Background: p53 gene variants i.e. 16 bp duplication in intron 3, Arg72Pro in exon 4 and G>A in intron 6 have been reported to modulate susceptibility to various malignancies. Therefore, the present study evaluated the role of these p53 polymorphisms in oral cancer susceptibility in a population from Gujarat, West India. Method: Genotype frequencies at the three p53 loci in 110 controls and 79 oral cancer cases were determined by the PCR-RFLP method. Results: Heterozygous individuals at exon 4 showed protection from developing oral cancer. Homozygous wild and heterozygous individuals at intron 3 and those heterozygous at exon 4 in combination appeared to be at lowered risk. Furthermore, carriers of the 16 bp duplication allele at intron 3, proline allele at exon 4 and G allele at intron 6 were protected from oral cancer development. Conclusion: p53 polymorphisms, especially Arg72Pro in exon 4 could significantly modify the risk of oral cancer development in Gujarat, West Indian population.
The meiotic process from the primordial stage to zygote in female germ cells is mainly adjusted by post-transcriptional regulation of pre-existing maternal mRNA and post-translational modification of proteins. Several key proteins such as the cell cycle regulator, Cdk1/cyclin B, are post-translationally modified for precise control of meiotic progression. The second messenger (cAMP), kinases (PKA, Akt, MAPK, Aurora A, CaMK II, etc), phosphatases (Cdc25, Cdc14), and other proteins (G-protein coupled receptor, phosphodiesterase) are directly or indirectly involved in this process. Many proteins, such as CPEB, maskin, eIF4E, eIF4G, 4E-BP, and 4E-T, post-transcriptionally regulate mRNA via binding to the cap structure at the 5' end of mRNA or its 3' untranslated region (UTR) to generate a closed-loop structure. The 3' UTR of the transcript is also implicated in post-transcriptional regulation through an association with proteins such as CPEB, CPSF, GLD-2, PARN, and Dazl to modulate poly(A) tail length. RNA interfering is a new regulatory mechanism of the amount of mRNA in the mouse oocyte. This review summarizes information about post-transcriptional and post-translational regulation during mouse oocyte meiotic maturation.
DNA fragments (51-587 bp) were separated by capillary electrophoresis using entangled polymer, hydroxyethylcellulose, in uncoated fused silica capillary columns. The factors affecting the separation of DNA fragments with hydroxyethylcellulose media were evaluated, i.e., the concentration of buffer and entangled polymer, effects of additives (methanol, ethidium bromide, EDTA), temperature, and injection methods. Maximum performance was obtained by adding 5% methanol in 0.5% hydroxyethylcellulose solution at $30^{\circ}C$. Addition of methanol in polymer media increased the resolution of small size DNA fragments (< 100 bp). On the other hand, addition of ethidium bromide and EDTA, which are commonly used in conventional DNA separation, reduced the resolution of DNA fragments in the polymer solution. It turns out that the separation behavior of DNA in entangled polymer is more sensitive to the running condition compared to that in polyacrylamide gel-filled capillary, but the reproducibility of DNA separation in entangled polymer is reliable.
The Bacillus stearothermophilus cdd gene encoding cytidine deaminase (cytidine/2'-deoxycytidine aminohydrolase; EC 3.5.4.5) was isolated through shot gun cloning by oomplementation of an E. coli cdd mutation. Primarily 3.0 kbp of the exogenote was cloned into the Pstl site of pBR322 (pJSC101). By subsequent deletion and subcloning from the insert of pJSC101 with cdd$^+$ and tetracycline resistancy, about 1.35 kbp of the EcoRI$_1$/PstI$_2$ fragment containing the cdd gene was isolated as pJSC201. The minicell experiment revealed a molecular mass of 33,000 dalton for polypeptide from the cloned DNA fragment complementing the cdd gene. From the lacZ fusion of 550 bp fragment of the EcoRI$_1$/AuaI as a putative promoter region, the transcription direction of the cdd gene on pJSC201 is from EcoRI towards the PstI sites, When the cdd gene was expressed in B. subtilis ED4O (cdd$^-$, pyr$^-$) by transformation with the E. coli-B. subtilis shuttle vector, the gene expression occured more efficiently than in E. coli and the gene appears to be stably maintained in B. subtitis as well as in E. coli.
