In this experiment forty-eight Sprague Dawley male rats were chosen and used in order to measure the growth rates and to see the effects of lead acumulation in their organs resulting from variously controlled lead protein diet. Protein sources were casein and isolated soyprotein (ISP), and each source was divided into three groups : 7% low protein [LP], 20% standard protein (SP) and 40% high protein (HP) groups. The six experimental groups were given lead acetate(25 mg/kg B.W.) and six control groups were given sodium chloride by oral administration 6 times a week for weeks. The results from this experiment were summeraized as following ; 1) Food consumption, weight gain, organ weight and food efficiency ; Lead acetate administration with protein source had no effects on food consumption, weight gain and organ weight . By their different levels of protein, food consumption of LP group was less the that of SP and HP groups after 3 weeks, weight gain of LP group was less than that of SP and HO groups after 1 weeks. The organ weight in LP group was significantly lower than SP and HP groups except teeth and adrenal s. Effect of lead acetate administration on food efficiency have significantly lower in LP-ISP diet and HP -casein diet than other groups only first week. By their different levels LP group showed significantly lower than SP group until 3 weeks. 2) Hematopoietic effect ; The hematopoieteic effect was not influencec by lead acdtate administration and protein source. But the LP group showed a significantly lowe hematopoietic effect than the SP, HP, groups. 3) Accumulation of lead in the liver, kidney, teeth by protein source showed no significantly differences. Accumulation of lead in blood, heart of LP group, spleen of LP and HP groups. femur of SP and HP groups fed with casein diet groups were significantly higher than fed with ISP diet groups. By their different levels of group showed generally higher than SP and HP groups. But accumulation of lead in teeth of HP group was high also.
Seo, Joo-Young;Choi, Jin;Kim, Guen-Up;Cho, Sung-Su;Park, Heum-Gi;Lee, Sang-Min
Journal of Aquaculture
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v.21
no.1
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pp.19-25
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2008
We investigated the proper dietary protein and lipid levels for growth and body composition of juvenile sea cucumber Stichopus japonicus. Three replicate groups of the sea cucumber(average weight of 1.1 g) were fed the experimental diets containing different levels of protein(10, 20, 30 and 40%) and lipid(3, 7 and 11%) for 10 weeks. At the end of the feeding trial, survival of each group was over 87%, and there was no significant difference among the groups. Weight gain and specific growth rate(SGR) of sea cucumber were significantly affected by dietary protein(P<0.005) and lipid levels(P<0.001). The highest weight gain and SGR were observed when sea cucumber fed the diet containing 30% protein with 3% lipid(P<0.05). Weight gain and SGR of the sea cucumber fed the diet containing 3% lipid were higher than the other groups at the same protein level except for 40% protein group(P<0.05). Protein content of the sea cucumber fed the diet containing 30% protein with 3% lipid was significantly (P<0.05) higher than those fed 20% protein diets with 7% or 11% lipids and 10% protein diet with 7% lipid. Moisture, lipid and ash contents of the whole body were not significantly different among the groups. Fatty acid compositions such as linoleic acid, EPA(20:5n-3) and DHA(22:6n-3) of the whole body were affected by those of dietary lipid sources. The results of this study indicate that the diet containing 30% protein and 3% lipid is optimal for growth of juvenile sea cucumber.
An extracellular alkaline ${\alpha}$-D-mannosidase produced by a strain named as MA-01 was produced and its preliminary enzyme activity was characterized. Upon determining the 16S rDNA sequence and its homology search, the strain was identified to be one of species of the Bacillus safensis. Localization of enzyme was elucidated that ${\alpha}$-D-mannosidase can be found in culture medium as an extracellular enzyme. In addition, partial enzyme activity of 63% compared with the extracellular enzyme activity was observed in membrane protein. The optimal pH and temperature of the ${\alpha}$-D-mannosidase were pH 7.5 and $37^{\circ}C$, respectively. The $K_m$ and $V_{max}$ values of the ${\alpha}$-D-mannosidase in crude enzyme toward p-nitrophenyl-${\alpha}$-D-mannopyranoside were determined to be $455.6{\mu}M$ and $10.8{\mu}mole/min/mg$ of protein, respectively. To the best of our knowledge, this is the first report described the alkaline ${\alpha}$-D-mannosidase from the family of B. safensis.
