP-regulated gene 1 (CAR1). Interestingly, deletion of CAR1 did not affect biosynthesis of any virulence factors and the mating process, unlike the cAMP-signaling deficient cac1$\Delta$ mutant. Furthermore, the car1$\Delta$ mutant exhibited wild-type levels of the stress-response phenotype against diverse environmental cues, indicating that Car1, albeit regulated by the cAMP-pathway, is not essential to confer a cAMP-dependent phenotype in C. neoformans.