A multiplex PCR method was designed by employing primers specific for the eaeA gene, conserved sequences of Shiga-like toxins (SLT-I.II), and the 60-MDa plasmid of enterohemorrhagic E. coli (EHEC) O157:H7 strain. A set of six synthetic oligonucleotide primers derived from sequences of the SLT-I.II, eaeA, and 60-MDa plasmid genes of E. coli O157:H7 were used in a multiplex PCR amplification procedure to detect these genes in the same enteric pathogens. In two enterohemorrhagic E. coli O157:H7 (ATCC 35150, ATCC 43894) reference strains, PCR products of 317bps (eaeA), 228bps (SLT-I.II), and 167bps (60-MDa plasmid) were successfully amplified simultaneously in a single reaction. However, the specific PCR products were not amplified in control strains of other enteric bacteria. The sensitivity of the multiplex PCR assay for detection of the SLT-I.II, eaeA, and 60-MDa plasmid genes of E. coli O157:H7 was found to be 2.5$\times$10$^{6}$ of bacteria in diarrheal stool to amplify all three bands. The multiplex PCR technology will allow large-scale screening of many clinical specimens or contaminated foods, and will be a very useful method for the detection of a wide range of microorganisms present in the environment, including EHEC O157:H7 in various types of specimens. The multiplex PCR assay has the potential to be used as a specific and rapid method for clinical diagnosis of disease caused by EHEC O157:H7.
The effects of histamine on cardiovascular system in 6 dogs were analyzed. Mongrel dogs, 10 to 16 kg in body weight, were anesthetized with Nembutal (30 mg/kg) and arterial blood pressure, heart rate, central venous pressure, electrocardiogram were recorded and measured plasma potassium concentration. Histamine $(100{\mu}g/ml)$ was infused slowly at the rate of 0.25 ml/min through the external jugular vein until BP was 80/60 and maintained restored BP for more than 5 min. The process repeated $4{\sim}5$ times. At each time before and after infusion every items were recorded and measured. 1. Arterial blood pressure was 142/105 (mean 117) mmHg in control and decreased to 90/60 68) after histamine infusion. 2. Heart rate changed from 175 beat/min to 150 and central venous pressure from 6.2 to 5.2 cm $H_2O$. 3. Plasma potassium concentration was 4.3 mEq/L and slightly increased to 4.7 mEq/L but it was not significant statistically. 4. Most characteristic changes revealed in EKG especially in T-waves. Height, Width, Steepness, and Slimness were increased $1.5{\sim}3.7$ times than control level and Pointedness decresed 0.5 times than before.
Lee, Soo Jeong;Kim, Seong Yong;Moon, Dae Yeon;Kim, Jin-Koo
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.18
no.4
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pp.405-410
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2015
The Korean lumpsucker, "Do-chi", reported previously as Eumicrotremus orbis, was reinvestigated on the basis of specimens collected from Korea, Japan, and the USA. Morphological and genetic analyses showed that "Do-chi" corresponds to Eumicrotremus taranetzi and clearly differs from E. orbis. Eumicrotremus taranetzi is readily distinguishable from E. orbis by its large, high spiny tubercles with weak, small or no prickles (small, low spiny tubercles with distinct prickles in E. orbis) and 3-4 pairs of spiny tubercles in the dorsal rows (five pairs in E. orbis). We compared partial sequences (466 bp) of the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I genes of "Do-chi" and other Eumicrotremus species. "Do-chi" and E. taranetzi were clustered by the smallest Kimura two-parameter genetic distance (d = 0.000-0.002) and were clearly separated from E. orbis (d = 0.035-0.037). Therefore, our results suggest that the scientific name of the Korean lumpsucker, "Do-chi" should be changed to E. taranetzi.