Pectolytic enzymes were extracted in apple fruits rotted by Botryosphaeria dothidea, and their activities and change of pectic substances were investigated. Exo-polygalacturonase(exo-PG), exo-polymethylgalacturonase(exe-PMG), polygalacturonate-trans-eliminase(PGTE) and pectin-methyl-trans-eliminase(PMTE) were produced by the pathogen. Activities of exo-PG and exe-PMG extracted from rotten apple fruits were high to 21.15 and 24.65 units/mg protein in specific activity at seven days after inoculation, respectively. Activities of PGTE and PMTE showed 5.60 and 7.90 units/mg protein, respectively, but they were lower than those of the exo-type enzymes. Water-soluble and versene-soluble pectins were 11.50 mg/100 mg-AIS and 7.31 mg/100 mg-AIS at 14 days after inoculation, namely, they were increased by 4.23 and 2.16 mg/100 mg-AIS over those of sound apples, respectively. Total soluble pectic substances of rotten apple were 72.4% of total pectic substances and it was higher by 24.8% than sound apple. Insoluble pectic substance was notably decreased from 15.32 to 7.16 mg/100 mg-AIS according to progress of decay while total pectic substances were not changed remarkably.
본 연구는 치주질환 주요 병인균주 중의 하나인 Porphyromonas gingivalis의 세균내독소가 마우스 대식 세포주인 RAW264.7 세포에서의 nitric oxide의 생성과 iNOS의 발현에 미치는 영향을 분석하고 그 기전을 규명하기 위해 수행되었다. Butanol추출법과 phenol-water법에 의해 P. gingivalis 381로부터 세균내독소를 추출하였으며, NO의 생성은 배양 상층액 내의 nitrite 농도를 측정하여 결정하였다. 또한, iNOS의 western blot 분석과 reverse transcription (RT)-PCR 산물의 분석을 수행하였다. P. gingivalis의 세균내독소는 부가적인 자극이 없는 상태에서도 iNOS의 발현과 NO 생성을 유발하였으며, NF- ${\kappa}B$, microtubule polymerization, protein tyrosine kinase, 그리고 protein kinase C 등이 P. gingivalis 세균내독소에 의한 NO 생성에 간여하는 것으로 여겨진다. 또한, P. gingivalis 세균내독소에 의한 NO 생성에는 L-arginine이 요구되었다. P. gingivalis 세균내독소에 의한 NO 생성은 염증성 치주질환의 발병과 진행에 있어 중요한 역할을 하는 것으로 여겨진다.
To investigate whether human $\beta$$_2$-adrenergic receptor devoid of the C-terminal two transmembrane helices retain its ligand binding activity and specificity, 5'780-bp DNA fragment of the receptor gene which encodes amino acid 1-260 of human $\beta$$_2$-adrenergic receptor was subcloned into the bacterial fusion protein expression vector and expressed as a form of glutathione-S-transferase (GST) fusion protein in E. coli DH5$\alpha$. The receptor fusion protein was expressed as a membrane bound form which was verified by SDS-PAGE and Western blot. The fusion protein expressed in this study specifically bound $\beta$-adrenergic receptor ligand [$^3$H] Dihydroalprenolol. In saturation ligand binding assay, the $K_{d}$ value was 7.6 nM which was similar to that of intact $\beta$$_2$-adrenergic receptor in normal animal tissue ( $K_{d}$=1~2 nM) and the $B_{max}$ value was 266 fmol/mg membrane protein. In competition binding assay, the order of binding affinity of various adrenergic receptor agonists to the fusion protein was isoproterenol》epinephrine norepinephrine, which was similar to that of intact receptor in normal animal tissue. These results suggest that N-terminal five transmembrane helices of the $\beta$$_2$-adrenergic receptor be sufficient to determine the ligand binding activity and specificity, irrespective of the presence or absence of the C-terminal two transmembrane helices.s.s.s.
