• 제목/요약/키워드: AD gel

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The Study of Synergy between the BchE-k Variant and the ApoE Gene in the Alzheimer Dementia of the Korean Population

  • Shin, Eun-Sim;Yoon, Song-Ro;Choi, Soo-Kyung;Kim, Soo-Young
    • Journal of Genetic Medicine
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    • 제3권1호
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    • pp.29-32
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    • 1999
  • The Apolipoprotein E type 4 allele (ApoE ${\varepsilon}4$) is genetically associated with the common late onset familial and sporadic forms of Alzheimer's disease. The BchE-k variant, which is the common variant of the BchE gene, has been reported to show allelic association with AD in subjects who are also carriers of the ${\varepsilon}4$ allele of the ApoE, especially in subjects over the age of 75. This study was performed to evaluate the distribution of the ApoE and the BchE genotypes in the healthy and AD groups and to evaluate the synergy between the BchE-k variant and the ApoE ${\varepsilon}4$ in AD. The ApoE and the BchE genotypes were determined in DNA samples from 610 healthy people and 60 LOAD patients by using ARMS by standard agarose gel electrophoresis. The effect of the ApoE ${\varepsilon}4$ was closely related to AD(p<0.05). A comparison between the AD patients and the healthy individuals, both with the ${\varepsilon}4$ allele, indicated an interaction between the BchE-k and the ApoE ${\varepsilon}4$(p<0.05). The association of the BchE-k with AD was limited to carriers of the ApoE ${\varepsilon}4$ allele, among whom the presence of the BchE-k gave an odds ratio of AD 3.48 (95% C.I. 1.3-9.2). Therefore, these results suggested that further evidence of an association between the ApoE ${\varepsilon}4$ and LOAD, and the BchE-k acts in synergy with the ApoE ${\varepsilon}4$ as a susceptibility gene for AD.

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Antioxidant Flavonoids and Chlorogenic Acid from the Leaves of Erobotrya japonica

  • Jung, Hyun-Ah;Park, Jong-Cheol;Chung, Hae-Young;Kim, Jong;Choi, Jae-Sue
    • Archives of Pharmacal Research
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    • 제22권2호
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    • pp.213-218
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    • 1999
  • The antioxidant activity of Eriobotrya japonica was determined by measuring the radical scavenging effect on DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical and lipid peroxidation produced when mouse liver homogenate was exposed to the air at $37^{\circ}C$, using 2-thiobarbituric acid (TBA). The methanol extract and its factions of Eriobotrya japonica leaves showed strong antioxidant activity. The antioxidant activity of EtOAc and n-BuOH soluble fractions were stronger than the others, and were further purified by repeated silica gel, MCl gel CHP-20P, and Sephadex LH-20 column chromatography. Antioxidant chlorogenic acid, quercetin-3-sambubioside from n-BuOH fraction and methyl chlorogenate, kaempferol- and quercetin-3-rhamnosides, together with the inactive ursolic acid and$ 2{\alpha}$-hydroxyursolic acid from EtOAc fraction were isolated. Antioxidant flavonoids and chlorogenic acid also showed prominent inhibitory activity against free radical generation in dichlorofluorescein (DCF) method.

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Acinetobacter schindleri DYL129 유래의 3개 lipases와 chaperone의 발현과 정제 (Expression and Purification of Three Lipases (LipAD1, LipAD2, and LipAD3) and a Lipase Chaperone (LipBD) from Acinetobacter schindleri DYL129)

