In vivo와 in vitro 생물검정법에서의 활성관계를 조사하고 또한 보다 효율적인 in vitro 검정법을 개발하기 위하여 작용기구가 다른 두 계열 살균제 즉 sulphamide계 (dichlofluanid와 tolylfluanid)와 dicarboximide계 살균제 (iprodione, vinclozolin 및 procymidone)을 시험약제로 하여 본 실험을 수행하였다. Dichlofluanid, tolylfluanid, iprodione, vinclozolin procymidone의 토마토 유묘에서의 병 방제효과는 유사하였다. 그러나 이들 살균제에 대해 in vitro 생물검정법으로 항균활성을 비교한 결과, sulphamide계 살균제는 포자발아 억제실험에서 높은 활성을 나타낸 반면에, dicarboximide계 살균제는 균사생장 억제실험에서 항균활성이 더 우수하였다. 그러므로 in vivo 병 방제효과가 유사하더라도 작용기구가 다르면 in vitro 생물검정법에서의 항균활성은 다르게 나타남을 알 수 있었다. 또한 포자현탁액을 넣은 96-well microtiter plate에 약제를 처리하고 3시간 배양 후 배양액을 제거하고 다시 새 배지를 넣어 배양한 후 생장억제를 조사한 실험 (microtiter plate method I, MPM I)에서는 살균제들의 포자발아 억제실험과 유사한 경향의 활성을 보였다. 96-well microtiter plate에서 포자현탁액을 6시간 동안 배양하여 포자를 발아시킨 후에 약제를 처리한 실험(microtiter plate method II, MPM II)에서의 항균활성은 균사생장 억제효과와 일치하는 경향을 보였다. 따라서 기존의 in vitro 항균활성 실험보다 편리하고 효율적인 MPM I과 II 방법은 각각 포자발아와 균사생장 억제실험을 대신할 수 있으리라 생각되었다.
분지아미노산 생합성 과정에 관여하는 첫 번째 효소인 acetolactate synthase (ALS)를 대상으로 수행할 수 있도록 고효율 검색방법(High Throughput Screening, HTS)을 개발하였고, 이를 이용하여 식물특이적 효소 저해제로 알려진 107개의 기존 화합물 중에서 새로운 ALS 저해 화합물을 선발하였다. 기존의 방법과 비교할 경우 한사람이 1회 수행한다고 하면 8 배 효율이지만 연속적으로 수행한다고 할 경우 1/10 이하의 양, 동일한 재료의 적용, 측정 결과의 계산, enzyme kinetics 등을 감안하면 최소 100 배 이상의 효과를 얻을 수 있다. 새로운 ALS 저해제로 탐색된 화학물질은, ammooxyacetic acid, azelaic acid, citric acid, cyanuric fluoride, glyoxylic acid, itaconic acid, malonic acid, niclosamid, oxalic acid, 2-oxoglutaric acid, suramin 등이었다. 앞으로 이들을 기본 구조로 하여 신규 ALS 저해 제초제의 개발을 위한 유도체의 합성에 이용되었으면 한다.
본 연구는 클로로겐산의 함량을 측정하기 위한 흡광도 방법을 구축하였으며, 구체적으로는 클로로겐산이 $50^{\circ}C$와 글라이신 및 알칼리 조건하에서 녹색반응이 일어난다는 현상을 이용했다. 녹색형성은 일련의 클로로겐산 농도에 의존성을 가졌다. 본 연구에 따른 클로로겐산의 측정방법을 이용하여 블루베리에 함유된 클로로겐산의 함량을 분석하였다(12.42 mg/g d.w). 이러한 방법은 저가의 비용과 빠른 시간으로 많은 시료를 대량으로 쉽게 클로로겐산의 함량은 측정할 수 있는 효과를 가진다.