Photosynthesis uses light energy to drive the oxidation of water at an oxygen-evolving catalytic site within photosystem II (PSII). Chlorophyll binding by the photosystem II subunit S protein, PsbS, was found to be necessary for energy-dependent quenching (qE), the major energy-dependent component of non-photochemical quenching (NPQ) in Arabidopsis thaliana. It is proposed that PsbS acts as a trigger of the conformational change that leads to the establishment of nonphotochemical quenching. However, the exact structure and function of PsbS in PSII are still unknown. Here, we clone and express the recombinant PsbS gene from Arabidopsis thaliana in E. coli and purify the resulting homogeneous protein. We used various biochemical and biophysical techniques to elucidate PsbS structure and function, including circular dichroism (CD), fluorescence, and DSC. The protein shows optimal stability at $4^{\circ}C$ and pH 7.5. The CD spectra of PsbS show that the conformational changes of the protein were strongly dependent on pH conditions. The CD curve for PsbS at pH 10.5 curve had the deepest negative peak and the peak of PsbS at pH 4.5 was the least negative. The fluorescence emission spectrum of the purified PsbS protein was also measured, and the ${\lambda}_{max}$ was found to be at 328 nm. PsbS revealed some structural changes under varying temperature and oxygen gas condition.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.7
no.1
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pp.45-49
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2003
Foliar treatment with different concentrations of potassium chloride (KCl) to mulberry plants resulted in higher level of total chlorophyll, total sugars, soluble protein, in vivo nitrate reductase activity (NRA), net photosynthetic rate (NPR), pWUE and leaf yield. Optimal concentration was found to be 10.0 mM KCl with limited irrigation provided in the mulberry plantation planted in 90 ${times}$ 90 cm spacing. The deleterious effect of soil moisture stress condition has been found to be overcome by KCl foliar spray twice at 15 days interval. Regression and correlation coefficients were analyzed, and a strong positive correlation was found between chlorophyll and total sugars, soluble protein and in vivo nitrate reductase activity, leaf dry weight and net photosynthetic rate and pWUE and net photosynthetic rate.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2003.10a
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pp.90-90
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2003
체세포 핵이식에 의한 복제기술은 매우 낮은 성공률 나타내고 있어 실용화에 지장을 초래하고 있다. 이것은 후생적인 유전현상인 reprogramming이 불완전하게 이루어지기 때문인 것으로 추측되어지고 있다(Reik et al., Theriogenology 2003, 59: 21-32; Han et al, Theriogenology 2003, 59: 33-44). 체세포 핵이식 후에 태아사망의 원인이 태반의 비정상적인 기능과 관계가 있는 것으로 추정되는데 복제시 태아사망의 원인을 찾기 위해 본 연구를 시행하였다. 한우에서 체세포 복제 후 임신 말기에 태아가 사망한 태반조직 3개와 IVF 수정란 이식 후 동일한 시기에 제왕절개술을 실시한 태반조직 2개를 실험에 이용하였다. 태반 protein을 Two-Dimensional electrophoresis와 Mass spectrometer를 이용하여 분석 비교하였다. IPG-system을 이용하여 pH 4~7, pH 6~9에서 1차 전기영동을 한 후, 8~l6%의 SDS-PAGE gel에 2차 전기영동을 실시하였고 G-250 Coomassie로 염색하였다. gel 이미지는 Malanie III program을 이용하여 분석하였다. 전체 gel에서 약 1800개의 구분 가능한 protein spot이 나타났다. pH 4~7 범위에서 양적으로 차이나는 것 15개 중 복제한우 태반에서 증가되는 protein spot 5개와 감소하는 protein spot 10개를 골라 protein identification을 실시하였다. MALDI-TOF-MS를 이용하여 동정한 결과 phosphatidylinositol transfer protein-$\alpha$와 interleukin-18 등의 protein이 복제태반에서 발현이 증가되었고, 복제한우에서 발현이 감소되는 것으로는 vimentin, Rho-GDI-$\beta$, TRAST $\beta$-chain, ovarian sterol carrier protein 2, triosephosphate isomerase, tropemyosin beta chain, Aldose reductase 등으로 나타났다. 이러한 protein들은 inositol 지질 신호전달과 면역시스템, 세포분열, 산소 운반, steroidogenic 세포에서의 콜레스테롤 이동, 촉매 작용, 대사 작용 등에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 체세포 복제에 의한 태아사망 원인은 태반에서 이러한 protein들의 비정상적인 발현에 기인된 것으로 추정된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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