  • 김선희;이용석;정해린;편효민;유주순;최용락
    • 생명과학회지
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    • 제29권4호
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    • pp.492-498
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    • 2019
  • 기존 연구를 통하여 토양에서 분리한 Acinetobacter schindleri DYL129로부터 3개의 lipase 유전자(lipAD1, lipAD2와 lipAD3)들과 1개의 chaperone (lipBD) 유전자를 보고하였다. 본 연구에서는 각 유전자들의 발현을 위해서 pET32a(+)와 pGEX-6P-1 벡터에 클로닝하여 각각을 pETLAD1-3와 pETLBD 또는 pGEXLAD1-3와 pGEXLB로 명명하였으며, 단백질의 발현량은 pET 시스템을 사용할 때 1.5 배 정도 향상됨을 확인하였다. LipAD1과 LipAD2는 inclusion body 형태로 발현이 되었으며, LipAD3과 LipBD는 soluble type으로도 발현되었다. Inclusion body 형태의 LipAD1과 LipAD2는 고농도의 우레아를 처리하여 refolding 시켰다. LipAD1은 C4와 C2를, LipAD2는 C2와 C14를 그리고 lipAD3은 C2, C4와 C14를 기질로 잘 이용하는 것을 확인하였다. 그리고 모든 효소들은 $50^{\circ}C$에서 최적 활성을 나타내었다.

SAFETY EVALUATION OF ADENOVIRUS-MEDIATED P16 GENE TRANSFER BY USING MICROARRAY AND 2D/MALDI-TOF

  • Park, Misun;Hoil Kang;Jaehee Pyo;Sinae Lim;Seungwan Jee;Miok Eom;Taikyung Ryeom;Kim, Okhee
    • 한국독성학회:학술대회논문집
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    • 한국독성학회 2002년도 Molecular and Cellular Response to Toxic Substances
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    • pp.196-196
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    • 2002
  • p16INK4a tumor suppressor gene transfer in the non-small cell lung cancer cells by transduction of recombinant adenovirus (Ad5CMV-p16) resulted in significant inhibition of cancer cell growth (Anticancer Res., 1998, 18:3257-3261). As a safety concern, we have investigated gene and protein expression after transduction of adenoviral vector (Ad5CMV-p16) in human non-small cell lung cancer (A549) cells by using microarray and 2D gel electrophoresis/ MALDI-TOF.(omitted)

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Purification and Characterization of 2,4-Dichlorophenol Oxidizing Peroxidase from Streptomyces sp. AD001

  • Jeon, Jeong-Ho;Yun-Jon Han;Tae-Gu kang;Eung-Soo Kim;Soon-Kwang Hong;Byeong-Chul Jeong
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제12권6호
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    • pp.972-978
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    • 2002
  • Streptomyces sp. AD001 is a Gram-positive soil actinomycetes secreting an uncharacterized 2,4-dichlorophenol (DCP) oxidizing enzyme, whose activity is similar to the previously known Actinomycetes lignin-peroxidase (ALiP). This extracellular peroxidase was purified from Streptomyces sp. AD001 as a single protein band on an SDS-PACE by ammonium sulfate fractionation, Q-sepharose, concanavalin A, and Bio-Gel HTP column chromatographies. The molecular mass of the purified peroxidase was determined by SDS-PAGE to be 45.2 kDa, and 49.7 kDa with MALDI-TOF-MS, respectively. The highest level of peroxidase activity was observed at pH 7.5 and $30^{\circ}C$. The amino terminal sequence of the purified peroxidase (G-E-P-E-E-G-N-V-D-G-T-L) showed no significant homologies to my known proteins, suggesting that Streptomyces sp. AD001 may secrete a novel kind of bacterial peroxidase Initial rate kinetic data of the 2,4-DCP oxidation were best modeled with a random-binding bireactant system.

A Novel Acid-Base Catalyzed Sol-Gel Synthesis of Highly Active Mesoporous TiO2 Photocatalysts