BACKGROUND/OBJECTIVES: The type of sweet snack incorporated into an energy-restricted diet (ERD) may produce differential effects on metabolic improvements associated with body weight (BW) loss. This study compared effects of incorporating either twice daily energy-controlled dark chocolate snacks plus once daily sugar-free cocoa beverage (DC) to non-chocolate snacks plus sugar-free non-cocoa beverage (NC) into an ERD on BW loss and metabolic outcomes. MATERIALS/METHODS: In an 18-week randomized comparative trial, 60 overweight/obese premenopausal women were assigned to DC (n = 30) or NC group (n = 30). Dietary intake was measured at baseline and week 18, and BW, anthropometrics, blood pressure (BP) and serum glucose, insulin and lipid concentrations were measured at baseline, and weeks 6, 12 and 18. Data were analyzed using repeated measures ANOVA. RESULTS: Using intention-to-treat analysis, women in DC and NC groups reduced energy intake (both P < 0.001) and lost $4.4{\pm}0.6kg$ and $5.0{\pm}0.9kg$ (both P < 0.001), respectively. Both groups lowered systolic and diastolic BP [DC = 2.7 (P < 0.05), 2.7 (P < 0.01); NC = 3.4 (P < 0.01), 4.2 (P < 0.01) mmHg, respectively]. Glucose and insulin concentrations decreased by 0.72 mmol/L (P < 0.001) and 13.20 pmol/L (P < 0.01) in DC group and by 0.83 mmol/L (P < 0.001) and 13.20 pmol/L (P < 0.01), respectively, in NC group. Total cholesterol increased in NC group (P < 0.05), with no significant lipid changes in DC group. There were no significant differences in biomarker outcomes between groups. CONCLUSIONS: Overweight/obese premenopausal women following an 18-week ERD that included either DC or NC sweet snack and sugar-free beverage lost equivalent amounts of BW and improved BP measurements and glucose and insulin concentrations.
A gene coding for a novel putative $\sigma$ factor of RNA polymerase has been identified from Streptomyces coelicolor A3(2) using Escherichia coli rpoS gene fragment as a probe. The 486 bp rpoS gene fragment was amplified from E. coli genomic DNA by PCR with two synthetic oligonucleotides, the sequences of which were deduced from the amino acid sequences in the regions 2.3 and 4.2 conserved among various bacterial factors. When E. coli genomic DNA fragments were hybridized with cloned rpoS probe, only one band corresponding to rpoS gene (3.2 kb PvuII fragment or 2.3 kb KpnI fragment) was detected. In S. coelicolor, however, two bands were detected both in PvuII digested DNA and SalI digested DNA. 3.5 kb PvuII fragment which binds the rpoS gene probe was cloned (pMS1) from the sublibrary, and the nucleotide sequences of 1.0 kb BamH'/HincII subclone (pBH2) was partially determined. The nucleotide sequences revealed extensive similarity to other $\sigma$ factor genes of S. coelicolor (hrdA, hrdB, hrdC, hrdD), S. aureofaciens (hrdA, hrdB, hrdC, hrdD), Synechococcus species, Pseudomonas aeruginosa, Stigmatella aurantiaca, and Anabaena species. The nucleotide sequences in regions 1.2 and 4 were compared with the corresponding regions of 5 known ${\sigma}$ factor genes of S. coelicolor by multiple alignment. It turned out that the cloned gene is most closely related to hrdA showing 88% amino acid similarity in region 1.2 and 75% in region 4.
In order to develop molecular markers related to stay green phenotype, AFLP analysis was conducted using near-isogenic lines for either stay green or non stay green trait. Both lines have characteristics of multi-ear and tillers (MET). Two out of 64 primer combinations of selective amplification identified three reproducible polymorphic fragments in MET corn with stay green. Both of E+AGC/M+CAC and E+AAG/M+CAA primer combinations produced two and one specific polymorphic fragments linked to stay green trait, respectively. For the conversion of AFLPs to sequence tag sites (STSs), primers were designed form both end sequences of each two polymorphic fragments. One fragment, which was amplified with E+AAG/M+CAA primer combinations, possessed 298 bp long and showed a $91\%$ homology with maize retrotransposon Cinful-l. One out of two polymorphic fragments produced with E+AGC/M+CAC primer combination had 236 bp long and matched a $96\%$ homology with an intron region of 22kDa alpha zein gene cluster in Zea mays. One out of two PCR fragments amplified with MET2 primer set in the stay green MET was not produced in the non-stay green MET. The developed AFLP and STS marker could be used as an efficient tool for selection of the stay green trait in the MET inbred.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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