Kim, Young-Jin;Lee, Si-Myeong;Cho, Sang-Kyun;Oh, Young-Jin;Kim, Hag-Sin
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.55
no.2
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pp.139-143
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2010
The relationship between ADP-glucose pyrophosphorylase (AGP) activity and the characteristics of related pod setting in developing seed of soybean cv. Pungsannamulkong, Iksannamulkong, Geumjeongkong #1 and Danpaheuk was studied. AGP activity during the accumulate of the majority of dry matter in all cultivars suggested that this enzyme might be associated with this process. At the Vn and R1 stages, AGP activity of full-grown leaves of Pungsannamulkong, Iksannamulkong, Geumjeongkong #1 was the highest and then decreased progressively. However AGP activity of Danpaheuk was the lowest and also had lower seed weight. So regulation of matter accumulation in developing soybean seeds may also depend on AGP activity. AGP capacities as expressed by AGP activity seem to have a good predicting value for the dry matter of leaf and seed at R1 to R5 stages in our series of R3 stage genotypes. Western blots probed with antibody specific to the subunit of potato AGP revealed a single 60KD immunoreactive band that changed in intensity during the growth cycle in association with changes in total AGP activity.
The existence of glycine residues in long-chain scorpion toxins has been well documented. However, their role as analgesics has not been evaluated. To address this issue, we investigated the functional role of glycines in the C-terminal end of Chinese-scorpion toxin from Buthus martensii Karsch (BmK AGP-SYPU2) using site-directed mutagenesis and analgesic activity assays. Recombinant BmK AGP-SYPU2 and its mutants were efficiently expressed in E. coli and purified to homogeneity using immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC) and cation exchange chromatography. The mouse-twisting test was used to detect the analgesic activity of BmK AGP-SYPU2 and its mutants. As a result, we identified glycines at the C-terminal end that, when altered, significantly affected analgesic activity. Also, Mut6566 was significantly decreased compared to BmK AGP-SYPU2. These data indicate that the glycines at the C-terminal end are important for the analgesic activity of BmK AGP-SYPU2.
Kim, Young-Ok;Park, In-Suk;Nam, Bo-Hye;Kong, Hee-Jeong;Kim, Woo-Jin;Lee, Sang-Jun;Kim, Kyung-Kil
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.13
no.1
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pp.49-55
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2010
A bacterial strain with phytase and glucose-1-phosphatase activity was isolated from seawater. The colony was identified as an Enterobacter cloacae strain and named E. cloacae B11. A gene, agpEnB11, coding for an intracellular acid glucose phosphatase was cloned from the strain and sequenced. It comprised 1,242 nucleotides and encoded a polypeptide of 413 amino acids. Recombinant glucose-1-phosphatase (AgpEn) was overexpressed in Escherichia coli and purified using Ni-NTA column under native conditions. Purified protein displayed a single band of 47 kDa on SDS-PAGE. AgpEn hydrolyzed a wide variety of phosphorylated compounds, with high activity for glucose-1-phosphate and glucose-6-phosphate. Optimum pH and temperature for enzyme activity were pH 5.0 and $50^{\circ}C$, respectively. Enzyme activity was stimulated by $Ca^{2+}$ and $Co^{2+}$, and inhibited by $Cu^{2+}$.
The obtained results are summarized as follows 1. New findings are reporting year by year as for the study related to Anti-inflammatory mechanism of Bee Venom therapy. 2. The Anti-inflammatory effect of Bee Venom therapy is achieved through counterirritation, stimulations to adrenal cortex, immuno-regulation, antioxidation, removal of free radicals, modulation of AGP gene induction. 3. The chief components of Bee Venom related to Anti-inflammatory effect are Melittin, MCD peptide, Apamin, Adolapin etc. 4. Melittin binds to secretory phospholipase A2 and inhibits its enzymatic activity. 5. Melittin blocks neutophil O2-production. 6. MCD peptide(Peptide 401) stimulates the mast cell secrets histamine, Anti-inflammatory effect caused by this is 'conterirritation'. 7. Melittin & Apamin have an anti-inflammatory effect by inducing cortisone secretion. 8. MCD peptide & Apamin increase immunologic fuction by stimulating hypophysis & adrenal cortex and have an anti-inflammatory effect by inhibiting synthesis of prostaglandin from arachidonic acid. 9. Adolapin have an anti-inflammatory effect by inhibiting COX. 10. Bee Venom have an anti-inflammatory effect by suppressing AGP($\alpha$-acid glycoprotein). 11. Bee Venom have an anti-inflammatory effect by inhibiting NO, iNOS, PLA2, COX-2, TNF-$\alpha$, IL-1, NF-${\kappa}B$, MAP kinase.
The myristoyl-acyl carrier protein (ACP) specific thioesterase from Iris tectorum was purified to a considerable homogeneity and characterized. The enzyme was eluted with a considerable stability by double-gradients using Triton X-100 and low ionic KCl or Na-phosphate through DEAE-52, Octyl-Sepharose, Q-Sepharose, and hydroxyapatite chromatoraphy. SDS-PAGE analysis showed a single band of 39 kDa. The native molecular weight was estimated to be 82 kDa by Sephacryl S-200 chromatography, indicating that the enzyme was a dimer. The thioesterase showed a chain-length specificity to myristoyl-ACP in preference to other-ACPs. The enzyme activity decreased by 1.0 mM myristate to about 27% of the original activity, whereas the remaining activity with decanoate was about 90%. The purified thioesterase was inhibited by myristoyl-CoA more than by myristate, suggesting that the myristoyl-AGP thiolesterase might be controlled by myristic acid and/or a subsequent product myristoyl-CoA. In addition, some biochemical characteristics of the enzyme were described.
This experiment was conducted to investigate the effect of dietary single or mixed supplementation of plant extract, fermented medicinal plants and Lactobacillus on performance, nutrient availability, blood characteristics, cecal microflora and intestinal digestive enzymes activity in broiler chickens and to prove the possibility of plant derived compounds and Lactobacillus as an antibiotic growth promoter alternative. A total of eight hundred forty, 1-d-old male broiler chicks (Ross strain) were randomly divided into 7 groups with 4 replicates of 30 birds each. The treatments were NC (antibiotic-free diet), PC (basal diet with 0.05% antibiotics and 0.03% anticoccidials), PE (basal diet with 0.1% plant extract), FMP (basal diet with 0.1% fermented medicinal plants), LB (basal diet with 0.1% probiotics), PE+LB (basal diet with 0.1% plant extract and 0.1% probiotics) and FMP+LB (basal diet with 0.1% fermented medicinal plants and 0.1% probiotics). The final body weight, body weight gain and feed conversion rate in all treated groups tended to be improved or significantly improved as compared to those of NC (P<0.05). PE was significantly high in the final body weight, body weight gain of all treated groups (P<0.05). But the growth performance was significantly lower in all treated groups except PE than PC (P<0.05). No synergic effect in growth performance was found when plant extracts and Lactobacillus were mixed and fed to broilers. The ratio of albumin to globulin was significantly lower in all groups than NC (P<0.05). And the stress indicator (lymphocyte/heterophil ratio) of NC was significantly reduced than other treatments (P<0.05). No significant differences were observed on the numbers of cecal microbes and Lactobacillus. The number of cecal E. coli and Salmonella in FMP and LB were significantly reduced (P<0.05). The activity of intestinal digestive enzymes except to sucrase of treated groups significantly decreased compare to those of controls (P<0.05). These results suggest the possibility that plant extracts and Lactobacillus could be used as the alternative of antibiotic growth promoters by improving the performance of broiler chicks.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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