  • Khan, Romana;Kim, Sun-Woo;Kim, Tae-Jeong;Lee, Hyo-Sun
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제28권11호
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    • pp.1951-1957
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    • 2007
  • A new synthetic strategy based on the acid-base catalyzed sol-gel method was developed for the preparation of a series of mesoporous TiO2 nanoparticles. A key feature of the method involves a gradual change in pH (0.8- 9) during the sol-gel transition, which guarantees easy introduction of mesoporosity without relying on the well-established sonochemical or template approach. In addition, this method leads to the exclusive formation of the anatase phase stable enough to the calcination temperature up to 600 oC. The physicochemical properties of the particles in the series were characterized by various spectroscopic and analytical techniques such as wide-angle XRD, SAXRD, BET surface area, FE-SEM, TEM, FT-IR, TGA, and XPS. The photocatalytic efficiency of these materials was investigated for the oxidation of toluene under UV-irradiation. All but T-ad in the series exhibited high photocatalytic activity pushing the reaction into completion within 3 h. The reaction followed the first order kinetics, and the rate reaches as high as 3.9 × 10?2/min which exceeds the one with the commercially available Degussa P-25 by a factor of 3.2. When comparison is made among the catalysts, the reactivity increases with increase in the calcination temperature which in turn increases the crystallinity of the anatase phase, thus revealing the following rate orders: T-3 < T-4 < T-5 < T-6.

β-Secretase (BACE1) Purification by Refolding Method and Complex with Hispidin

  • Lim, Ji-Hong;Lee, Bo Ram;Park, Hee Won;Hong, Bum Soo;Lim, Beong Ou;Kim, Young Jun
    • 대한화학회지
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    • 제58권6호
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    • pp.553-559
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    • 2014
  • Alzheimer's disease (AD) is a devastating neurodegenerative disease that represents the most common form of dementia among the elderly population. The deposition of aggregated ${\beta}$-amyloid ($A{\beta}$) senile plaques in the human brain is a classic observation in the neuropathology of AD, yet an understanding of the mechanism of their formation remains elusive. $A{\beta}$ is formed through endoproteolysis of the amyloid precursor protein (APP) by ${\beta}$-secretase (BACE1, ${\beta}$-site APP-cleaving enzyme) and ${\gamma}$-secretase. In this study, BACE1 protein was successfully over-expressed, purified, and refolded and utilized in a binding study with hispidin. We developed a simpler refolding method using a urea gradient and size-exclusion gel filtration to purify an active BACE1 protein variant, in larger quantities than that reported previously, and measured the binding affinity of hispidin to the BACE1 protein variant through isothermal titration calorimetry.

홀스타인종 유우의 혈청단백질 및 효소의 유전적 변이체 (Genetic Variants of Serum Proteins and Enzymes in Holstein-Friesian Cattle)

  • 상병찬;류승희;서길웅;이창수
    • 농업과학연구
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    • 제22권2호
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    • pp.163-169
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    • 1995
  • 본 연구는 홀스타인종 유우의 혈청단백질 및 효소에 대한 유전적 구조를 분석하기 위하여, 혈청단백질인 post-transferrin-2(pTf-2), transferrin(Tf), post-albumin(pAlb) 및 albumin(Alb)과 혈청효소인 ceruloplasmin(Cp)와 amylase-I(Am-I)을 polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE)와 starch g디 electrophoresis(STAGE) 방법으로 유전적 변이체를 분석하였다. 혈청단백질인 pTf-2 좌위는 pTf-2 F와 S 유전자에 의해 지배되는 pTf-2 FF, FS 및 SS 유전자형이 확인되었으며, 이들의 분포는 각각 76.34%, 14.50% 및 9.10%이었고, 유전자빈도는 pTf-2 F와 S가 각각 0.836 및 0.164이었다. 한편 Tf 좌위는 Tf A, D1, D2 및 E 유전자가 검출되었으며, 유전자형은 Tf AA, AD1, AD2, AE, D1D1, D1D2, D2D2 및 D2E형이 확인되었고, 이들의 분포는 각각 0.11, 32.06, 19.08, 1.53, 10.69, 18.32, 9.92 및 2.29%이었으며, 유전자빈도는 Tf A, D1, D2 및 E에서 각각 0.324, 0.359, 0.298 및 0.019이었다. 또한 pAlb 좌위는 pAlb F와 S 유전자가 검출되었고, 유전자형은 pAlb FF, FS 및 SS형이 확인되었으며, 이들의 분포는 각각 32.06, 29.77 및 38.17%이었고, 유전자빈도는 pAlb F와 S가 각각 0.469 및 0.531이었다. Alb 유전자 빈도에 있어서는 Alb A와 B가 각각 0.996 및 0.004이었다. 그리고 혈청효소인 Cp 좌위는 Cp F와 S 유전자가 검출되었으며, 유전자형은 Cp FF, FS 및 SS 형이 확인되었고, 이들의 분포는 각각 46.57, 27.48 및 25.95%이었으며, 유전자빈도는 Cp F와 S가 각각 0.603 및 0.394이었다. Am-I 좌위는 Am-I B와 C 유전자가 검출되었으며, 유전자형은 Am-I BB, BC 및 CC 형이 확인되었고, 이들의 빈도비율은 각각 39.69, 21.73 및 38.93% 이었으며, 유전자 빈도는 Am-I B와 C가 각각 0.503 및 0.497이었다.