This study describes a zero discharge and reuse system developed for rural areas. The purpose of the system is decontamination of used irrigation water for down-stream usage and reuse of wastewater in rural villages for preventing water shortage problem expected to happen in near future. The system consists of anoxic, FES (Ferrous Electricity System), Oxic, Cralifier processes. The main feature of the system is to remove phosphorous by using Fe-ionizing module. Indoor experiments were undertaken with a trial product of the system to test its performance. The removal capacities of T-P, T-N, and BOD were examined. Also the proper time for the replacement of iron plate module was tested as well as the efficiency of T-P removal rate based on the usage of an automatic washing system for the iron plate. As results, the system showed very good water purification performances through obtaining the results of over 90% removal rates from T-P, BOD, and 67% from T-N. The proper time period for replacement of iron plate was maximum 2 years, and also efficiency of T-P removal rate found to be greatly influenced by the usage of an automatic washing system from the test.
한국 양식산업에서 중요한 어종인 넙치 (Paralichthys olivaceus) 포르말린으로 처리한 E. tarda를 항원으로 하였을 때의 면역반응 분석을 위하여 ELISPOT 기법을 적정화시킨 후 넙치의 각 장기에 있는 총 항체생성세포와 특이 항체생성세포를 계수하는데 응용하고자 하였다. 전신과 비장의 항체생성세포를 2.5시간 이상 96 well plate에 배양하면 충분히 분석이 가능하였다. 그러나 총 또는 특이 항체생성세포 분석을 위하여 과량의 토끼 항 넙치 면역글로불린 또는 E. tarda 항원을 plate에 coating하는 것은 오히려 ELISPOT법의 감도를 감소시키는 것으로 나타났다. ELISPOT법의 특이성은 단백질 합성 억제제인 cycloheximide를 처리한 임파세포에서 총 항체생성세포가 발견되지 않는 것으로서 입증할 수 있었다. 특이 항체생성세포 수의 최대치는 면역 3주째에 나타났으며 이후 계속 빠르게 감소하여 7주째는 거의 발견되지 않았다. 이러한 반응은 신장과 비장에서 유사하게 나타나 임파장기에 따른 차이점은 발견할 수 없었다. 면역 후 2주와 3주 사이에 혈청내 특이 항체량 또한 빠르게 증가하여 ELISPOT법으로 분석된 특이 항체생성세포 수의 변화와 일치함을 발견할 수 있었다. 그러나 증가된 혈청내 특이 항체량이 면역 5주부터 실험 종료 시점까지 계속 높은 수준으로 유지되고 있는 것은 급격한 감소를 보이는 특이 항체생성세포의 동력학적 변화와는 명확히 구별되는 점이었다.
Background: In vitro culture of preantral follicles is a promising technology for fertility preservation. Objectives: This study aims to investigate an optimized three-dimensional (3D) fetal bovine serum (FBS)-free preantral follicle culture system having a simple and easy operation. Methods: The isolated follicles from mouse ovaries were randomly divided in an ultra-low attachment 96-well plates supplement with FBS or bovine serum albumin (BSA) culture or encapsulated with an alginate supplement with FBS or BSA culture. Meanwhile, estradiol (E2) concentration was assessed through enzyme-linked immunosorbent assay of culture supernatants. The diameter of follicular growth was measured, and the lumen of the follicle was photographed. Spindle microtubules of oocytes were detected via immunofluorescence. The ability of oocytes to fertilize was assessed using in vitro fertilization. Results: The diameters were larger for the growing secondary follicles cultured in ultra-low attachment 96-well plates than in the alginate gel on days 6, 8, and 10 (p < 0.05). Meanwhile, the E2 concentration in the BSA-supplemented medium was significantly higher in the alginate gel than in the other three groups on days 6 and 8 (p < 0.05), and the oocytes in the FBS-free system could complete meiosis and fertilization in vitro. Conclusions: The present study furnishes insights into the mature oocytes obtained from the 3D culture of the preantral follicle by using ultra-low attachment 96-well plate with an FBS-free system in vitro and supports the clinical practices to achieve competent, mature oocytes for in vitro fertilization.
본 연구는 식물세포막을 파괴시켜 제초활성을 나타내게 하는 화합물(막과산화형 제초제)을 미지의 많은 화합물로부터 신속하게 탐색하기 위한 새로운 검정법을 확립하기 위하여 실시되었으며, 확립한 전체적인 검정과정은 다음과 같다. 96-well microplate에 시험용액 $200{\mu}L$ 넣고 여기에 오이자엽으로부터 적출한 직경 4 mm의 절편 1개씩을 띄운다. 항온실의 광조건 하에서 회전진탕기로 조금씩 흔들어주면서 8시간 배양한 후 절편을 제거한 다음, 배양액에 HVA와 HRP를 첨가하여 반응시킨 후 마이크로평판용 형광검출기를 이용하여 형광도(Ex 320 nm, Em 425 nm)를 측정한다. 형광변화량이 높을수록 제초활성이 높은 것으로 판단한다. 본 방법은 96-well microplate에서 작업을 수행할 수 있고 형광검출 기술을 이용함으로써 검정과정과 작업을 간편하게 하여 검정효율을 기존보다 현저히 높인 것이 특징이다. 아울러 활성검정을 추출된 효소가 아닌 잎 절편수준에서 수행하기 때문에 보다 실용화에 근접한 정량적 데이터를 얻을 수 있는 장점을 가진다.
A robot system for clone replication and gridding, which is a preliminary state of the genome research, was developed and evaluated its performance. This gridding robot system consisted of 1) a gridding heat that replicated the clone, 2) a manipulator, as a part of body of robot, which transferred the gridding head along x-, y-, z-axis, 3) a well plate arranging board, 4) a sterilization unit, and 5) a control unit. Performance of the system was evaluated with 1) repeatability of the robot system, 2) clone replication efficiency, 3) time requirement of the replication, and 4) sterilization efficiency. The repeatability error of the robot system showed 0.219 mm and 0.094 mm in the direction of x- and y-axis, respectively. The success rate of the clone replication with the gridding head was 100% on the membrane filter. The time required for the replication was four minutes and fifty-five seconds from the four 96 well plates to a 384 well plate meanwhile the required time with well experienced hand labor was three minutes thirty-five seconds. The gridding operation of clone could not be done by hand labor and the required time with robot system for the gridding on the membrance filter with the control program 5$\times$5: 1 copy and 384 gridding pins was twenty minutes and twenty-five seconds. The efficiency of the sterilization was considered to be satisfactory since no growth of fungi was found around the area of replication in the membrane filter.
본 연구에서 분자육종을 위한 신속 DNA추출법을 개발하고자, 2% CTAB 추출법을 시스템적으로 개량한 Modified CTAB법에 대한 결과를 요약하면 아래와 같다. 1. DNA 추출용 샘플마쇄는 Voltex mixer, 3개 텅스텐 구슬 및 96 deep well block을 이용하였으며, 5분 이내에 96개 샘플을 분쇄할 수 있었다. 2. Modified CTAB DNA 추출법은 1.5 ml E-tube 대신에 1.2 ml 8연식 tube를 사용하였으며 DNA 추출, PCR작업 및 전기영동까지 일련의 작업이 8채널 멀티피펫을 이용할 수 있는 시스템적으로 개선하였다. 3. Modified CTAB법은 어린잎 뿐 만 아니라 이앙 후 30일째 채취한 잎에서도 DNA 추출이 가능하기 때문에 기존의 육종포장에 재식된 재료를 활용할 수 있는 장점이 있다.
International Journal of Air-Conditioning and Refrigeration
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제16권4호
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pp.124-129
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2008
Design practice has been made on an oil-less scroll air compressor as an air supply device for a 2 kW fuel cell system where air pressure of 2 bar and flow rate of 120 liter/min are required. Basic structure of the scroll compressor includes double-sided scroll wrap for the orbiting scroll driven by two crankshafts connected to each other by a timing belt. These features can eliminate thrust surface which otherwise would produce frictional heat and jeopardize reliable operation of the orbiting scroll and the scroll element's deformation as well. This study focuses on optimum scroll wrap design; orbiting radius has been chosen as an independent design parameter. As the orbiting radius changes, scroll sizes such as scroll base plate and discharge port diameters change accordingly. Gas compression-related losses and mechanical loss also change with the orbiting radius. With a scroll base plate diameter of 120mm at most and discharge port of at least 10mm, the orbiting radius should be within the range of 2.5-4.0mm. With this range of the orbiting radius, it was estimated by performance analysis that the compressor efficiency reached to a maximum of ${\eta}_c$=96% at the orbiting radius of $r_s$=3.5mm for the scroll wrap height-to-thickness ratio of h/t=5.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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