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아토피 견에서 분리한 M. pachydermatis 추출 단백질에 대한 IgG 체액성 면역 반응의 연구 (IgG Humoral Immune Response to Extract Proteins of Malassezia Pachydermatis Isolated from a Dog with Atopic Dermatitis (Ad))

  • 김은태;김하정;임채영;박희명
    • 한국임상수의학회지
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    • 제25권5호
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    • pp.340-345
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    • 2008
  • M. pachydermatis는 개에서의 피부 정상 균 종으로서, 과잉 증식되는 가장 흔한 질병 중의 하나가 아토피성 피부염이다. 이 연구의 목적은 개의 아토피성 피부염에서 M. pachydermatis 추출 단백질에 대한 IgG를 이용한 체액성 면역 반응을 알아보는 것이다. M. pachydermatis의 전기 영동과 개의 혈청을 이용한 Western immunoblotting을 이용해 M. pachydermatis의 알러젠을 밝히고 아토피 견과 비 아토피 견에서의 각각의 면역 반응을 비교하였다 결과는 아토피 견의 혈청에서 18, 21, 26, 32, 34, 38, 40, 42, 46, 58, 64, 75, 85, 그리고 120 kDa의 단백질의 반응이 발견된 것에 반해, 비 아토피 견에서는 50 kD을 제외한 다른 단백질의 반응은 발견되지 않았다. 이 연구의 결과로 M. pachydermatis 피부염을 지닌 개의 아토피성 피부염은 IgG의 체액성 면역 반응을 유발하고, 이 면역 반응은 개의 아토피성 피부염의 발병 기전에 중요한 역할을 한다는 것을 알 수 있다. 그러나 개의 아토피성 피부염에서의 M. pachydermatis에 대한 체액성 면역 반응의 역할을 밝히기 위해서는 더 많은 연구가 필요하다.

압출조리에 의한 밀가루 전분질의 분자구조 변화와 알콜발효 효율에 관한 연구 (Effect of Extrusion-Cooking on the Molecular Structure and Alcohol Yield of Wheat Starch)

  • 이철호;김기명;김지용;임재각
    • 한국식품과학회지
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    • 제23권6호
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    • pp.683-688
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    • 1991
  • 단일축 압출조리기를 이용하여 밀가루를 조리한 후 탁주발효용 기질로 사용하여 알코올 수율을 조사하였다. 또한 스팀가열과 비교하여 압출조리에 의한 밀가루 전분질의 분자구조 변화와 효소 민감성에 대하여 gel permeation chromatography(GPC)와 고유점도 측정으로 평가하였다. 밀가루의 GPC patternd은 스팀 가열이나 방출조리에 의하여 크게 변화되지 않았다. 그러나 ${\alpha}-amylase$를 30분간 처리할 경우 압출성형된 밀가루의 맥아당 생산량이 크게 증가하며 GPC pattern도 크게 변하여 저분자 전분질의 함량이 증가하며 고유점도는 감소하였다. 압출성형된 밀가루로 탁주발효를 한 결과 스팀증자된 밀가루로 탁주발효를 한 경우보다 실험실 규모 실험에서는 26%의 알콜생산 증대가 기록되었으며 공장규모 발효에서는 10% 이상의 알콜생산 증대를 얻을 수 있었다.

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